黄精配方颗粒质量标准研究

目的 建立以多糖分子量(molecular weight, Mw)及其分布为质量控制指标的黄精和酒黄精配方颗粒质量标准。方法 通过酶解法考察去除辅料的适用性及其最佳反应条件,选取合适的辅料制备黄精和酒黄精配方颗粒,以多糖MW及其分布情况为指标,采用高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)建立配方颗粒特征图谱。结果高温α-淀粉酶或糖化酶单独使用,均不能将可溶性淀粉和糊精酶解完全,而两种酶协同处理的酶解效果更好。高温α-淀粉酶和糖化酶最佳加酶量分别为辅料:酶用量1:1.5和1:2(g/m L)。黄精和酒黄精多糖的差异主要在MW>10 k Da部分,经酶法协同处理后,可溶性淀粉在MW>10 k Da部分的糖链已完全水解。各批次黄精配方颗粒以及酒黄精配方颗粒间特征图谱的相似度均大于0.9;且黄精与酒黄精配方颗粒之间的相似度均小于0.5。结论 该方法稳定、可靠,重复性好,能很好地区分黄精和酒黄精配方颗粒,可用于黄精和酒黄精配方颗粒的质量控制。     

多种统计方法比较黄连姜制工序中影响生物碱含量的因素

目的：测定黄连不同姜制品中6种生物碱的含量,采用多种统计方法对数据进行分析,找出姜制工序中影响姜黄连质量的因素。方法：采用高效液相色谱法测定黄连不同姜制品中药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱的含量。运用主成分分析、聚类分析、LSD（Least-Significant Difference）检验、独立t检验对结果进行分析。结果：黄连经姜炙后,表小檗碱、黄连碱含量略有上升,药根碱、非洲防己碱、巴马汀、小檗碱含量略有下降,传统姜炙品中各成分含量均高于烘制品。聚类分析发现榨汁组和煮汁组可以聚为一类;烘法和炙法具有明显不同的聚类,对黄连姜制品中的6种生物碱之和进行LSD检验,亦表明烘法与炙法具有显著性差异。对榨汁组进行独立t 检验,结果表明姜汁与黄连饮片拌匀或闷润至透心在6种生物碱上无显著性差异,LSD与独立t 检验的结果与聚类分析的结果一致。结论：采用同一批次黄连炮制所得的姜制品中,姜的来源、不同方法制备的姜汁及闷润过程对6种生物碱影响不大,加热方式可能是影响姜黄连质量的因素。考虑到润至透心需加入大量水稀释姜汁,炒干所需工时较长,故辅料姜汁与黄连饮片拌匀吸尽即可。     

黄精炮制前后多糖的相对分子质量分布和免疫活性比较

目的 研究黄精炮制前后多糖相对分子质量及其分布变化,以及其不同多糖级分对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能和炎症反应的影响。方法 采用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定黄精多糖（SC）和酒黄精多糖（JC）相对分子质量及其分布情况,并通过透析法得到不同相对分子质量多糖级分,将上述多糖级分分别作用于正常和经脂多糖（LPS）诱导的小鼠腹腔巨噬细胞,采用细胞增殖与活性检测试剂盒-8（CCK-8）法选取最佳给药浓度,酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定细胞上清液中肿瘤坏死因子（TNF）-α,白细胞介素（IL）-1β的浓度,格里斯（Griess）试剂法检测一氧化氮（NO）的浓度。结果 SC和JC按相对分子质量及其分布范围可分为4个部分,第Ⅰ部分（14 800~2 273 kDa）,第Ⅱ部分（2 148~296 kDa）,第Ⅲ部分（12~1 kDa）,第Ⅳ部分（818~362 Da）。而黄精经酒制后,第Ⅰ部分和第Ⅲ部分的多糖级分发生了改变,因此,选择将SC和JC按重均相对分子质量（M_W）>50 kDa和<50 kDa各分成2个部分。对于正常小鼠腹腔巨噬细胞,JC能显著促进细胞分泌TNF-α（P<0.01）,但SC无明显作用;4个多糖级分SD（M_W>50 kDa的SC级分）,JD（M_W>50 kDa的JC级分）,SX（M_W<50 kDa的SC级分）,JX（M_W<50 kDa的JC级分）均能显著促进细胞分泌TNF-α（P<0.01）,但仅JX能明显促进细胞分泌NO（P<0.05）;另外,JX组促进细胞分泌TNF-α作用显著强于JD组（P<0.01）。对于LPS诱导巨噬细胞模型,JC和SC均能显著抑制细胞分泌TNF-α和IL-1β（P<0.01）,且JC作用更强;不同多糖级分间,JX抑制细胞分泌TNF-α和IL-1β的作用显著强于JD（P<0.01）,SX抑制细胞分泌TNF-α作用显著强于SD（P<0.01）。结论 黄精酒制前后多糖相对分子质量及其分布发生了改变,JC和SC增强免疫调节作用主要是通过抑制炎症反应,M_W<50 kDa级分是其主要有效部位,且黄精在酒制后其多糖成分抑制炎症反应的作用增强。     

基于含水量和单双酯型生物碱含量探究栽培和野生附子去皮的差异

目的:基于含水量和单双酯型生物碱含量,探究栽培附子（江油附子）和野生附子（南阳附子）去皮的差异。方法：测定江油附子和张仲景使用的南阳附子去皮前后含水量,采用药典法测定附子去皮前后单双酯型生物碱的含量。结果：江油附子皮含水量显著高于南阳附子,南阳附子皮占整个附子的重量比例显著高于江油附子,江油附子去皮前含水量显著高于去皮后,南阳附子去皮后含水量显著高于去皮前。南阳附子皮单双酯型生物碱含量均显著高于江油附子。江油和南阳附子去皮前和去皮后单酯型生物碱含量均无显著差异,但江油附子双酯型生物碱含量去皮前显著高于去皮后,南阳附子双酯型生物碱含量去皮前显著低于去皮后。结论：江油附子去皮原因可能与附子皮中含有较高的双酯型生物碱和含水量有关,张仲景使用南阳附子去皮可能与其占比高,含有较高的双酯型生物碱,去皮后能降低毒性且便于生物碱溶出有关。     

基于初级胆汁酸合成探讨乳香醋炙对溃疡性结肠炎的增效机制

目的 从对初级胆汁酸合成的影响,探讨醋炙增强乳香改善溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制.方法 基于2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)法建立UC大鼠模型,采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-TQ-MS)法测定大鼠...     

南阳野生乌头整株植物不同部位的生物碱和多糖含量比较研究

目的：比较野生南阳乌头整株植物不同部位的生物碱和多糖含量差异,探究南阳野生乌头地上部分和须根的药用价值。方法：采用HPLC法检测南阳野生乌头、南阳野生附子、须根、地上部位中3种单酯型生物碱、3种双酯型生物碱含量;采用蒽酮-浓硫酸法分光光度法检测南阳野生乌头、南阳野生附子、须根、地上部位中多糖含量。结果：南阳野生乌头整株植物4个部位中,3种单酯型生物碱含量由高到低依次为：南阳野生乌头＞南阳野生附子＞须根＞地上部分（P < 0.05）,3种双酯型生物碱含量由高到低依次为：南阳野生附子＞须根＞南阳野生乌头＞地上部分（P < 0.05）,总生物碱含量由高到低依次为：南阳野生附子＞须根＞南阳野生乌头＞地上部分（P < 0.05）,多糖含量由高到低依次为：南阳野生附子＞南阳野生乌头＞地上部分＞须根（P < 0.05）。结论：本实验对南阳野生乌头、南阳野生附子、须根、地上部分生物碱和多糖成分进行检测,为须根和地上部分的药用价值提供了科学依据。     

基于militarine含量结合UPLC指纹图谱的不同产地白及饮片质量分析

[目的] 采用超高效液相色谱法（UPLC）测定militarine（1,4-二[4-（葡萄糖氧）苄基]-2-异丁基苹果酸酯）的含量,并建立不同产地白及饮片的UPLC指纹图谱,为白及饮片的质量控制提供参考依据。[方法] 采用ACQUITY UPLC^® BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×150 mm,1.7 μm）,以乙腈-纯水为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL/min,检测波长270 nm,柱温46℃,建立白及饮片的指纹图谱,进行相似度评价,在含量测定和指纹图谱基础上,采用聚类分析和主成分分析对不同产地白及饮片质量进行分析。[结果] 24批次的白及饮片militarine含量在18.98～44.87 mg/g之间,指纹图谱分析共标定12个共有峰,相似度在0.812～0.976之间,其中22批白及饮片的相似度均大于0.9,表明市售白及饮片整体质量基本一致;聚类分析和主成分分析将militarine含量和指纹图谱中4个关键成分的总相对含量均较低的样品聚为一类,聚类结果与相似度高低关系不大。[结论] 测定militarine含量结合UPLC指纹图谱评价白及饮片的质量,具有一定的科学性和可行性。     

炮附片HPLC特征图谱及炮制前后比较研究＊

目的 建立炮附片HPLC特征图谱，分析炮附片炮制前后物质基础差异。方法 AgilentExtend-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)；乙腈（A）-40 mM乙酸铵缓冲液(氨水调PH为10.5)（B），梯度洗脱，检测波长为240 nm，柱温为30℃，进样量为20 μL。结果 建立了炮附片HPLC特征图谱。生附子经炮制成为黑顺片后，11个峰的峰面积显著减小，3种单酯型生物碱含量降低，3种双酯型生物碱基本检测不到。黑顺片经砂炒制成炮附片后，3种单酯型生物碱含量进一步降低，且无新成分峰出现。结论 生附子经炮制成为炮附片后，可使生附子的成分发生量变和质变。炮附片与黑顺片特征图谱基本一致，含量略有差别。     

乳香醋炙前后13种乳香酸成分含量变化及活性比较研究

目的通过对比乳香醋炙前后11-羰基-β-乳香酸(11-keto-boswellic,KBA)、3-乙酰-11-羰基-β-乳香酸(3-acetyl-11-keto-boswellic acid,AKBA)、榄香醇酸、β-榄香酮酸、tsugaric acid A、9,11-去氢-α-乳香酸、9,11-去氢-β-乳香酸、α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰-9,11-去氢-α-乳香酸、3-乙酰-9,11-去氢-β-乳香酸、3-乙酰α-乳香酸(3-acetyl-α-boswellic acid,α-ABA)和3-乙酰β-乳香酸(3-acetyl-β-boswellic acid,β-ABA)13个乳香酸成分含量变化,探究不同炮制条件对含量变化的影响,考察差异乳香酸成分抗炎活性,初步揭示乳香醋炙增效机制。方法制备不同炮制温度和炮制时间醋乳香,基于超高效液相色谱仪串联三重四级杆质谱仪(UPLC-TQ-MS)建立13种乳香酸成分含量测定方法。采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸+5 mmol/L乙酸铵水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液为流动...     

基于张仲景学术思想的炮附子4 种炮制方法的比较研究

目的：采用综合评分法比较基于张仲景炮制思想的4种炮附子饮片质量,为炮附子的现代炮制方法提供依据。方法：利用CM-5分光测色计、TMS-Pro质构仪等客观量化检测仪器,以颜色、质地、3种单酯型生物碱含量、麻舌感结合3种双酯型生物碱含量、7种水溶性生物碱含量以及操作简便性为指标,以药典法炮附片为参照,采用综合评分法从古代干热法、现代烘烤法、清炒法和砂烫法中筛选质量较优的炮附子饮片。结果：各指标综合评分结果为：现代烘烤法≈砂烫法>清炒法>古代干热法>药典法。现代烘烤法和砂烫法所制备的炮附 子均可达到内外皆黄、质地酥脆的传统质量要求。与生附片比较,3种双酯型生物碱含量降低88.9%~90.5%,3种单酯型生物碱含量增加255.2%~385.6%;与药典炮附片比较,3种单酯型生物碱和7种水溶性生物碱含量均显著增加。结论：现代烘烤法和砂烫法炮附子毒性成分含量低,有效成分含量高,且无胆巴液浸泡工序、操作简便易行、生产周期短。做为秉承张仲景学术思想且便于现代操作的炮附子炮制方法,值得挖掘与传承。