83例肾功能衰竭患者血、尿D二聚体检测分析

慢性肾功能衰竭(CRF),是指原发性或继发性慢性肾脏疾病所引起的、慢性肾功能减退及各种代谢紊乱和临床症状组成的综合症。其病情发展过程中,均有高凝——粘滞状态参与。本文选择了与微血栓纤溶指标-血、尿D二聚体测定,作为探讨CRF的病理与临床疗效、预后的评估指标。 1 材料与方法     

重组人肝细胞生长因子激活因子质粒的构建、表达和功能研究

背景:肝细胞生长因子激活因子(HGFA)是活化单链前体HGF(pro-HGF)成为有生物学功能的HGF的关键酶.在受损组织器官的修复和再生中发挥重要作用。目的:制备rhHGFA-Fc融合蛋白并证实其具有肝细胞保护功能。方法:采用基因重组技术构建表达人源化HGFA成熟肽段与人IgG Fc段融合蛋白的载体,以脂质体介导法转染人胚肾293细胞。纯化293细胞表达产物,以蛋白质印迹法鉴定纯化蛋白(rhHGFA-Fc融合蛋白)及其对pro-HGF的酶切活性,以流式细胞术检测融合蛋白介导的肝细胞凋亡抑制作用。结果:SDS-PAGE显示转染重组质粒的293细胞总蛋白纯化产物在62 kDa处显示单一蛋白条带。蛋白质印迹法结果显示纯化的rhHGFA-Fc融合蛋白能与抗hHGFA单克隆抗体发生特异性反应,并将pro-HGF酶切为α链和β链,酶切活性呈剂量依赖性,半效酶切活性(IC_(50))为8.22 nmol/L;流式细胞术结果显示融合蛋白通过激活pro-HGF发挥其抑制肝细胞凋亡的作用。结论:293细胞表达的rhHGFA-Fc融合蛋白纯度高、酶切活性强,可高效激活pro-HGF,对于肝组织严重损伤,特别是肝硬化基础上肝损伤的治疗具有潜在价值。