SRBC膜提取物及其对猪PBMNC激活作用的研究

胰酶水解绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）膜得到粗提物，经离子交换层析部分纯化后，获得组分ＴＲＦ－Ⅲ（Ｔｒｙｐｓｉｎ－ｒｅｌｅａｓｅｄｆｒａｃｔｉｏｎⅢ）具有明显抑制ＳＲＢＣ与猪外周血淋巴细胞形成Ｅ玫瑰花的活性，花环形成率与ＴＲＦ－Ⅲ含量有明显的函数关系，电泳测定其分子量为６６ｋＤ。ＴＲＦ－Ⅲ单独作用尽管对ＰＢＭＮＣ的增殖无作用，但可增强ＰＨＡ刺激ＰＢＭＮＣ的增殖作用，ＴＲＦ－Ⅲ单独作用于ＰＢＭＮＣ可显著增强     

CD2配体的结构和生物学功能

ＬＦＡ３／Ｔ１１ＴＳ／ＣＤ４８／ＣＤ５９是Ｔ细胞表面分化抗原ＣＤ２分子的配体。ＣＤ２与其配体间相互作用，一方面，增加Ｔ细胞与靶细胞的粘附作用而有助于效靶细胞间的结合；另一方面，激活Ｔ细胞参与后者的辅助活化作用。     

SRBC膜提取物对猪PBMNC第二信使的影响

胰酶水解绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）释放膜表面活性蛋白组分Ⅲ（ＴＲＦ－Ⅲ），单独作用可使猪外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）胞内ｃＡＭＰ水平升高，以１００μｇ／ｍｌ浓度刺激达最高峰，由对照组０．９４±０．１４ｐｍｏｌ／Ｌ升高到２．７５±０．２５ｐｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０１）。如果ＰＢＭＮＣ事先与腺苷酸环化酶（ＡＣａｓｅ）抑制剂ＬｉC１孵育后再以ＴＲＦ－Ⅲ或ＰＡＨ刺激。ｃＡＭＰ增高受到抑制（Ｐ＜０．０１）；而ＥＤＴＡ－２Ｎａ（一种磷酸二酯酶ＰＤＥ抑制剂）对此ｃＡＭＰ升高无影响。结果提示，此ｃＡＭＰ升高主要是通过活化ＡＣａｓｅ水解ＡＴＰ生成ｃＡＭＰ，而不像是抑制ＰＤＥ减少ｃＡＭＰ降解引起的。ＴＲＦ－Ⅲ诱导猪ＰＢＭＮＣ胞内Ｃａ~(２＋)浓度升高，以１００μｇ／ｍｌ刺激２分钟升高最多，由对照组的２４２±７ｎｍｏｌ／Ｌ升高到３２３±１５ｎｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０１）。以ＥＧ－ＴＡ除去胞外Ｃａ~(２＋)再以ＴＲＦ－Ⅲ或ＰＡＨ刺激，仅观察到小范围［Ｃａ~(２＋)］ｉ升高。看来这一过程包括了刺激胞内Ｃａ~(２＋)释放和胞外Ｃａ~(２＋)内流两种方式。以上结果证明，ＴＲＦ－Ⅲ对淋巴细胞功能影响与细胞内第二信使有关。     

CD2配体的结构和生物学功能

ＬＦＡ３／Ｔ１１ＴＳ／ＣＤ４８／ＣＤ５９是Ｔ细胞表面分化抗原ＣＤ２分子的配体。ＣＤ２与其配体间相互作用，一方面，增加Ｔ细胞与靶细胞的粘附作用而有助于效靶细胞间的结合；另一方面，激活Ｔ细胞参与者的辅助活化作用。     

非小细胞肺癌中ROS1基因重排及其临床意义

最近研究显示,包括非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)在内的许多恶性肿瘤存在ROS1受体酪氨酸激酶基因重排。ROS1基因重排作为一种新发现的NSCLC亚型,其发生率约占NSCLC的1%-2%,优势人群通常为年轻、不吸烟的肺腺癌患者,这些临床特征与ALK重排的NSCLC患者类似。体外实验和早期临床试验均显示,克唑替尼对ROS1重排阳性的癌症患者具有明显的抗肿瘤活性,治疗第8周和第16周时疾病控制率分别为76%和60%,治疗患者的总缓解率为56%。进一步了解ROS1基因重排在NSCLC发病中的作用,提高ROS1基因重排的检测技术,发现ROS1重排患者及研发特异性ROS1激酶抑制剂将为肿瘤个体化治疗增添新的篇章。     

CD2途径T细胞激活与PTK

同T淋巴细胞激活后Ser/Thr蛋白激酶(PKC,PKA)作用一样,Tyr蛋白激酶(PTK)在激活T细胞中也有重要作用,参与T细胞活化的PTK主要有两种,分子量为56KD的P56~(LCK)和分子量为59KD的P59~(fyn).它们结合于胞膜内表面接受抗原激活后传递来的信号而活化,使得底物蛋白质上的Tyr磷酸化,从而激活或抑制这些活性蛋白质而发挥作用,本文重点论述PTK的生物学特性及其参与CD2途径活化T细胞的三种信号传递模式.     

应用PCR技术检测血清抗双链DNA抗体

人工合成一段６２核苷酸的核苷酸序列，中间２５个核苷酸为随机合成。经ＰＣＲ扩增后提供一个含有亿万种结构变异ＤＮＡ片段库供体ＤＮＡ抗体反应。阳性病人血清沉淀的特异双链ＤＮＡ片段经ＰＣＲ扩增后出现特异的阳性扩增区带。结果表明，４０例ＳＬＥ血清经ＰＣＲ检测３２例为阳性，而Ｆａｒｒ放免法１４例为阳怀，两者之间有显著差异，４０例非ＳＬＥ结缔组织病人血清，两者阳性率分别为７．５％和２．５％，两者比较无明显差异。     

苯丙酮尿症患者苯丙氨酸羟化酶基因的两个新突变

寻找中国人苯丙酮尿症（ＰＫＵ）新的基因突变点，研究其对ＰＫＵ致病的作用，藉以提高该病的临床诊断率。方法应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增苯丙氨酸羟化酶（ＰＡＨ）基因外显子４区域。对发现的新突变，通过双链ＤＮＡ循环测序方法加以确定。结果２４例ＰＫＵ样品中，７例电泳行为与正常对照有差异，分属两种类型。第一种类型仅有１例，突变单链的两条带，一条位于正常单链的前方，一条滞后。测序结果显示突变发生在内含子４的５′受体位点（ＧＴ→ＡＴ）；第二种类型较多见，突变单链的两条带均位于正常单链前方，测序结果显示突变发生在内含子３中，位于内含子３的３′端第１１个核苷酸，为Ａ→Ｃ取代。结论两种突变类型的第一种发生于切接位点，第二种为一多态性改变（突变频率为２０％）。     

应用免疫PCR法研究抗双链DNA抗体识别的DNA序列

用１段合成的１０８ｂｐ ＤＮＡ及免疫ＰＣＲ法，研究了ＳＬＥ血清抗双链ＤＮＡ抗体识别的ＮＤＡ序列。结果发现；１０个长度为１０８ｂｐ序列各异的已知ＤＮＡ片段，同具有亿万变化的１０８ｂｐＤＮＡ片段库一样，与抗双链ＤＮＡ抗体有良好反应，其中间２５个ｂｐ的变异不影响抗体与抗原反应；ＳＬＥ血清中抗体趋向于易形成非ｂａｔａ－ＤＮＡ结构的ＤＮＡ特异结合。