碱性裂解液提取DNA法在环氧化酶亚型基因敲除小鼠基因型鉴定中的应用

目的:应用碱性裂解液法提取的DNA鉴定环氧化酶(COX)亚型基因敲除小鼠,为鉴定纯合子小鼠提供一种方便快捷、低成本、可靠的实验方法。方法:取子代小鼠耳缘组织于EP管中,用碱性裂解液提取基因组DNA,PCR扩增COX-1和COX-2基因片段,通过琼脂糖凝胶电泳对小鼠基因型作出鉴定。结果:碱性裂解液法提取的DNA能应用于子代小鼠的不同基因型的鉴定,即野生型(COX-1+/+;COX-2+/+)、杂合子(COX-1+/-;COX-2+/-)和纯合子(COX-1-/-;COX-2-/-)。结论:建立了碱性裂解液提取DNA法,并将该法成功应用于环氧化酶亚型基因敲除小鼠基因型鉴定中。     

等长收缩法测定小鼠阻力血管舒缩反应*

目的：通过等长收缩法检测小鼠肠系膜动脉的舒缩效应,为研究小鼠阻力血管张力变化及其调控机制提供直观、可靠的实验方法。方法：取C57BL/6成年雄鼠肠系膜动脉制备1.0 mm长血管环,在苯肾上腺素预收缩的基础上,观察乙酰胆碱、花生四烯酸对小鼠肠系膜动脉张力变化的影响。结果：未加入一氧化氮合酶抑制剂,乙酰胆碱能很好地诱导小鼠肠系膜动脉血管环的血管舒张效应,该效应随浓度的增加而增大;而在加入一氧化氮合酶抑制剂的情况下,花生四烯酸亦能很好地诱导小鼠肠系膜动脉血管环浓度依赖性的血管舒张效应。结论：成功建立用等长收缩法测定以肠系膜动脉为代表的小鼠阻力血管舒缩反应的方法。     

脱钙液的组分与处理时间对骨髓活检组织HE和免疫组化染色的影响

目的：探讨不同组分的脱钙液及脱钙时间对骨髓活检组织HE染色和免疫组化染色效果的影响。方法：收集36例骨髓活检穿刺组织，分为10%硝酸甲醛液(A液)、10%盐酸甲醛液(B液)和30%甲酸甲醛液(C液)3组，每组12例，分别观察各组的脱钙时间。另收集5例骨髓活检穿刺组织，将同一例标本分成两份，观察不同组分的脱钙液和脱钙处理时间对HE染色和免疫组化染色效果的影响。结果：A液、B液的脱钙时间比C液短；3种方法的HE染色效果均较好；而C液脱钙2 h的Ki67免疫组化染色效果好，但其他方法的Ki67免疫组化染色效果欠佳。结论：采用30%甲酸甲醛液处理2 h的脱钙法，实验操作简便，HE染色和免疫组化染色效果较为满意。     

浅谈基础医学实验室人性化教学管理

通过人性化管理,加强基础医学实验室教学管理建设,激发基础医学实验室研究生的积极性,充分发挥研究生主观能动性,提高研究生团队意识,从而更好的进行基础医学科学研究,为研究出高质量的研究成果创造出更好的条件。     

等长收缩法测定小鼠阻力血管舒缩反应

目的：通过等长收缩法检测小鼠肠系膜动脉的舒缩效应,为研究小鼠阻力血管张力变化及其调控机制提供直观、可靠的实验方法。方法：取C57BL/6成年雄鼠肠系膜动脉制备1.0mm长血管环,在苯肾上腺素预收缩的基础上,观察乙酰胆碱、花生四烯酸对小鼠肠系膜动脉张力变化的影响。结果：未加入一氧化氮合酶抑制剂,乙酰胆碱能很好地诱导小鼠肠系膜动脉血管环的血管舒张效应,该效应随浓度的增加而增大;而在加入一氧化氮合酶抑制剂的情况下,花生四烯酸亦能很好地诱导小鼠肠系膜动脉血管环浓度依赖性的血管舒张效应。结论：成功建立用等长收缩法测定以肠系膜动脉为代表的小鼠阻力血管舒缩反应的方法。     

高效液相色谱-质谱法检测Wistar大鼠主动脉6-keto-PGF_（1α）的生成

目的：建立大鼠主动脉6-keto-PGF1α的高效液相色谱-质谱（HPLC-MS）检测方法,以反映前列环素（PGI2）的产生水平。方法：建立用HPLC-MS同时检测环氧化酶（COX）代谢通路的5种前列腺素类产物的方法和Wistar大鼠主动脉产生的6-keto-PGF1α水平。结果：HPLC-MS检测法能同时检测COX代谢通路的5种PGI2产物和大鼠主动脉产生的6-keto-PGF1α;加入内皮受体激动剂乙酰胆碱后6-keto-PGF1α的生成明显升高。结论：成功建立用HPLC-MS检测Wistar大鼠主动脉所生成6-keto-PGF1α的方法。     

碱性裂解液提取DNA法在环氧化酶亚型基因敲除小鼠基因型鉴定中的应用

目的：应用碱性裂解液法提取的DNA鉴定环氧化酶（COX）亚型基因敲除小鼠,为鉴定纯合子小鼠提供一种方便快捷、低成本、可靠的实验方法。方法：取子代小鼠耳缘组织于EP管中,用碱性裂解液提取基因组DNA,PCR扩增COX-1和COX-2基因片段,通过琼脂糖凝胶电泳对小鼠基因型作出鉴定。结果：碱性裂解液法提取的DNA能应用于子代小鼠的不同基因型的鉴定,即野生型（COX-1＋/＋;COX-2＋/＋）、杂合子（COX-1＋/-;COX-2＋/-）和纯合子（COX-1-/-;COX-2-/-）。结论：建立了碱性裂解液提取DNA法,并将该法成功应用于环氧化酶亚型基因敲除小鼠基因型鉴定中。