HPLC法测定大鼠血浆中木蝴蝶槲皮素成分及药代动力学研究

目的:建立大鼠血浆中木蝴蝶提取物槲皮素含量的分析方法及药代动力学参数。方法:大鼠灌胃给药10 mg/kg后,于不同时间点眼眶取血;采用HPLC法XDB-C18色谱柱,流动相:乙腈-0.1%冰醋酸水溶液进行梯度冼脱,流速:1.00 mL/min,柱温:30℃,检测波长为:278 nm。分析大鼠血浆样品中槲皮素的含量并计算其药动学参数。结果:槲皮素在0.5~22.5μg/mL范围线性关系良好,r=0.9969,提取回收率83.9%~88.5%。日内日间精密度RSD10.0%。10 mg/kg木蝴蝶提取物槲皮素的tmax为(15.60±4.65)min,Cmax为(0.75±0.12)μg/mL,t1/2为(215.5±102.3)min。结论:该法灵敏度高,操作简便、准确,可用于木蝴蝶提取物大鼠灌胃给药后黄酮类成分的测定及药代动力学研究。     

山银花黄酮粗提物抗氧化活性的体外观察

目的提取山银花中黄酮类化合物,并体外观察其抗氧化活性。方法以70%乙醇作为提取溶剂,超声提取山银花中黄酮化合物;用邻苯三酚自氧化法、Fenton反应和DPPH反应测定粗提物对不同自由基的清除能力;用MTT法检测粗提物对H2O2诱导的氧化损伤内皮细胞和心肌细胞的保护作用。结果山银花中黄酮粗提物的提取率为5.65%;粗提取物中含黄酮16.35%。山银花黄酮粗提物质量浓度为250μg/mL时对超氧阴离子自由基(O-2·)、羟自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)的清除率分别为42.40%、64.99%和28.90%。内皮细胞和心肌细胞与浓度1.0 mmol/L的H2O2共同孵育12 h后,其存活率分别下降到49.21%和61.32%,山银花黄酮粗提物预处理30 min,细胞存活率分别提高到60.45%和69.98%。结论山银花中黄酮提取物对O-2·、·OH、DPPH·有较强的清除能力,并具有明显的抗H2O2氧化损伤、恢复细胞活性作用。     

山银花黄酮粗提物抗MCF-7肿瘤细胞作用的研究

目的　体外观察山银花黄酮粗提物对MCF-7 细胞增殖和凋亡的影响，为其黄酮类化合物的进一步开发利用提供理论依据。方法　MTT 法检测山银花粗提物对MCF-7 细胞增殖的抑制作用；Hoechst33342 染色法观察MCF-7 细胞凋亡；流式细胞术检测MCF-7 细胞的凋亡率。结果　高于200 μg/mL的山银花粗提物对MCF-7 细胞增殖有显著抑制作用（P<0.05）。山银花粗提物对细胞形态有明显影响，随浓度的增加，细胞核被染成亮蓝色的细胞比例明显增加。0 μg/mL、100 μg/mL、300 μg/mL、600 μg/mL 的山银花粗提物作用的MCF-7 细胞凋亡率分别为（3.89±0.70）％、（10.40±0.92）％、（22.02±1.22）％、（27.03±0.75）％。结论　山银花黄酮粗提物对MCF-7 肿瘤细胞有明显的抑制增殖与诱导凋亡作用，其效应与浓度呈正相关。