建立固相Capture-ELISA技术诊断糖尿病人HCMV活动性感染

目的建立检测HCMV抗原特异性IgM的抗体捕捉酶联免疫吸附试验（IgM antibody capture enzyme-linked immunosorbent assay,Capture-ELISA）,并分析糖尿病患者HCMV活动性感染状态。方法利用抗人IgM（μ链特异性）抗体包被固相载体,作为＂捕捉抗体＂吸附待检血清中的IgM,经过洗涤除去血清中IgG及其它成分,再加入特异性抗原与＂捕捉＂到的相应IgM抗体结合,然后加入酶标抗体和底物显色进行测定。同时,应用建立的酶联免疫捕获法诊断糖尿病患者HCMV近期感染状态,并与常用的间接酶联免疫吸附试验（In-ELISA）及RT-PCR进行比较。结果 Capture-ELISA的特异性及敏感性均高于间接法,且不受RF因子的影响。结论 Capture-ELISA操作简单、快速,且具有较高的特异性和灵敏度,是检测IgM抗体理想的方法之一。     

肺炎链球菌引起的化脓性脑膜炎并发败血症1例

1 病例报告 患者,男,37岁,以"头疼发热3天,加重伴恶心呕吐2天"为主诉入院.无明显诱因出现发热,查体:T 38.5 ℃,P 108次/min,R 21次/分,BP 130/85 mmHg,神智淡漠,颈项强直,对光反射迟钝,肌力v级,肌张力略增高.     

糖尿病患者活动性人巨细胞病毒感染监测及临床意义

目的 临测糖尿病患者活动性人巨细胞病毒(HCMV)感染,并探讨其临床意义.方法 在HCMV pp65基因内自行设计一对引物,建立RT-PCR检测727例糖尿病患者及230名健康献血者外周血白细胞HCMVpp65 mRNA转录水平,同时应用抗体捕获酶联免疫法检测HCMV pp65-IgM.结果 糖尿病患者HCMV-IgM及mRNA阳性率分别为11.14%和16.64%,与对照组(0.87%、2.17%)相比均差异有统计学意义(P<0.01);比较不同年龄段HCMV感染率,结果发现发病年龄<30岁的患者中HCMV-mRNA阳性率明显高于其他年龄组,从病程来看,病程<1年的糖尿病患者HCMV-mRNA阳性检出率最高.结论 糖尿病患者易发生活动性的HCMV感染,RT-PCR检测HCMV pp65和抗体捕获HCMV pp65特异性IgM可快速有效地确诊HCMV活动性感染的发生.     

酶联免疫法分析糖尿病患者血清人巨细胞病毒抗体水平

目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染与糖尿病的关系.方法 利用酶联免疫法(捕获酶联法和间接酶联法)检测727例糖尿病(85例1型糖尿病,642例2型糖尿病)患者及230例健康体检者(正常对照组)血清HCMV-IgM、IgG、IgA水平,并比较不同性别、年龄、病程的糖尿病患者HCMV-IgM、IgA、IgG的阳性率.结果 1型糖尿病患者HCMV-IgM、IgA及IgG阳性率[分别为10.59%、11.76%、92.94%]及2型糖尿病患者HCMV-IgM、IgA及IgG阳性率[分别为11.21%、11.68%、92.83%]与正常对照组[分别为0.87%、1.30%、77.39%]比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).年龄＜30岁及病程＜1年的糖尿病患者,血清HCMV-IgG阳性率与其他年龄组、病程组的患者比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 HCMV感染在糖尿病进展中起着重要作用,年龄小或病程短的糖尿病患者既往感染者少.     

聚合酶链反应快速诊断细菌性痢疾

聚合酶链反应(ＰＣＲ)检测菌痢病原体具有快速、敏感、特异等优点。但由于运用引物的不同以及ＤＮＡ提取方法的不同,造成扩增结果出现假阳性和假阴性。本文采用志贺氏菌和侵袭性大肠杆菌(ＥＩＥＣ)质粒抗原Ｈ(ＩＰＡＨ)中共同拥有的同源序列设计引物,进行扩增来达到检测志贺氏菌和ＥＩＥＣ的目的。以探讨ＰＣＲ技术在菌痢诊断和防治中的实用性。1　材　　料菌株　志贺氏和沙门氏菌由本院微生物室提供。粪标本　取自本院肠道门诊疑似菌痢的腹泻患者和本院住院菌痢患者。引物为位于志贺氏菌和ＥＩＥＣ所共有的侵袭性相关区域多拷贝ＩＰＡＨ基…     

胃肠道恶性肿瘤C-myc基因荧光PCR方法的研究

目的建立胃肠癌中C-myc基因的荧光定量PCR(FQ-PCR)方法。方法胃肠癌细胞中的C-myc基因与质粒PGEM-T Easy Vector重组,转化大肠杆菌E.coli DH5α,获得克隆的C-myc基因标准模板。用ABI PRISM 7700PCR仪检测FQ-PCR扩增产物制成标准曲线来检测未知标本中C-myc的含量。结果 FQ-PCR扩增产物呈"S"形动力学曲线;ct(循环阈值)与PCR体系中起始模板拷贝数的对数值之间存在严格的线性关系,显示了FQ-PCR定量的准确性。结论 FQ-PCR是一种快速、简便、灵敏、准确的定量C-myc基因的方法。     

应用SYBR GreenⅠ实时荧光聚合酶链反应检测SpA患者人类白细胞抗原-B27

目的评价SYBR GreenⅠ实时荧光聚合酶链反应检测人类白细胞抗原-B27。方法对65例SpA患者和100例健康人群,分别以PCR-SSP和SYBR GreenⅠ荧光PCR检测外周血HLA-B27 DNA进行检测,比较两种检测方法。结果丳CR-SSP检测HLA-B27阳性样本呈现135bp和268两个条带,阴性标本仅有268bp一条条带。SYBR GreenⅠRT-PCR检测结果示,阳性标本的熔解曲线呈现HLA-B27的90.37℃和β-globin的86.71℃两个Tm峰,阴性标本仅有β-globin一个Tm峰;侾CR-SSP和SYBR GreenⅠRT-PCR结果符合率为100%;僑pA患者和健康人的HLA-B27阳性率分别为70.76%和6%。结论 SYBR GreenⅠRT-PCR是一种可靠、快速的检测HLA-B27方法。     

晚期艾滋病男女患者的血浆HIV-1RNA负荷

以往在早期或混合期艾滋病患者中进行的一些横剖面研究表明,即便是控制了CD4~+T细胞水平,女性艾滋病患者的HIV-1RNA负荷低于男性患者;而另一些研究结果则未发现性别差异。作者根据病毒活化输血研究(VATS)的基线资料,评价了494例晚期艾滋病患者(男392例、女102例)的血浆HIV-1 RNA负荷,以确定是否存在性别差异。     

量化考核制度对提高临床输血申请单质量的评析

目的：评析本院实施每月量化考核制度对提高临床输血申请单质量的作用。方法：分别统计实施量化考核前后各6个月内的临床输血申请单,分析比较其中不规范或不合格（统称不规范）的临床输血申请单。结果：实施量化考核前6个月内共有输血申请单1235份,其中不规范申请单482份,占39.0%;实施量化考核制度后6个月内共有输血申请单1564份,其中不规范的有124份,占7.9%。实施量化考核制度后不规范输血申请单比率明显低于实施量化考核制度前,两者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：实施每月量化考核制度对提高临床输血申请单质量作用明显,有利于安全输血,可减少因不合理输血及因输血而产生的各种风险及法律纠纷,此项考核制度值得推广。