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1.
2.
根据GenBank中马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(BmG3PD基因)序列设计引物, 以马来丝虫mRNA为模板, RT-PCR扩增BmG3PD基因, 将其克隆入pGEM-T载体, 转化大肠埃希菌(E. coli)DH5α, 筛选阳性克隆。经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切及PCR鉴定, 获得阳性重组质粒pGEM-BmG3PD, 经序列分析及同源性比较, 以及对其编码产物进行B细胞表位预测, 结果表明PCR扩增的特异性条带为1 020 bp, 与预期相符, 与GenBank已知基因序列同源性为99%。编码产物B细胞表位预测, 氨基酸区域可能在22~36、242~255、303~318和326~336位。 相似文献
3.
4.
BALB/c妊娠小鼠用20%乙醇作为饮水,平均每d每kg体重摄入乙醇15g。与对照组相比,乙醇组胎鼠肝细胞胞质溶解,部分线粒体肿胀,嵴排列紊乱、溶解破坏,外膜破裂。部分线粒体小、基质电子密度高。有些粗面内质网池扩张、脱颗粒。胞质溶解区域见较多脂肪空泡和溶酶体。毛细胆管普遍扩张,激绒毛短小。经体视学测量,乙醇组线粒体、粗面内质网体积密度与对照组相比有显著下降,具统计学意义。线粒体截面数密度和数密度均下降。结果表明乙醇能导致胎鼠肝细胞超微结构的损害。 相似文献
5.
林海英 《国外医学:妇产科学分册》2008,35(3):207-210
促性腺激素释放激素(GnRH)类似物包括GnRH激动剂(GnRHa)和GnRH拮抗剂(GnRHA),两者的分子结构是对GnRH不同位点氨基酸的改变,决定了两者的作用机制不同。GnRHA的研究进展缓慢,继第一、二代GnRHA后,现第三代GnRHA用于临床Ⅲ期实验,西曲瑞克(cetrorelix)作为第三代GnRHA有其独特的药物动力学和稳定性,也有不良反应和禁忌证,在临床广泛应用于激素依赖性疾病,如子宫内膜异位症、子宫肌瘤、妇科恶性肿瘤、性早熟等,应用范围与GnRHa类似,但与之比较又有自身的特点和优点。 相似文献
6.
目的 克隆周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(BmCPI)基因,并通过序列测定、分析及编码产物的B细胞表位预测,为进一步研究该基因的功能奠定基础.方法 从周期型马来丝虫虫体中抽提总RNA,以mRNA为模板,采用RT-PCR法体外扩增BmCPI基因,扩增产物经初步鉴定后将其克隆入pGEM-T载体,转化大肠埃希菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒pGEM-TBmCPI,经测序验证,并进行同源性比较.应用5种参数和方法对其编码产物进行B细胞表位预测.结果 RTPCR扩增出一条约621 bp大小的特异性条带,重组质粒双酶切的PCR结果与预期相符,DNA序列分析与GeneBank已知的基因序列同源性为99%.其编码产物经表位预测分析,B细胞表位可能在23~32、50~79、117~126位氨基酸区域.结论 成功构建了周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂重组质粒pGEM-T克隆载体,并进行了序列测定及编码产物的B细胞表位预测,达到预期目标,为进一步研究该基因的功能提供条件. 相似文献
7.
目的 研究丙氨瑞林穴位注射对子宫内膜异位模型大鼠的镇痛作用及对P物质(SP)表达的影响.方法 选取57只SD成年雌性大鼠,随机分为空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、假手术对照组(C组)、生理盐水穴位注射组(D1组)、丙氨瑞林肌肉注射组(D2组)、丙氨瑞林穴位注射组(D3组).建立大鼠子宫内膜异位模型,4周后用药.治疗4周后处死.分别测量用药前后痛阈的变化,免疫组化法测定SP在各组子宫及子宫内膜异位病灶标本中的表达.结果 (1)B组痛阈显著低于A组和C组;D1组、D2组、D3组痛阈明显高于B组;D3组痛阈明显高于D1组和D2组,差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01).(2)SP主要表达于细胞浆中,呈棕黄色颗粒,分布于子宫内膜(异位和在位)上皮细胞、子宫平滑肌细胞、结缔组织、血管内皮细胞及炎性细胞中.A组、B组、C组、D1组、D2组、D3组SP表达阳性率分别为17.78%、92.22%、22.22%、57.00%、48.00%、25.oo%,B组显著高于其他各组,且阳性级别最高;D3组SP表达阳性率和阳性级别低于D1组和D2组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01).结论 小剂量丙氨瑞林穴位注射可有效抑制大鼠子宫内膜异位症引起的疼痛,其镇痛机制可能是通过抑制SP的释放,从而达到镇痛效果.丙氨瑞林穴位注射优于丙氨瑞林肌肉注射,有望成为治疗子宫内膜异位症的新方法. 相似文献
8.
周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶编码基因的克隆与真核表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 克隆和表达周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶(BmGAPDH)的编码基因.方法 依据公布的BmGAPDH基因序列设计引物,以周期型马来丝虫总RNA为模板,反转录PCR(RT-PCR)扩增目的 编码基因.PCR产物经TA克隆后,克隆至载体pGEM-T Easy中,经PCR和双酶切鉴定后,亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/BmGAPDH,转染COS-7细胞后进行RT-PCR验证.用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)对获得重组蛋白(rBmGAPDH)进行分析和鉴定.结果 转染的COS-7细胞高水平表达BmGAPDH的mRNA,根据克隆的目的 基因序列推导的氨基酸序列与GenBank登录的结果 一致.SDS-PAGE分析显示重组蛋白rBmGAPDH相对分子质量(Mr)约为43 000.结论 成功进行了BmGAPDH编码基因的克降和真核表达.Cloning,weukaryotic expremion of the gene encoding glyceraidehydes-3-phosphate dehydrogenase from periodic Brugia malayi XIE Dong-fimg,FANG Zheng,HUANG Wei-qun,SHEN Qin,TONG Hai-yan,XUBang-sheng. 相似文献
9.
目的克隆周期型马来丝虫肌球蛋白(BmMyosin)基因,进行序列测定、分析及编码产物的B细胞表位预测。方法依据公布的BmMyosin基因序列设计引物,以周期型马来丝虫总RNA为模板,反转录PCR(RT-PCR)扩增目的编码基因。扩增产物经初步鉴定后将其克隆入pGEM-T载体,转化大肠埃希菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒pGEM-BmMyosin,经测序验证,并进行同源性比较。应用5种参数和方法对其编码产物进行B细胞表位预测。结果RT-PCR扩增出一条约1 292 bp大小的特异性条带,重组质粒双酶切的PCR结果与预期相符,DNA序列分析与GeneBank已知的基因序列同源性为98.45%。经表位预测分析,BmMyosin的B细胞表位可能在287~300位、339~350位和416~422位氨基酸区域。结论成功构建了周期型马来丝虫肌球蛋白重组质粒pGEM-T克隆载体,对其编码产物进行B细胞表位预测。为蛋白质特性分析及免疫学研究提供基础依据。 相似文献
10.
白细胞精子症病人精浆可溶性白细胞介素2受体和精浆免疫抑制物水平变化探索 总被引:1,自引:0,他引:1
本文研究了白细胞精子症病人精浆sIL-2R水平和HSPIM水平变化。发现白细胞精子症精浆中sIL-2R水平明显高于正常生育或非白细胞精子症的不育症对照组,而HSPIM却明显低于各对照组;同时sIL-2R水平和HSPIM水平之间为负相关关系。结果提示:白细胞精子症精浆sIL-2R水平升高时,男性生殖管道壁中淋巴细胞处于活化状态,它可能会引起白细胞大量进入精液,另外HSPIM水平下降可能是引起淋巴细胞活化的原因或是它在减少IL-2R表达过程中被消耗所致。 相似文献