PTTG 基因对非霍奇金淋巴瘤细胞增殖能力的影响

目的：观察垂体瘤转化基因（pituitary tumor-transforming gene ,PTTG）对非霍奇金淋巴瘤细胞SUDHL-4增殖能力的影响。方法通过shRNA的方法在高表达PTTG的SUDHL-4细胞中敲降PTTG基因,通过MTT实验、细胞周期分析检测SUDHL-4生物学行为的变化。结果 PTTG被敲降后SUDHL-4细胞的生长速度明显下降,细胞G0／G1比例、S期比例下降;G2／M期比例升高,细胞阻滞于G2／M期,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 PTTG基因可能在非霍奇金淋巴瘤的发生发展中起重要作用,可能成为判断非霍奇金淋巴瘤预后的分子标志物及临床治疗的靶点。     

银杏达莫注射液抑制大鼠静脉血栓形成及作用机制探讨

目的研究银杏达莫注射液对大鼠静脉血栓形成的影响,并探讨其作用机制.方法建立大鼠静脉血栓模型和血瘀模型,分别测定血栓重量、凝血时间参数、优球蛋白溶解时间(ELT)和血液流变学等指标.结果在静脉血栓模型大鼠,银杏达莫注射液低、中、高剂量组(0.9,1.8,2.25 mL·kg-1)能明显降低静脉血栓重量(P＜O.05或P＜0.01),低、中剂量能明显缩短ELT,但低剂量显著延长活化部分凝血活酶时间、凝血酶原时间和凝血酶时间(P＜0.05或P＜O.01).在血瘀模型大鼠,银杏达莫注射液高剂量组(2.25 mL·kg-1)大鼠的全血黏度、血浆黏度、红细胞压积均显著低于模型大鼠(P＜0.05或P＜0.01).结论在一定剂量下,银杏达莫注射液能够抑制静脉血栓的形成,其机制可能与改善血液流变学性质和增加纤溶作用等有关.     

PRDM1 基因对非霍奇金淋巴瘤细胞增殖能力的影响

目的 观察PRDM1对非霍奇金淋巴瘤细胞SUDHL-4增殖能力的影响。方法 通过质粒转染的方法在低表达PRDM1的SUDHL-4细胞中过表达PRDM1基因,通过MTT实验、细胞周期分析检测SUDHL-4生物学行为的变化。结果 过表达PRDM1的SUDHL-4细胞的生长速度明显下降,细胞G0/G1比例、S期比例下降;G2/M期比例升高,细胞阻滞于G2/M期,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 PRDM1基因表达缺失可能在非霍奇金淋巴瘤的发生发展中起重要作用,可能成为判断非霍奇金淋巴瘤预后的分子标志物及临床治疗的靶点。     

组织蛋白酶B增强弥漫大B细胞淋巴瘤侵袭性的机制研究

目的文章基于已获知的研究成果基础之上,即:CTSB在DLBCL中高表达并参与侵袭过程;CTSB在正常淋巴结中表达阴性,在弥漫大B细胞淋巴瘤组织中高表达;在弥漫大B淋巴瘤细胞株SUDHL2中过表达CTSB能够显著增加细胞的穿膜能力,进一步研究组织蛋白酶B增强l弥漫大B细胞淋巴瘤侵袭性的机制。方法应用Transwell侵袭实验检测稳定细胞株体外侵袭能力,在过表达和沉默表达CTSB的DLBCL细胞株中,采用Western-blot和免疫荧光检测各信号通路节点蛋白(如PI3K/Akt/GSK-3β,TGF-β,Wnt,Snail和ZEB-1等)的表达或活化情况。在过表达DLBCL的细胞株中使用RNAi技术和通路蛋白抑制剂如LiCl等下调通路蛋白活性,Western Blot和免疫荧光等方法检测各信号通路节点蛋白的表达情况,并应用Transwell侵袭实验检测通路抑制后对DLBCL细胞侵袭能力的影响。使用免疫共沉淀、Western Blot及质谱分析等技术检测和确定与其结合的蛋白进而探讨CTSB的功能机制。结果 CTSB在DLBCL组织内源性表达水平显著增强,患者临床病理特征和预后的相关性研究表明有无B症状、ALC水平高低、IPI指数高低、LDH水平是否升高等临床特征指标都会影响患者预后3年生存率和5年生存率。CTSB能显著增强对DLBCL细胞侵袭能力、肿瘤细胞增值能力、转移能力。过表达CTSB的DLB‐CL细胞株中TGF-βSnail和ZEB-1活性,均会抑制DLBCL细胞侵袭能力。结论 CTSB促进DLBCL瘤细胞发生发展转移的机制可能部分是通过上调Syndecan-I实现的CTSB可增强DLBCL细胞侵袭能力,其机制是通过激活信号通路增强侵袭表型细胞分子,增强细胞的侵袭能力。     

落地生根对小鼠脾淋巴细胞增殖、IL-2的影响

目的：探讨落地生根的免疫调节作用。方法；用药地生根水浸出液给小鼠灌胃，检测小鼠脾淋巴细胞增殖和IL－2的产生。结果：高浓度的落地生根能明显的增强脾淋巴细胞增殖反应，与生理盐水对照组比较有非常显著差异（P＜0．01）。对细胞因子IL－2的产生也有促进作用（P＜0．05）。结论：落地生根可增强小鼠的免疫功能。     

Notch信号通路在急性移植物抗宿主病中的作用

目的:分析异基因造血干细胞移植后患者Notch1的表达,了解Notch1信号通路与急性移植物抗宿主病发生、发展的关系。方法:采集54例异基因造血干细胞移植后患者外周血,同期采集26例自体造血干细胞移植患者和10例正常志愿者外周血标本作为对照,检测Notch1和Hes-1 mRNA的表达,分析其与急性移植物抗宿主病的关系。结果:异基因造血干细胞移植患者Notch1和Hes-1 mRNA表达较自体造血干细胞移植患者和正常志愿者高(P0.05),其中急性移植物抗宿主病患者Notch1 mRNA表达明显高于非急性移植物抗宿主病患者、自体造血干细胞移植患者及正常志愿者(P0.05)。Notch1 mRNA的表达与急性移植物抗宿主病总体分度呈正相关,急性移植物抗宿主病越严重,Notch1 mRNA的表达越高(P0.05)。结论:Notch1信号参与调节急性移植物抗宿主病;Notch1及其靶基因的表达与急性移植物抗宿主病的严重程度密切相关。     

黄芪注射液对大鼠静脉血栓形成的影响

黄芪注射液在临床上已用于多种疾病的治疗 ,如病毒性心肌炎、心脑血管梗塞性疾病[1] 等 ;且其含主要成分黄芪皂苷Ⅳ能促进血管内皮细胞合成t PA ,而使PAI I降低 ,具有一定的纤溶作用[2 ] 。故认为黄芪注射液对血栓形成有一定抑制作用 ,但对该方面的研究未见报道 ,本文探讨了黄芪注射液对大鼠静脉血栓形成的影响及其部分机制。1　材料1.1　动物　Wistar大白鼠 ,体重 180～ 2 2 0 g ,♀♂不拘 ;1.2　试剂　黄芪注射液 (正大青春宝药业有限公司 ) ,凝血酶和兔脑粉 (STAGO法国 )1.3　仪器　离心沉淀机 (深圳国华仪器厂 )电热恒温水浴锅(山…     

小分子HIF-1α干扰RNA逆转鼻咽癌细胞耐药的实验

目的探讨小分子HIF-1α干扰RNA对人鼻咽癌耐药细胞株CNE2/DDP耐药性的影响。方法采用药物大剂量冲击和逐渐增加剂量相结合的方法建立人鼻咽癌顺铂耐药细胞株CNE2/DDP,瞬时转染法将HIF-1α小片段RNA导入CNE2/DDP细胞沉默HIF-1α基因,MTS法及流式细胞仪分别检测顺铂对CNE2/DDP细胞增殖、凋亡的影响,Western blot法分析细胞HIF-1α及MDR1表达水平。结果成功建立了人鼻咽癌顺铂耐药细胞株CNE2/DDP,耐药系数达16。当顺铂≥1.0μg/ml时,CNE2组与siHIF-1αsiRNA组细胞抑制率均明显高于CNE2/DDP组与siCtrl-siRNA组(P<0.05);同样,CNE2组与siHIF-1αsiRNA组细胞凋亡率也明显高于CNE2/DDP组与siCtrl-siRNA组(P<0.05);Westernblot显示siHIF-1αsiRNA组HIF-1α及MDR1蛋白的表达低于CNE2/DDP组。结论小分子HIF-1α干扰RNA沉默HIF-1α提高了人鼻咽癌顺铂耐药细胞CNE2/DDP对顺铂的敏感度,逆转了CNE2/DDP对顺铂的耐药性。     

Cetuximab联合电离辐射抑制鼻咽癌细胞EGFR磷酸化

目的 探讨Cetuximab联合电离辐射对鼻咽癌细胞EGFR及其磷酸化形式（p-EGFR）的影响。方法 采用Western Blot法分别检测鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2在不同剂量电离辐射联合不同浓度Cetuximab作用48 h后细胞株EGFR及p-EGFR蛋白的表达。结果 不同浓度的Cetuximab联合不同剂量的电离辐射作用于鼻咽癌细胞株CNE1及CNE2后,EGFR蛋白表达无明显变化;随着Cetuximab浓度的增加,p-EGFR蛋白表达逐步下降;且Cetuximab浓度不变时,辐射剂量的增加,p-EGFR蛋白表达逐渐下降,至Cetuximab浓度为5 μg/mL同时放射剂量为4 Gy时,几乎无p-EGFR蛋白表达。结论 Cetuximab联合电离辐射主要是抑制鼻咽癌细胞株EGFR磷酸化,降低p-EGFR蛋白水平,且呈剂量相关性,而对EGFR蛋白本身表达并无影响。     

药理学实验教学改革思路与实践

为适应培养高素质人才的需求，增强医学生分析问题、解决问题的能力，我们针对药理学实验中存在的问题，对目前药理学实验教学内容做相应调整改革，并在学生中对其合理性进行调研，为其下一步更合理的实施打下基础。