IBA损伤老化鼠脑Meynert核的AD模型动物研究

目的研究定位损伤脑胆碱能系Alzheimer病(AD)模型大鼠学习能力及相关脑神经肽免疫组化改变.方法用兴奋性毒素鹅膏蕈氨酸(IBA)定位损伤大鼠脑右侧Meynert核,观察模型动物学习能力改变(Y型迷宫法),并用分光光度法和免疫组化染色法观察动物脑胆碱酯酶(AchE)活性和皮层及海马β-淀粉样肽前体(β-APP)、生长抑素(SOM)及P物质(SP)的表达情况.结果模型组老化大鼠经损伤后,学习能力及脑AchE活性显著低于对照组(P均＜0.05).β-APP在额叶皮层和海马的表达均升高,而S()M表达则显著减少,用IBA及β-AP25-35同时损伤鼠脑时,可显示脑皮质区SP表达增加(P均＜0. 01).单独用IBA注射无效.结论IBA损伤老化大鼠脑Meynert核建立的动物模型,显示胆碱能系统损伤,学习能力障碍,β-APP过表达而神经肽SOM表达降低,一定条件下SP表达增加,与AD病人某些临床和病理特征基本一致.     

磷酸化蛋白质组学揭示小热休克蛋白27是胶质细胞源性神经营养因子引起神经突触生长的新信号分子

胶质细胞源性神经营养因子(GNDF)是胶质细胞分泌的一种神经营养因子,是胶质细胞对神经元发挥保护作用最主要的途径.GNDF对多巴胺能神经元的保护及促生长作用明显,是神经保护治疗帕金森病(PD)首选神经营养因子.而对GDNF信号转导的机制尚不清楚,因此,我们用蛋白质组学的方法寻找参与GDNF信号转导通路的可能信号分子.     

Alzheimer病模型大鼠脑生长抑素表达与学习能力改变

目的:研究损伤脑胆碱能系ＡＤ模型大鼠学习能力及相关脑组化改变。方法:鹅膏蕈氨酸(ＩＢＡ)定位损伤大鼠脑建立ＡＤ模型,分光光度法、免疫组化法测定其脑胆碱酯酶(ＡＣｈＥ)活性及生长抑素(ＳＯＭ)表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠显示学习能力明显下降(Ｐ＜０．０５),鼠脑ＡＣｈＥ活性显著降低(Ｐ＜０．０１);额叶皮质和海马区ＳＯＭ表达显著减少(Ｐ＜０．０１)。结论:模型鼠学习功能下降可能与中枢胆碱能系毁损导致的ＡＣｈＥ活性下降和ＳＯＭ表达减少有关。     

Meynert核损伤老化大鼠学习能力及脑神经肽改变研究

Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病 (ＡＤ)是一种原发退行性灰质脑病 ,主要症状是学习障碍及近事记忆丧失。ＡＤ患者脑典型病理改变包括老年斑 (ＳＰ) ,主要由 β 淀粉样蛋白 (β ＡＰ)构成。有人认为中枢胆碱能系损伤可能是ＡＤ发病的重要原因。对兴奋性神经毒物直接损伤脑胆碱能神经核的效应和机制尚需深入研究。材料和方法 :取饲养老化至 18个月龄健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,随机分组 ,每组 10只。鹅膏蕈氨酸 (ＩＢＡ)定位损伤组老化大鼠 ,参照鼠脑立体定位图谱坐标 ,将 2 μｌＩＢＡ溶液 (10μｇ/ μｌ)定位注入右脑Ｍｅｙｎｅｒｔ核。ＩＢＡ +β Ａ…     

同位素标签技术在人肾小管上皮细胞蛋白质组学研究中的应用

目的 建立并优化人肾小管上皮细胞蛋白质组学分析所需的相对和绝对定量的同位素标签试剂(iTRAQ)标记技术,为进一步研究奠定基础.方法 将人肾小管上皮细胞株HK-2通过细胞裂解、丙酮沉淀、蛋白变性、还原及酶解,最后进行iTRAQ标记和质谱鉴定,研究iTRAQ在HK-2细胞的标记情况和蛋白质组学.结果 通过质谱检测,检测到带有iTRAQ标记肽段.随机选取20个前体离子,通过3次重复试验,鉴定出iTRAQ标记多肽肽段分别为17、15和18个,标记效率在75.5% ～90.0%,且组间标记效率差异无统计学意义(P>0.05).结论 iTRAQ可以在HK-2细胞中标记效果满意,且重复性较好,为进一步研究肾脏疾病的蛋白质组学奠定了基础.     

tau蛋白与Alzheimer型老年痴呆

Alzheimer型老年痴呆(Alzheimer's disease,AD)是一种常见的老年异质性脑神经退行性疾病,以不可逆进行性记忆和认知功能丧失为主要临床特征,是老年人痴呆的主要原因.AD发病机理极其复杂,属多病因、多阶段的慢性中枢神经疾病,至今AD的发病机制尚未完全阐明.Alzheimer型痴呆的主要神经病理特征包括:神经细胞内的神经元纤维缠结(NFT);神经细胞外的神经变性斑,又称老年斑(SP),其核心主要是β-淀粉样肽Aβ的沉积;还有大量神经细胞的凋亡丧失等.而与NFT发生有密切关系的神经蛋白是tau蛋白(τ蛋白),可以认为异常磷酸化及糖基化修饰tau蛋白的病理性沉积最终导致NFT的形成.     

人肾小管上皮细胞蛋白质组的双向电泳及计算机图像分析

目的 双向电泳(two—dimensional gel electrophoresis，2DGE)技术是蛋白质组研究中最为重要的蛋白质分离方法。建立并优化人肾小管上皮细胞蛋白质组分析所需的固相pH梯度等电聚焦双向电泳及相关技术。方法 由于不同的细胞系特殊性，样品处理亦不同，因此以人肾小管上皮细胞：HK-2为研究对象，对样品液组成、样品处理、上样方式、上样量、IPG胶条和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法等相关技术进行了研究和条件优化后，以固相pH梯度等电聚焦为第一向和SDS均一胶(T=12．5％)的水平电泳为第二向，研究人肾小管上皮细胞蛋白质组。结果成功地得到了人肾小管上皮细胞双向电泳图谱，并通过ImageMaster 2D Elite 3．01软件进行图像分析，输出初步的检测结果。结论 建立蛋白质组研究的技术平台，为从更高的水平来寻找肾脏疾病的功能蛋白和特异性蛋白，阐明肾脏疾病发生发展的网络机制等后续研究工作奠定基础。     

慢性肾脏病5期患者的肠道菌群变化

目的 通过16S rDNA测序技术探究慢性肾脏病5期(CKD5)患者与健康人体内肠道菌群构成的差异。 方法 研究入组健康对照组69例、慢性肾脏病5期非透析(CKD5-NHD)组24例、慢性肾脏病5期透析(CKD5-HD)组29例。通过16s rDNA测序技术研究CDK5组(CKD5-NHD组和CKD5-HD组)与健康对照组肠道菌群构成的差异,以LDA>2.0表示两组间生物群落存在显著差异。基于测序结果,应用宏基因组数据统计分析(STAMP)软件映射到京都基因与基因组百科全书(KEGG)和蛋白质直系同源簇(COG)数据库,研究CKD5患者肠道微生物群可能具有的功能。 结果 健康对照组中,拟杆菌门(Bacteroidetes)、γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)、肠杆菌科(Enterobacteriaceae)等占优势;在CKD-HD组中,肠球菌科(Enterococcaceae)、真细菌属(Eubacterium)、红杆菌科(Rhodobacteraceae)等丰度较高;而在CKD-NHD组中,放线菌门(Actinobacteria)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、红蝽菌目(Coriobacteriales)等为主要优势菌群。通过肠道微生物群功能预测发现,CKD5患者肠道失调的微生物群在脂质代谢、碳水化合物代谢、蛋白质及氨基酸代谢方面有着更活跃的表现。 结论 与健康人相比,CKD5患者肠道菌群发生显著变化。CKD5患者的紊乱肠道菌群能够影响机体物质代谢,并通过影响机体多种代谢及信号传导通路增加罹患并发症风险。     

Alzheimer病遗传学及转基因动物模型研究进展

随着人类预期寿命的延长,许多国家将进入老龄社会,Alzheimer病(AD)等老年疾病对人类健康的危害成为突出的问题.据国外报道,AD是造成痴呆的最常见病因,已成为导致死亡的第4位原因.有报道中国60岁以上老人中AD患病率仅在2%左右,但我国该年龄组人口众多,故AD患者实际数量不容忽视.     

Meynert核损伤老化鼠脑组化改变及神经元凋亡机制研究

目的：用兴奋性神经毒素N－甲基－D－天冬氨酸（NMDA）损伤大鼠脑胆碱能神经元，研究NMDA损伤对认知能力和神经元凋亡的影响及NO在其中的作用。方法：用NMDA定位注射损伤老化大鼠脑右侧Meynert核。测定损伤动物学习能力改变（Y型迷宫法），检测脑胆碱酯酶活性（分光光度法），并用免疫组化染色法观察动物脑皮层及海马一氧化氮合酶（NOS）及凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2表达阳性神经元的变化情况。结果：与对照组比较，经NMDA损伤后老化大鼠显示学习能力及脑胆碱酯酶活性显著降低。（P＜0．01）NOS和Bax在额叶皮层和海马的表达阳性神经元数量均显著升高，而Bcl-2阳性神经元数量则显著减少。（P＜0．01）。结论：兴奋性毒素NMDA定位损伤脑Meynert核后，老化大鼠显示胆碱能系统损伤，学习能力障碍。损伤脑NOS酶表达增加，提示有NO过量生成。Bax过表达而Bcl-2表达降低，显示脑中诱导发生神经元凋亡。这与AD病人某些临床和病理特征基本一致。