阿莫西林与舒巴坦配伍稳定性影响因素分析体会

目的:考察注射用阿莫西林/舒巴坦在3种液体中的稳定性,为临床合理使用药物提供依据。方法:选择4℃、25℃、37℃,在3h内观察配伍液外观、pH值变化,并用RP-HPLC法测定阿莫西林与舒巴坦的含量。结果:稳定性和光照、温度和溶媒有关,在NS中较为稳定。结论:注射用阿莫西林/舒巴坦在葡萄糖注射液(GS)中较为稳定,宜选用GS为溶媒。     

微创经胸非体外循环室间隔缺损的封堵治疗

目的总结微创经胸非体外循环(CPB)下室间隔缺损(VSD)封堵治疗的临床经验。方法 2011年8月至2012年7月,35例VSD患者接受了微创经胸非CPB下VSD封堵治疗,年龄3个月至6岁,体重6.0～31.0kg,VSD直径3～12mm。手术经胸部微创小切口在非CPB下进行,于右心室表面选择适当的穿刺点,在食道超声(TEE)实时引导下,建立输送轨道并完成VSD封堵。术后密切随访1个月至1年。结果 35例中32例封堵成功(91.4%),3例(8.6%)术中改为常规CPB手术。32例患者均无心律失常、残余分流等并发症发生,2例患者发生轻度三尖瓣关闭不全(5.7%)。32例患者均于术后2h内拔除气管插管,3～5d痊愈出院。术后随访无主动脉瓣反流、心律失常、残余分流等并发症发生。结论微创经胸非CPB下VSD封堵治疗是一种安全有效的治疗方法,但远期结果需进一步观察。     

雌二醇对小鼠颈部移植心脏免疫耐受影响的初步研究

目的 探讨雌二醇对小鼠颈部移植心脏免疫耐受的影响.方法 建立小鼠颈部心脏异位移植模型,供、受体均为近交系健康雄性BALB/c和C57BL/6小鼠,分别在受体小鼠心脏移植术后1 d,3 d,7 d腹腔注射不同剂量外源性雌二醇实现干预.实验分为4组:A组:对照组,供、受体均无特殊处理;B组:2 mg/kg;C组:4 mg/...     

H2-B1基因转染小鼠内皮细胞对其免疫原性的影响

目的 转染pEGFP-N1-H2B1质粒载体至小鼠血管内皮细胞(VEC),观察导入H2-B1基因后VEC免疫原性的变化,探讨借鉴母胎免疫耐受模型诱导心脏移植术后免疫耐受的机制.方法 以未处理的VEC为对照,采用流式细胞仪和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别于转染H2-B1基因后24、48、72 h检测质粒转染效率以及H2-B1基因的mRNA相对表达量;将同源小鼠外周血单个核细胞(PBMC)和VEC按100:1和10:1两种不同效靶比混合,观察PBMC对靶细胞杀伤活性的变化.结果 H2-B1基因组H2-B1基因在VEC中的mRNA表达量明显高于对照组(0.5mg/L组,P<0.05;1.0 mg/L组,P<0.01).H2-B1基因转染48 h后,当效靶比为100:1时,与对照组细胞毒性14.29%比较,0.5 mg/L基因组细胞毒性为4.28%,提示转染H2-B1基因组PBMC对VEC的毒性作用明显降低(P<0.05).结论 H2-B1基因可能具有免疫调节功能,可降低VEC的免疫原性,抑制PBMC对VEC的杀伤活性,诱导免疫耐受.     

H2-B1基因转染小鼠内皮细胞对其免疫原性的影响

目的 转染pEGFP-N1-H2B1质粒载体至小鼠血管内皮细胞(VEC),观察导入H2-B1基因后VEC免疫原性的变化,探讨借鉴母胎免疫耐受模型诱导心脏移植术后免疫耐受的机制.方法 以未处理的VEC为对照,采用流式细胞仪和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别于转染H2-B1基因后24、48、72 h检测质粒转染效率以及H2-B1基因的mRNA相对表达量;将同源小鼠外周血单个核细胞(PBMC)和VEC按100:1和10:1两种不同效靶比混合,观察PBMC对靶细胞杀伤活性的变化.结果 H2-B1基因组H2-B1基因在VEC中的mRNA表达量明显高于对照组(0.5mg/L组,P<0.05;1.0 mg/L组,P<0.01).H2-B1基因转染48 h后,当效靶比为100:1时,与对照组细胞毒性14.29%比较,0.5 mg/L基因组细胞毒性为4.28%,提示转染H2-B1基因组PBMC对VEC的毒性作用明显降低(P<0.05).结论 H2-B1基因可能具有免疫调节功能,可降低VEC的免疫原性,抑制PBMC对VEC的杀伤活性,诱导免疫耐受.     

鲍曼不动杆菌基因分型方法的研究进展

目前用于鲍曼不动杆菌基因分型的方法很多，主要包括质粒图谱分析、随机扩增多态DNA（RAPD）、重复序列聚合酶链反应（REP—PCR）、稀有限制区聚合酶链反应（IRS-PCR）和脉冲场凝胶电泳（PFGE）等方法，本文就这5种方法的原理、特点、实验方法和应用实例等方面做一简要综述。     

Blastocyst MHC 基因转染延长小鼠移植心脏存活时间

目的 探讨Blastocyst MHC基因经供心冠状动脉转染对移植心脏存活时间的影响. 方法 分别以近交系健康雄性Balb/c小鼠和C57BL/6小鼠为供、受者,制备小鼠颈部心脏移植模型,对照组供心以0～4℃托马斯Ⅱ溶液灌注;环孢素A(CsA)组供心用前述方法灌注,术后受者腹腔注射CsA 5 mg·g1·d-1;转染组供心以含Blastocyst MHC基因转染质粒的托马斯Ⅱ溶液灌注;联合处理组供心以含Blastocyst MHC基因转染质粒的托马斯Ⅱ溶液灌注,术后腹腔内注射CsA.观察各组移植心脏存活时间和组织学变化,测定移植心脏组织中Blastocyst MHC基因mRNA表达以及外周血CD4+ CD25+调节性T淋巴细胞(Treg细胞)及CD3+ CD8+ T淋巴细胞的变化. 结果 CsA组、转染组和联合处理组移植心脏存活时间较对照组明显延长(P＜0.115),其中以联合处理组最为显著,达(20.50±5.61)d.转染组术后1、3 d的Blastocyst MHC基因mRNA表达水平较对照组明显升高(P＜0.05).术后7 d,联合处理组的排斥反应程度最轻,其冠状动脉内膜增生也最轻.术后7 d,CsA组和联合处理组Treg细胞明显多于对照组(P＜0.05),而CD3+ CD8+ T淋巴细胞明显少于对照组(P＜0.05). 结论 移植前转染Blastocyst MHC基因能够通过上调Treg细胞、抑制CD3+ CD8+ T淋巴细胞而延长小鼠移植心脏存活时间,与CsA联合有协同作用.     

覆膜支架封闭左锁骨下动脉治疗胸主动脉瘤的临床疗效

目的探讨覆膜支架修复术治疗胸主动脉瘤时封闭左锁骨下动脉的临床疗效。方法2011年3月至2012年3月,23例患者行覆膜支架腔内修复术治疗胸主动脉瘤时封闭左锁骨下动脉。StanfordB型主动脉夹层13例,假性动脉瘤7例,主动脉穿透性溃疡3例。所有患者于术前经过螺旋CT血管造影（CTA）检查,显示主动脉夹层或假性动脉瘤破口与左锁骨下动脉的距离均小于1．5cm,并经过血管超声及CTA检查了解颈动脉、椎动脉及大脑Willis动脉环情况。随访6～12个月,分析临床效果。结果23例患者支架全部成功置入。术后左上肢平均动脉压均有不同程度的降低（30-45mmHg）。18例患者左上肢桡动脉搏动减弱或消失,但运动感觉无受限。随访6～12个月,无神经系统症状发生,3例有左上肢轻度缺血和肌肉轻度萎缩。15例患者于出院后6个月接受CTA复查,发现破口完全封闭,假腔内血栓形成,均未发现支架移位和内漏。结论覆膜支架治疗胸主动脉瘤时封闭左锁骨下动脉是可行的,但需要充分的术前准备。远期疗效还有待进一步观察。     

调节性T细胞在免疫耐受方面的研究进展

CD4+CD25+foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+foxp3+regu-latory T cell,以下简称"Treg")为一类具有免疫抑制功能的独立的T细胞群,约占外周CD4+T细胞的5%～10%,是机体维持自身免疫耐受的重要组成部分.自1995年日本学者Sakaguchi等[1]首次报道Treg细胞以来,越来越多的研究证明这群T细胞在免疫病理、移植物耐受、阻止自身免疫反应、肿瘤免疫和维持机体免疫平衡等方面发挥着重要作用.……     

H2-B1基因转染对小鼠内皮细胞凋亡与增殖的影响

目的转染pEGFP-N1-H281质粒载体至小鼠血管内皮细胞（VEC）,观察H2-B1基因对小鼠VEC凋亡与增殖的影响,探讨借鉴母胎免疫耐受模型预防心脏移植术后免疫排斥反应的机制。方法0.5μg/ml空质粒、0．5μg／ml H2-B1质粒、1.0μg/ml H2-B1质粒转染小鼠VEC后,采用实时荧光定量PCR、流式细胞仪、酶标仪检测不同时间质粒的转染效率、H2．B1基因mRNA的相对表达量、转染VEC的凋亡与增殖情况。结果荧光定量PCR结果显示,0．5μg/ml、1．0μg／ml H2-B1质粒组的H2-B1基因mRNA表达量均高于对照组（P〈0．05,P〈0．001）。H2-B1基因促进VEC凋亡,转染48h、72h后1．0斗g／mlH2一B1质粒组与空白对照、0．5μg／ml空质粒比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。H2-B1基因抑制VEC增殖,转染24h、48h、72h后0．5μg／ml H2-B1质粒组、1．0μg／ml H2-B1质粒组分别与空白对照组、0．5μg／ml空质粒组比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论pEGFP—N1-H281质粒载体转染小鼠VEC后,能够有效促进其凋亡,抑制其增殖,减弱小鼠VEC活性,诱导免疫耐受。