杜克雷嗜血杆菌血红蛋白受体和其部分蛋白片段的表达纯化及其多克隆抗体建立ELISA检测杜克雷嗜血杆菌的初步研究

目的:制备纯化杜克雷嗜血杆菌血红蛋白受体(HgbA)及其部分蛋白片段(HgbAF),免疫家兔获得rHgbA和rHgbAF特异性多克隆抗体,用于临床软下疳病原学诊断.方法:采用分子生物学技术克隆HgbA和HgbAF基因,诱导表达并纯化rHgbA和rHgbAF;用rHgbA和rHgbAF免疫家兔制备多克隆抗体,采用Western blot和ELISA方法测定抗体免疫活性;建立杜克雷嗜血杆菌HgbA双抗体夹心ELISA检测系统,对其敏感性、特异性进行初步评价.结果:成功克隆了目的基因,经诱导表达获得纯化杜克雷嗜血杆菌rHgbA及其部分重组蛋白片段;免疫家兔获得rHgbA和rHgbAF特异性抗血清,经饱和硫酸氨盐析后,Western blot实验结果显示其能与rHgbA和rHgbAF特异性结合;建立的杜克雷嗜血杆菌HgbA双抗体夹心ELISA,对杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌及其他7种生殖器溃疡相关的细菌进行检测,发现除杜克雷嗜血杆菌呈现强阳性反应外,其余8种菌均为阴性结果,无交叉反应发生;上述ELISA检测纯化rHgbA灵敏度为1.56 ng/ml,杜克雷嗜血杆菌检测灵敏度为2×105 cfu/ml,脓汁模拟样本中杜克雷嗜血杆菌检测的灵敏度为1×106 cfu/ml.结论:成功制备了杜克雷嗜血杆菌血红蛋白受体及其部分蛋白片段,免疫家兔所获得的多克隆抗体能与杜克雷嗜血杆菌特异性结合,而与流感嗜血杆菌及其他7种生殖器溃疡相关的细菌无交叉反应,表明建立的ELISA具有较好的特异性.上述ELISA检测方法的敏感性水平不能满足临床所有标本中杜克雷嗜血杆菌的检测,有待于进一步提高,但该方法的建立具有潜在临床应用价值.     

男性同性恋二期梅毒4例报告

4例均为男性,年龄24～32岁,大学生、公务员各1例,工人2例。未婚2例。发病前均有同性恋史,其中1例同时伴有异性不洁性交史,1人同性恋性侣人数达20余人。4例均在发疹前1个半月左右,龟头有“硬下疳”表现,未经正规治疗。3例全身发疹后在外院分别以“体癣”、“药疹”、“肛周尖锐湿疣”、“银屑病”诊治无好转。4例中二期早发梅毒疹3例,表现为全身皮肤呈对称分布的指甲大到钱币大小不等的暗褐色至铜红色浸润性斑丘疹,无明显鳞屑,自觉症状不明显。3例掌跖部均为相似的铜红色的浸润性斑丘疹,腹股沟淋巴结豆粒至指甲大,活动,无压痛。1例伴有锁骨上…     

美能治疗64例儿童特异性皮炎的临床观察

目的:观察美能(SNMC)在特异性皮炎(AD)治疗中的临床疗效及副作用。方法:将64例AD患儿随机分为治疗组和对照组,治疗组(38例)用美能加外用药;对照组(26例)用赛庚定加外用药。两组均连用4周后停用1周,再连用4周。结果:治疗组治愈率及总有效率分别42%和97%,对照组分别为15.4%和74.6%。经统计学处理,两组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论:美能片治疗儿童AD疗效好,副作用小。     

斯奇康注射液治疗62例急性泛发性扁平疣临床观察

目的:观察卡介菌多糖核酸注射液(斯奇康)治疗急性泛发性扁平疣的疗效。方法:治疗组62例扁平疣患者应用肌内注射斯奇康;对照组34例扁平疣患者应用肌内注射聚肌胞,3个月后评价疗效。结果:治疗组总有效率98.39%,显著优于对照组(P<0.01);观察期间未见明显不良反应。结论:肌内注射斯奇康治疗急性泛发性扁平疣安全,疗效好。     

ELISA检测杜克雷嗜血杆菌方法的实验室评估

软下疳(Chancroid)为一种经典性传播疾病,由杜克雷嗜血杆菌(H. ducreyi,简称杜克雷菌)引起.临床主要表现为生殖器疼痛性溃疡,合并附近淋巴结化脓性病变.     

应用胶体金免疫层析技术快速检测杜克雷嗜血杆菌方法的建立

目的建立快速检测杜克雷嗜血杆菌的胶体金免疫层析试验(GICA)系统。方法采用胶体金颗粒标记抗rHgbA-IgG抗体,制备出免疫胶体金;采用双抗体夹心模式建立适用于杜克雷嗜血杆菌检测的胶体金免疫层析技术;以ELISA试验作为平行对照,对其检测的灵敏度及特异性进行评价。结果以该方法检测杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌以及其他7种生殖器溃疡相关细菌,杜克雷嗜血杆菌显示强阳性,其余8种均为阴性,无交叉反应发生,GICA与ELISA实验结果相符合;GICA和ELISA检测灵敏度分别为:纯化抗原实验GICA为6.25ng/mL,ELISA为1.56ng/mL;细菌学实验GICA为2×106cfu/mL,ELISA为2×105cfu/mL;模拟样本检测实验GICA为1×107cfu/mL,ELISA为1×106cfu/mL。GICA能在15min内完成检测,稳定性良好。结论建立的检测杜克雷嗜血杆菌的GICA系统能够特异、快速检测杜克雷嗜血杆菌。该检测系统的灵敏度还不能满足所有临床标本的需要,有待于进一步研究。     

红外激光低相干反射技术在人发光学参数测量中的应用

目的　探讨光学低相干反射 (OLCR)技术在生物纤维光学性质研究和医学检测中应用的可行性。方法　对取自 6 4名健康人的黑发 2 0份、白发 2 8份、棕发 9份、红发 7份 ,以及取自 2 3例银屑病患者 (患病 2年以上 )和 19例系统红斑狼疮患者 (患病 1年以上 )的黑发 ,应用OLCR技术检测其光学参数 ,并对检测结果进行分析比较。结果　对于健康人 ,黑、白、棕、红不同颜色头发皮质层的光学折射率具有一定的差异 ,但均在 1 6 0± 0 0 1～ 1 5 8± 0 0 1之间 ;银屑病患者黑发皮质层的光学折射率为 1 5 6± 0 0 1,系统性红斑狼疮患者黑发皮质层的光学折射率为 1 5 4± 0 0 1,与健康人比较有明显差异。结论　应用OLCR技术研究生物纤维的结构和测量光学参数 ,并应用于医学诊断是可行的。     

麻疹样发疹患者柯萨奇B型病毒检测

目的：检测长春春季流行性皮肤斑丘疹患者外周血中柯萨奇B型病毒。方法：取56例春季流行性麻疹样发疹患者外周血标本,扩增目的DNA并进行特定限制性内切酶分析。结果：56份标本全部呈柯萨奇B6型病毒阳性。结论：柯萨奇B6型病毒可能是春季流行性麻疹样发疹的病原体。     

VE、VC对大鼠肝、心组织中谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化脂质的影响

本实验研究选用14个月龄Wistar大白鼠,研究了VE、VC单独摄入与二者联合摄入后对谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化脂质(LPO)的影响。结果表明,无论单独饲喂VE、VC或二者联合使用,肝LPO均低于对照组,差异非常显著。大剂量VC降低LPO的作用明显大于VE组。从GSH-Px和SOD的变化来看,VC具有明显提高GSH-Px和SOD活性的作用,与降低LPO的作用一致。