细胞间黏附分子1基因K469E多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病的关联研究

目的研究中国汉族人群中细胞间黏附分子1（intercellular adhesion moleculel，ICAM1）基因K469E多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病（简称冠心病）的关联。方法采用聚合酶链反应．限制性片段长度多态性方法检测了173例冠心病患者和141名对照的ICAM1基因K469E基因型和等位基因的分布。结果基因型频率符合Hardy-Weinberg平衡。冠心病组的KK基因型的频率显著高于对照组（64．2％比48．9％，P〈0．01），同样，冠心病组K等位基因的频率显著高于对照组（79．2％比69．9％，P〈0．01）。经Logistic回归分析排除年龄，性别，和冠心病其它危险因素的影响后，KK纯合子患冠心病的危险性是KE和EE基因型的2．35倍（95％CI：1．03-5．36，P〈0．05）。结论ICAM1基因K469E多态性与中国汉族人冠心病的危险性相关，其中K等位基因可能是冠心病的遗传危险因素。     

缩短人精卵共同孵育时间对体外受精-胚胎移植中胚胎质量与临床结果的影响

在常规进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的过程中，精子和卵子共同孵育的时间平均为16～20h。在此期间，大量已获得受精能力的精子围绕着卵冠丘的复合体、高浓度的精子代谢产物以及因精子穿透卵丘而驱散的颗粒细胞、部分退化和死亡的精子，可能析出一些不利于胚胎发育的物质。已有研究表明，人类精-卵相互作用和受精发生在性交后20     

冻融胚胎复苏状态对移植周期临床结果的影响

目的　观察冻融胚胎复苏状态对移植周期临床结果的影响。　方法　 94对夫妇共进行冻融胚胎移植 (F ET) 99周期。其中自然周期 67个 ,激素替代治疗 3 2周期。冻融 2d或 3d胚胎采用慢速冷冻法和快速解冻法 ,根据卵裂球存活程度分为 3组 :A组为全部移植 1 0 0 %卵裂球存活胚胎 ;B组为全部移植部分卵裂球受损胚胎和C组为混合移植。　结果　 99个周期共融解胚胎 3 3 0个、移植 2 87个 ,融胎存活率 87% ,临床妊娠率 2 3 % ( 2 3 / 99) ,胚胎种植率 1 0 % ( 3 0 / 2 87)。A组临床妊娠率 3 1 % ( 6/ 1 4 )、种植率1 8% ( 1 0 / 3 8) ,B组分别为 6% ( 1 / 1 6)及 2 % ( 1 / 41 ) ,C组分别为 2 3 % ( 1 6/ 69)及 9% ( 1 9/2 0 8) ,A ,B两组比较差异有显著意义 (P <0 .0 5)。进一步分析F ET胚胎中含 4或 8细胞卵裂球完好胚胎数 0 2 ,≥ 3的胚胎种植率 ,分别为 4.5%、1 0 %、1 2 .5%及 43 % ;4组间差别有显著性 (P <0 .0 5)。　结论　移植冻融胚胎卵裂球复苏状态与临床妊娠率密切相关     

体外受精-胚胎移植中移植胚胎透明带厚度变量与治疗结果的相关性研究

目的 :观察移植胚胎透明带厚度变量 ( ZPTV)对体外受精 -胚胎移植 ( IVF-ET)治疗结果的影响。方法 :在 2 3 2对夫妇进行 2 51个 IVF-ET治疗周期 ,电脑记录移植胚胎图象 ,应用胚胎测量软件进行透明带厚度的测量 ,计算 ZPTV。结果 :2 51个周期共移植 747个新鲜胚胎 ,获临床妊娠 1 0 9例 ( 43 % )。妊娠周期与非妊娠周期的平均 ZPTV值分别为 1 8.4± 6.0 ,1 6.0± 5.6,差异显著 ( P<0 .0 0 5)。并根据移植胚胎的平均 ZPTV值>2 0 %胚胎数目 0、1、≥ 2个将治疗周期分为 3组 ,其临床妊娠率分别为 2 7%、51 %、55%( P<0 .0 0 5) ,胚胎种植率分别为 1 3 %、2 5%、3 0 % ( P<0 .0 0 1 ) ,均随移植胚胎数增加而显著升高。年龄 <3 5岁组 ,移植周期的多胎妊娠率随平均 ZPTV值 >2 0 %胚胎移植数 ( 0、1、≥ 2 )的增加而升高 ( 2 9%、3 4%、62 % ) ,差异有显著性 ( P<0 .0 5) ;但年龄≥ 3 5岁组 ( 3 3 %、2 0 %、2 9% ) ,无显著差异 ( P<0 .0 5) ,移植胚胎形态等级和各年龄段妇女中移植胚胎平均ZPTV值均无显著差异 ( P>0 .0 5)。结论 :移植胚胎的平均 ZPTV值与胚胎种植率、临床妊娠率和多胎妊娠率密切相关 ,平均 ZPTV是衡量胚胎质量的又一重要指标。     

冻融人胎儿卵巢组织异种移植后早期血管生成的实验观察

目的 石观察冻融人胎儿卵巢组织异种移植后1个月内移植物形态学改变,动态了解微血管情况. 方法 将难免流产胎儿的卵巢组织经过冻融,异种移植至18只裸鼠肾被膜下,分别于移植后2d、7d和28d回收移植物.将新鲜、冻融以及移植后不同时间的卵巢组织进行光镜、电镜观察,RT-PCR检测血管相关基因的表达. 结果 移植后2d卵巢组织的微血管密度显著上升,部分血管处于扩张状态;移植后7d微血管密度达到相对高峰且扩张的血管腔消失,微小血管恢复正常形态;移植后28d微血管密度出现轻微下降.电镜观察发现,移植卵巢内多数原始卵泡结构完整;移植后2d间质水肿,血管内红细胞淤积;移植后7d及28d的间质水肿逐渐消退,大量微小血管生长.移植卵巢的人血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素2(Ang-2)mKNA表达均呈双向改变,即在移植后2d上升到高值.此后表达下降. 结论 冻融人胎儿卵巢组织移植后的血管重建在移植后1个月内基本完成,移植后l周是采取措施提高冻融人胎儿卵巢移植效果的关键时期.     

单细胞多重巢式PCR在多囊肾病中胚胎植入前诊断的实验研究

目的建立单细胞的多量巢式荧光PCR技术,为开展常染色体显性多囊肾疾病行胚胎植入前遗传学诊断提供据。方法用四重荧光巢式PCR和毛细管电泳对单个淋巴细胞的KG8、SM6、CW4和CW2四个微卫星位点进行多态性分析。结果单个淋巴细胞KG9、SM6、CW4和CW2扩增成功率分别为85．93％（55／64）、89．06％（57／64）、92．18％（59／64）和89．06％（57／64）,KG。、CW。和CW：的等位基因脱扣率分别为25．64％（10／39）、25％（4／16）和7．01％（4／57）,两个位点同时发生的ADO率为2．56％（1／39）。结论该方法为常染色体显性多囊肾疾病行胚胎植入前遗传学诊断提供了依据。     

亚硫酸氢钠测序检测单个人卵子印记基因甲基化状态方法的改进

目的 建立和改进采用亚硫酸氢钠测序检测单个人卵子印记基因甲基化状态的方法.方法 对超促排卵来源的人类单个卵子用低熔点琼脂糖包埋,亚硫酸氢钠处理后行PCR扩增,PCR产物克隆测序确定印记基H19和MEST的CpG位点的甲基化状态.结果 在改进了低熔点琼脂糖包埋和亚硫酸氢钠处理方法后,单个卵子的PCR成功率达到82.46%,体细胞污染率为7.14%.克隆测序结果显示,其序列符合理论序列,序列中未见非CpG的胞嘧啶.结论 单个卵子亚硫酸氢钠测序检测印记基因甲基化状态的方法具有高效、稳定的特点,可以为进一步研究人类辅助生殖技术对基因印记的影响提供基础.     

冻融人胎儿卵巢组织异种移植的实验研究

目的探求冻融人胎儿卵巢组织异种移植后的生长发育能力。方法胎儿卵巢组织分为新鲜胎儿卵巢组织(新鲜组),慢冻-快融胎儿卵巢组织(冻融组),解冻的胎儿卵巢组织异种移植到8只裸鼠肾被膜下(移植组)三组。2个月后开始隔天注射孕马血清促性腺激素(PMSG),持续5个月。注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)36 h后裸鼠处死取得移植物。胎儿卵巢组织石蜡包埋后连续切片,进行组织学评价和增殖细胞核抗原(PCNA)的检测。结果冻融组和新鲜组中绝大多数是原始卵泡。与新鲜组相比,冻融组中正常及总的原始卵泡数虽有下降,异常原始卵泡数虽有升高,但均无显著性差异。移植组的原始卵泡数明显少于新鲜组和冻融组(7.2±1.64,20.4±5.68,17.2±4.27,P<0.05),但可见到数个形态正常的初级卵泡、次级卵泡和窦卵泡。三组的原始卵泡均未见有PCNA阳性表达,PCNA阳性表达见于移植组初级卵泡的颗粒细胞和卵母细胞、次级卵泡和窦卵泡的颗粒细胞。结论冻融人胎儿卵巢组织异种移植后能存活,卵泡能正常发育到窦卵泡。     

冻融和移植过程对人胎儿卵巢组织及超微结构的影响

目的探讨冻融和移植过程对人胎儿卵巢组织超微结构的影响。方法6例23~34w引产的胎儿卵巢慢冻速融,并移植到裸鼠肾被膜下,分别于移植后48 h、7和28 d回收移植物。卵巢组织分为新鲜对照组、冻融组、移植后48 h、7 d及28 d组。电镜和光镜下观察各组形态学改变。结果胎儿卵巢组织冻融前后光镜下的卵泡密度(23.92±3.94)及(22.70±4.18)无显著差异,移植后48 h卵泡密度(16.70±3.98)与移植前比较显著下降(P<0.01)。各组卵泡超微结构整体上保存良好。冷冻对卵巢间质损伤较大且局部差异大,移植后48 h间质细胞稀疏,白细胞浸润;移植后7及28 d,间质内可见较多胶原纤维束,大量微小血管生长。结论人胎儿卵巢组织的冻融损伤主要表现在间质,而移植损伤在移植后48 h内最严重;结合光镜和电镜观察手段能更全面评价冻融过程和移植过程对胎儿卵巢组织的影响。     

二甲双胍对多囊卵巢综合征患者子宫内膜葡萄糖转运蛋白4表达的影响

多囊卵巢综合征（PCOS）是育龄期妇女最常见的内分泌紊乱性疾病，临床以高雄激素血症、持续无排卵和卵巢多囊样改变为特征，可伴有胰岛素抵抗。高胰岛素血症和胰岛素抵抗被认为是导致PCOS患者糖代谢异常和生殖功能障碍的原因之一。许多研究已发现，在PCOS患者中，胰岛素抵抗在脂肪、肌肉、皮肤、肾上腺与卵巢等组织和靶器官中存在。葡萄糖转运蛋白（GLUT）4作为存在胰岛素依赖的组织中的一种最重要的GLUT，逐渐受到研究者们的重视。Mioni等及Mozzanega等首次证实了GLUT4在PCOS患者子宫内膜的表达，提出子宫内膜局部存在胰岛素抵抗现象。本研究前瞻性地观察了胰岛素增敏剂二甲双胍对PCOS患者子宫内膜GLUT4表达情况的影响，旨在探讨PCOS的发病机制，为寻找合理的药物治疗提供理论依据。