染铅大鼠胎盘MMP-9、TIMP-1表达与血铅水平的相关性

目的 观察孕期不同阶段铅暴露大鼠胎盘组织中基质金属蛋白酶-9和组织抑制因子-1的表达特征及其与孕末期血铅水平的相关性.方法 108只大鼠随机分为4组,于孕期不同阶段饮服0.025%醋酸铅.对照组孕期全程饮服蒸馏水;实验A组孕早期饮服醋酸铅,孕后期饮服蒸馏水;实验B组孕早期饮服蒸馏水,孕后期饮服醋酸铅;实验C组孕期全程饮服醋酸铅.孕末期腹腔静脉取血,用原子吸收光谱法测定血铅水平,用免疫组化法测定胎盘滋养层细胞中基质金属蛋白酶-9和组织抑制因子-1的表达.结果 ①对照组孕鼠孕末期平均血铅水平为0.04±0.01μmol/L,实验组孕鼠孕末期平均血铅水平均高于0.48μmol/L,以实验C组血铅水平最高;②基质金属蛋白酶-9和组织抑制因子-1在胎盘组织中的表达部位主要位于滋养层细胞胞质;③胎盘滋养层细胞基质金属蛋白酶-9的表达4组间总体比较差异有统计学意义(χ2=28.381,P<0.01),孕末期血铅水平轻度升高时基质金属蛋白酶-9表达阳性率增加,当血铅水平进一步升高后,基质金属蛋白酶-9表达阳性率反而下降,以血铅水平最高的实验C组阳性表达率最低,与对照组比较差异有统计学意义(χ 2=8.402,P<0.05);④胎盘滋养层细胞组织抑制因子-1的表达4组间总体比较差异有统计学意义(χ2=18.177,P<0.05),实验A、C组与对照组比较差异有统计学意义(χ2分别为10.688、8.720,均P<0.05),其表达强度随着孕末期血铅水平的增高而增强,呈剂量-效应关系.结论 孕鼠孕末期血铅水平与胎盘滋养层细胞基质金属蛋白酶-9和组织抑制因子-1的表达强度密切相关,以血铅水平最高的实验C组改变最为明显.血铅水平增高引起的基质金属蛋白酶-9和组织抑制因子-1表达失衡可能是铅致胎盘组织损伤的毒性机制之一.     

不同孕期铅暴露对大鼠妊娠结局及胎盘TIMP-1表达的影响

目的:观察孕期不同时段铅暴露对妊娠结局及胎盘TIMP-1表达的影响,探讨孕早期、孕后期及孕全程铅暴露的毒性特点及毒性机制。方法:采用原子吸收光谱仪测定孕期不同阶段低水平铅暴露后的大鼠孕末期血铅水平。0.025%醋酸铅对实验组孕鼠染毒,根据大鼠孕期3周推算足月剖宫产,观察异常分娩情况,记录胎盘质量、仔鼠数、仔鼠质量。免疫组化法测定胎盘滋养细胞TIMP-1的表达。结果:孕早期染铅对孕末期血铅水平及胎盘质量的影响较大,孕晚期染铅对仔鼠重量的影响较明显,孕全程染铅对孕末期血铅水平、胎盘质量及仔鼠质量均有明显影响。孕全程染铅组其胎盘TIMP-1表达最强。结论:铅具有生殖毒性及胚盘毒性,孕期不同时段铅暴露导致不同的妊娠结局。胎盘TIMP-1表达增强可能是铅致胎盘损伤的病理机制之一。     

不同阶段铅暴露对大鼠妊娠结局及胎盘MMP-9表达的影响

目的通过观察孕期不同时段铅暴露对妊娠结局及胎盘MMP-9的表达影响,评价孕早期、孕后期及孕全程铅暴露的毒性特点及毒性机制。方法采用原子吸收光谱仪测定孕期不同阶段低水平铅暴露后的大鼠孕末期血铅水平。0.025%醋酸铅对实验组孕鼠染毒,根据大鼠孕期3周推算足月剖宫产,观察统计异常分娩情况,记录胎盘质量、仔鼠数、仔鼠质量。免疫组化法测定胎盘滋养细胞MMP-9的表达。结果孕早期染铅对孕末期血铅水平及胎盘质量的影响较大,孕晚期染铅对仔鼠重量的影响较明显,孕全程染铅对孕末期血铅水平、胎盘质量及仔鼠质量均有明显影响,孕全程染铅组其胎盘MMP-9表达下降。结论铅具有生殖毒性及胚盘毒性,孕期不同时段铅暴露导致不同的妊娠结局。胎盘MMP-9表达下降可能是铅致胎盘损伤的病理机制之一。     

Cathepsin-D、MMP-2和MMP-9在乳癌组织中的表达

①目的通过检测人乳癌组织中组织蛋白酶D（Cathepsin-D）、MMP-2和MMP-9三种蛋白酶的表达,探讨其在乳癌演进和异质化过程中的改变及意义。②方法采用免疫组织化学方法,检测58例人乳癌标本、5例正常乳腺标本及5例良性增生乳腺组织标本中三种酶的表达。③结果Cathepsin-D、MMP-2和MMP-9在乳癌的肿瘤细胞和间质细胞中均有表达,在肿瘤细胞中呈异质性过表达,而良性增生乳腺组织呈阴性或弱表达;Cathep—sin-D阳性表达与瘤细胞分化程度（分级）有关（x^2=8．35,P〈0．05）;而MMP-2和MMP-9阳性表达与淋巴结转移有关（x^2=7．66、17．67,P〈0．05）。④结论乳癌Cathepsin-D、MMP-2和MMP-9的表达与正常或良性增生乳腺组织有质的差别,是乳癌不断演进和异质化的形态和功能特征之一,与乳癌癌细胞的侵袭和转移能力密切相关。     

不同孕期铅暴露对大鼠妊娠结局及胎盘MMP-9、TIMP-1表达的影响

[目的]通过观察Wistar大鼠孕期不同时段铅暴露对妊娠结局及胎盘基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）的表达影响,评价孕早期、孕后期及孕全程铅暴露的毒性特点及毒性机制。[方法]108只Wistar大鼠随机分为4组,每组27只（雌雄为21）,用0.025%醋酸铅对各实验组的孕鼠通过自由饮服的方式染：：毒。实验A组：孕早期（1～10d）饮服0.025%醋酸铅,孕后期（11～20d）饮服蒸馏水;实验B组：孕早期（1～10d）饮服蒸馏水,孕后期（11～20d）饮服0.025%醋酸铅;实验C组：孕期全程（1～20d）饮服0.025%醋酸铅。根据大鼠孕期3周推算,足月进行麻醉剖腹取胎,观察胎盘及仔鼠体重、身长、尾长、仔鼠数等;同时采集腹腔静脉血,用原子吸收光谱仪测定各组大鼠孕末期血铅水平。免疫组化法测定胎盘滋养细胞MMP-9、TIMP-1的表达。[结果]实验组孕末期血铅水平与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）。各组胎盘重量及仔鼠体重、身长、尾长差异也有统计学意义（P〈0.01）,其中实验C组最低,分别为（0.31±0.13）g、（2.08±0.88）g、（2.37±0.32）cm、（0.98±0.09）cm。血铅水平与胎盘重量呈负相关（r=-0.652,P〈0.01）。孕全程染铅组胎盘MMP-9表达下降,TIMP-1表达增强。[结论]孕期不同时段铅暴露导致不同的妊娠结局。孕全程染铅的孕末期血铅水平最高,对胎盘及仔鼠影响最大。胎盘MMP-9表达下降、TIMP-1表达增强可能是铅致胎盘损伤的病理机制之一。     

染铅大鼠胎盘一氧化氮、基质金属蛋白酶-9表达与胎盘组织超微结构的相关性

目的观察NO和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在孕期铅暴露大鼠胎盘组织中的变化特征,及其与胎盘组织超微结构的相关性。方法108只大鼠分为4组（A、B、C组和对照组）,对照组孕期饮服蒸馏水,A、B和C组分别于孕期不同阶段饮服0.025%醋酸铅溶液。原子吸收光谱法测定血铅水平。硝酸还原酶法测定胎盘组织NO含量。免疫组化法测定胎盘滋养层细胞MMP-9表达阳性率。电镜观察胎盘组织超微结构。结果①A和B组孕鼠胎盘组织NO含量均高于对照组,差异有显著统计学意义（P＆lt;0.01）;②MMP-9评分4组间总体差异有显著统计学意义（H=39.226,P＆lt;0.01）,以B组的MMP-9阳性表达率最高,C组最低;③各组孕鼠胎盘组织超微结构示：对照组合体滋养层细胞微绒毛致密,胞质内细胞器丰富,内质网致密,有较多的线粒体,细胞间连接和基底膜清晰完整;A组胎盘微血管内皮细胞肿胀,基底膜增厚,微绒毛突起;B组滋养层巨细胞增生,空泡化细胞岛增多;C组滋养层细胞坏死,微绒毛稀疏,线粒体数目减少和粗面内质网池扩张。结论铅暴露孕鼠胎盘组织中NO含量和MMP-9表达阳性率与胎盘组织超微结构的病理改变密切相关。     

孕期不同阶段铅暴露时大鼠胎盘基质金属蛋白酶-9及组织抑制剂-1的表达

目的 观察不同阶段铅暴露对孕鼠胎盘基质金属蛋白酶.9(MMP-9)及其组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响,探讨铅的胎盘毒性机制.方法 108只大鼠随机分为4组,每组27只(雌雄比为2:1)合笼饲养,于孕期不同阶段饮服0.025%醋酸铅.对照组孕期全程(1～20d)饮服蒸馏水;实验A组孕早期(1～10d)饮服醋酸铅,孕后期(11～20d)饮服蒸馏水;实验B组孕早期(1～10d)饮服蒸馏水,孕后期(11～20d)饮服醋酸铅;实验C组孕期全程(1～20d)饮服醋酸铅.孕末期腹腔静脉取血,原子吸收光谱法测定血铅,免疫组化法测定胎盘滋养层细胞MMP-9和TIMP-1的表达.,结果 (1)对照组孕鼠孕末期平均血铅水平为(0.04±0.01)μmol/L,实验组孕鼠孕末期平均血铅水平均高于0.483μmol/L,实验C组血铅水平最高;(2)MMP-9和TIMP-1在胎盘组织中的表达部位主要位于滋养层细胞胞质;(3)胎盘滋养层细胞MMP-9表达4组问总体比较差异有统计学意义(x2=28.381,P＜0.01),血铅水平最高的实验C组阳性表达率最低,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);(4)胎盘滋养层细胞TIMP-1表达4组间总体比较差异有统计学意义(x2=18.177,P＜0.05),表达强度以实验C组最高,实验A组次之,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 孕期MMP-9和TIMP-1的表达部位主要位于胎盘滋养层细胞.铅中毒程度越重,MMP-9和TIMP-1的表达强度改变越明显.MMP-9和TIMP-I的表达失衡可能是铅致胎盘损伤的病理机制之一.     

胃癌DNA倍体分析及其TIMP-2和E-cadherin在胃癌中的表达

目的：研究胃癌中DNA倍体及其TIMP-2和E-cadherin的表达，探索胃癌侵袭转移的分子基础和可能机制。 方法:采用免疫组化技术检测E-cadherin、TIMP-2在99例胃癌，16例癌周正常黏膜，16例胃癌远处转移和25例胃癌转移阳性的淋巴结中表达情况；选取其中47例胃癌，6例癌周正常黏膜及4例胃癌远处转移标本采用流式细胞术检测DNA倍体及S期分数。 结果:TIMP-2表达与Borrmann’s 分型、淋巴结转移和浸润深度有关；E-cadherin表达与肿瘤细胞分化、Lauren’s 分型、Borrmann’s 分型、淋巴结转移和浸润深度有关。DNA异倍体率与分化和淋巴结转移有关，S期分数（SPF）与肿瘤大小、分化及淋巴结转移有关。而且在癌与癌周非癌黏膜之间E-cadherin表达、DNA异倍体率和S期分数的差别具有统计学意义；TIMP-2与 E-cadherin之间无相关性；E-cadherin表达与DNA倍体及S期分数呈正相关。 结论:随着肿瘤的演进和异质化，TIMP-2和E-cadherin 的异常表达及DNA异倍体和高S期分数也相应逐渐增加，提示它们在胃癌演进过程中起着关键作用，可以作为胃癌生物学行为的客观标志物。而且，这几种因素间的相互作用更加速了肿瘤演进过程。     

VEGF在人类低水平铅暴露胎盘的表达及意义

目的:探讨孕期低水平铅暴露时,人胎盘组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义。方法:选择青岛市2005年3月～2006年3月孕期血铅水平在30～60μg/l的孕妇35例,血铅水平在60～100μg/l的孕妇32例,应用免疫组化法检测胎盘组织中VEGF的表达及与孕期血铅含量的关系。结果:VEGF表达于细胞的胞浆,在胎盘组织的蜕膜细胞、细胞滋养细胞及血管内皮细胞呈弥漫性分布或散在分布,两组比较,血铅高水平组胎盘VEGF表达强度显著减低(P<0.05)。结论:VEGF在胎盘中主要由绒毛滋养细胞分泌,孕期铅暴露胎盘VEGF分泌减少,可能是引起胎盘病理改变的原因之一。     

染铅大鼠胎盘一氧化氮、基质金属蛋白酶-9表达与胎盘组织超微结构的相关性

目的观察NO和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在孕期铅暴露大鼠胎盘组织中的变化特征 ,及其与胎盘组织超微结构的相关性。方法108只大鼠分为4组（A、B、C组和对照组）,对照组孕期饮服蒸馏水,A、B和C 组分别于孕期不同阶段饮服0.025%醋酸铅溶液。原子吸收光谱法测定血铅水平。 硝酸还原酶法测定胎盘组织NO含量。免疫组化法测定胎盘滋养层细胞MMP-9表达阳 性率。电镜观察胎盘组织超微结构。结果①A和B组孕鼠胎盘组织NO含量均高于对照组,差异有显著统计学意义 (P< 0.01);②MMP-9评分4组间总体差异有显著统计学意义（H= 39.226,P<0.01）,以 B组的MMP-9阳性表达率最高,C组最低;③各组孕鼠胎盘组织超微结构示：对照组 合体滋养层细胞微绒毛致密, 胞质内细胞器丰富,内质网致密,有较多的线粒体, 细胞间连接和基底膜清晰完整;A组胎盘微血管内皮细胞肿胀,基底膜增厚,微绒 毛突起;B组滋养层巨细胞增生,空泡化细胞岛增多;C组滋养层细胞坏死,微绒 毛稀疏,线粒体数目减少和粗面内质网池扩张。结论铅暴露孕鼠胎盘组织中NO含量和MMP-9表达阳性率与胎盘组织超微结构的病理 改变密切相关。