CFDA-SE标记虹膜色素上皮细胞的自体移植

目的探讨兔眼自体虹膜色素上皮细胞（irispigment epithelialcells，IPECs）羧基荧光素乙酰乙酸（CFDA-SE）标记后，采用单通道内路移植方法将传代的IPECs移植于视网膜神经上皮层下的可行性。方法取兔眼自体虹膜细胞分离培养并传代，于第3代经CFDA-SE染色后移植到自体视网膜神经上皮层下。术后不同时间应用彩色眼底照相、激光扫描检眼镜、光学相干断层扫描进行活体观察。不同时间点对移植眼进行切片并常规染色及免疫组化，用光学显微镜对移植细胞进行观察和评价。实验数据采用两均数的等效检验，以0．5倍标准差作为等效界值观察移植前后ZO-1和Actin表达情况。结果移植术后观察显示移植区界限清晰；激光扫描检眼镜可观察到移植区内荧光；光学相干断层扫描和HE染色均显示移植区神经上皮层下有色素上皮细胞堆积，并随时间推移堆积逐渐变平。经免疫组化显示移植区ZO-1、Actin呈棕色点，有规律的间断分布在Bruch膜上，IPECs嵌插在原始的RPECs间，且形成完整的单层。结论CFDA-SE是一种快捷、稳定、安全的活体细胞染料，在IPECs移植中可作为理想的标记物应用；我们首次使用的单通道内路移植方法具有手术快捷简单、安全、并发症少等优点。[眼科新进展2007；27（3）：165-169】     

青光眼结膜成纤维细胞增生与TGF-β的表达

目的探讨接受药物治疗的原发性开角型青光眼患者结膜成纤维细胞（human Tenon’s fibroblast，HTF）的增殖能力以及与转化生长因子β（transforming growth factor—β，TGF—β）表达的关系。方法药物治疗的原发性开角型青光眼患者，在抗青光眼手术中取结膜Tenon囊组织并在体外培养到含有不同浓度胎牛血清（FBS）培养基中，检测HTF的增殖情况，用RT-PCR方法检测TGF—β3种异形体的mRNA表达水平，并与对照组进行对照。结果实验组的HTF细胞增生明显高于对照组（P=0．0013）。3种TGF—β异形体在mRNA水平均被HTF表达，且实验组的TGF—β2和TGF-β3在mRNA水平的表达显著高于对照组。结论实验组HTF中增高的TGF—β可能促进细胞增殖，而二者也可能与本研究中至少1a的抗青光眼滴眼液的持续使用有关。且细胞增生与TGF—β表达提高都促进了抗青光眼滤过术后的切口愈合，从而对手术效果起到负面影响。     

高度近视眼视网膜脱离术后复发的原因分析

目的 分析高度近视眼视网膜脱离手术后视网膜再次脱离的原因,以有效地提高手术的成功率.方法 对39例(39眼)高度近视眼视网膜脱离复发患者的临床资料进行分析,经再次手术观察视网膜裂孔的位置、数目及脱离范围,结合前次手术的有关资料,剖析视网膜脱离复发原因.结果 视网膜脱离复发的39眼中,单纯新裂孔形成12眼(30.8%),单纯原裂孔封闭不良12眼(30.8%),单纯增殖性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)进展10眼(25.6%),新裂孔和封闭不良并存3眼(7.7%),PVR进展和新的裂孔并存2眼(5.1%).再次手术行垫压物调整术10眼;巩膜外环扎联合垫压术7眼;玻璃体切割术21眼,其中眼内填充硅油11眼,注入16%C3F8混合气体10眼,随访2～6个月,全部复位.拒绝再次手术1眼.结论 产生新裂孔及PVR进展是视网膜脱离复发的直接原因.裂孔数目及脱离范围也是影响手术成功的重要因素.     

用眼外引流术治疗化脓性角膜溃疡的临床疗效观察(摘要)

角膜病仍是我国目前6大致盲原因之一,而化脓性角膜溃疡又是一个严重的角膜病。本病如得不到及时和恰当的治疗,其后果常常是因角膜白斑、角膜葡萄肿和角膜瘘管而失明。甚至,由于角膜溃疡大面积穿孔或化脓性眼内炎而使眼球丧失。本文报告我     

周边视网膜变性广角多模影像研究进展

周边视网膜变性是眼科临床常见的病变,不同类型的变性影响不同的视网膜层次,可能对视力造成威胁。尽管现代眼底成像技术被应用于研究其病理生理机制,由于其所处的特殊部位,影像学检查困难,因此发病机制仍不清楚。本文总结了有关周边视网膜变性的多种广角成像技术的影像特征,包括超广角眼底成像、广角频域光学相干断层扫描、光学相干断层扫描血管成像、荧光素眼底血管造影等,及其发病机制或病理特点的新观点,为临床诊疗提供新的思路。由于样本量非常少,且缺乏前瞻性、长期的多模态影像的观察研究,因而目前仍无法全面评价不同类型病变的进展性及危险性。期望在更广的范围内应用多模态广角成像技术对此类疾病进行研究,指导临床干预决策。     

Graves病临床治疗及分析

目的 分析Graves病的临床特点和治疗方法。方法 对近5年来哈尔滨医科大学附属第二医院收治的37例Graves病患者进行回顾分析。根据患病严重程度和活动与否选择治疗方法，单纯药物治疗23例，手术联合药物治疗14例。随访1个月～5年(平均1年)。结果 23例单纯用药组患者中明显有效的17例，占73．9％。手术患者中，4例突眼患者进行眶减压手术治疗，3例两壁减压平均减少眼球突出度4．2mm，1例三壁减压术后减少眼球突出度7．5mm。9例眼肌病患者中，6例术后双眼达到正位，复视消失；2例斜视度数明显减小，复视明显减轻；1例过矫，重新调整固定后达到正位。3例眼睑退缩患者矫正良好，凝视症消失，眼部外观改善。结论 严重的活动期患者应用糖皮质激素全身治疗效果较好，静止期患者手术联合药物治疗效果满意。     

偶联穿膜肽携带外源蛋白进入眼球的研究

目的 探讨以多聚精氨酸为载体,是否能够将外源蛋白质穿透细胞膜甚至穿透眼球屏障.方法 本研究以9聚精氨酸(R9)为穿膜肽,构建R9-绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)、GFP两种重组蛋白.体外实验中,将GFP、R9-GFP与人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cell,HLEC)共培养后,经流式细胞仪、激光共聚焦显微镜及MTT法检测二者进入HLEC的能力及对HLEC的影响.体内实验中,将GFP、R9-GFP分别通过滴眼的方式作用于小鼠眼球,7d后裂隙灯下观察后提取眼球总蛋白,ELISA法检测眼球中重组蛋白的含量.结果 MTT结果显示,R9-GFP、GFP都不影响HLEC的增殖活力.流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测结果显示,R9-GFP可以快速有效地进入HLEC内部且效果与给药剂量呈正相关.体内实验中,裂隙灯观察结果示,GFP、R9-GFP作用后小鼠眼球均未发现异常;ELISA检测结果显示,R9-GFP可以进入眼球内部.结论 R9具有携带蛋白质进入细胞膜甚至穿透眼球屏障的能力.本研究为眼部用药及给药模式的进一步改良提供了基础.     

活体染料羧基荧光素乙酰乙酸对兔眼虹膜色素上皮细胞体外染色的研究

目的 探讨活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记兔眼虹膜色素上皮（IPE）细胞的可行性。 方法 使用酶消化加机械分离的方法分离培养兔眼IPE细胞，将传3～4代的IPE细胞用2.5、5、10、20、40 μmol/L浓度的CFSE分别作用1、5、10 min进行染色，通过观察染色后的细胞荧光强度和细胞贴壁率筛选出最理想的标记条件。采用流式细胞术追踪检测标记的IPE细胞的荧光强度变化。用免疫荧光抗体标记法检测此染色剂有无渗漏以及是否对周围细胞着染。 结果 浓度为20 μmol/L的CFSE 37℃下水浴作用1 min为IPE细胞染色、观测、研究的最适条件。流式细胞仪和荧光显微镜观察结果显示，CFSE对IPE细胞染色可持续4周以上，未发生染料渗漏或转染其它细胞，且此浓度的CFSE不影响细胞的性状。 结论 活体染料CFSE是一种染色率高，追踪时间长，应用简便安全可靠的标记兔IPE细胞的新方法。 (中华眼底病杂志, 2006, 22: 261-264)     

双氯酚酸钠眼膏在家兔眼部的相对生物利用度

目的 :测定双氯酚酸钠眼膏在家兔眼部的相对生物利用度 ,评价双氯酚酸钠眼膏在眼部的经 -时过程 ,为临床应用提供参考。方法 :48只家兔随机分为两组 ,其眼部分别应用0 1 %双氯酚酸钠眼膏和滴眼液 ,于不同时间抽取房水、分离虹膜 ,采用高效液相色谱法测定眼组织中的药物浓度。结果 :眼膏组较滴眼液组具有较高的组织药物浓度 ,较长的消除半衰期 ,达峰时间与滴眼液相同 ;眼膏在房水和虹膜的相对生物利用度分别为183 33 %和205 68 %。结论 :双氯酚酸钠眼膏吸收程度较滴眼液高并具有缓释作用 ,临床上可减少用药次数 ,特别适用于手术患者或夜间治疗     

紧密连接在视网膜病理生理中的作用

视网膜是眼球壁的最内层,其结构和功能非常复杂并精细,其病变表现也十分复杂.紧密连接结构及其所形成的屏障功能在视网膜的生理及病理过程中起着重要的调节作用.本文就紧密连接在视网膜病理生理中的作用作一综述.