microRNA-140真核表达载体的构建及鉴定

目的 构建miR-140真核表达载体并检测其在兔软骨细胞中的表达情况。方法 以人全血标本基因组为模板,PCR扩增出带有酶切位点的miR-140序列,将该序列定向克隆入pBudCE4.1载体中,构建pBudCE4.1-miR-140真核表达载体。将核定位信号肽偶联核激酶底物短肽（nucleus localization signal linked nucleic kinase substrate short peptide,NNS）修饰的壳聚糖（^NNSCS）分别与pBudCE4.1-miR-140重组质粒及pBudCE4.1空质粒形成纳米复合物,分别瞬时转染体外分离培养的正常兔原代关节软骨细胞,实时荧光定量PCR方法检测miR-140的表达情况。结果 构建的pBudCE4.1-miR-140真核表达质粒酶切鉴定和测序结果均正确,表明miR-140成功克隆入pBudCE4.1载体中。实时荧光定量PCR结果表明,与^NNSCS/pBudCE4.1对照组相比,^NNSCS/pBudCE4.1-miR-140转染组软骨细胞中miR-140表达升高约14.5倍（P<0.05）。结论 成功构建了pBudCE4.1-miR-140真核表达载体,瞬时转染后软骨细胞可以有效地高表达miR-140,为将来探究miR-140在软骨损伤修复中的作用机制奠定了基础。     

Wnt-1和β-catenin在宫颈鳞状上皮癌变过程中的表达和意义

目的:探讨Wnt-1和β-catenin在宫颈正常鳞状上皮、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈浸润性鳞状细胞癌(SCC)中的表达及意义,寻找早期诊断SCC的生物学指标.方法:采用免疫组织化学方法(SP法)检测Wnt-1和β-catenin蛋白在20例宫颈正常鳞状上皮、30例CIN Ⅰ、40例CINⅡ/Ⅲ及40例SCC患者中的表达情况.结果:(1)Wnt-1阳性表达率在宫颈正常鳞状上皮、CIN Ⅰ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组织中分别是25.0%、60.0%、82.5%、97.5%,其在4组中的表达差异具有统计学意义(x2=40.04,P<0.05);(2)β-catenin异常表达率在宫颈正常鳞状上皮、CIN Ⅰ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组织中分别是5.0%、26.7%、57.5%、82.5%,差异具有统计学意义(x2=37.25,P<0.05);(3)两者在SCC中表达的相关性:Wnt-1蛋白的阳性表达和β-catenin蛋白的异常表达有相关性(r=0.33,P<0.05).结论:Wnt-1和β-catenin参与了宫颈鳞状上皮的恶性转化过程,在由CIN发展到宫颈癌的过程中起了促进作用,联合检测这两项指标有助于早期诊断SCC.     

缺氧诱导因子-1α、D2-40在乳腺浸润性导管癌中的表达

采用免疫组织化学方法检测75例乳腺癌组织中缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor,HIF-1α)、D2-40的表达情况,旨在探讨肿瘤的转移机制.     

老年人原发十二指肠印戒细胞癌1例

患者，女，72岁，因上腹部饱胀1个月，伴恶心呕吐3d就诊。脑部CT，肝脏、胆囊、胰腺B超均未见异常。上消化道钡餐透视表现为十二指肠溃疡形成。纤维十二指肠镜检示：十二指肠上曲部粘膜充血水肿，并见一直径约3cm的溃疡，溃疡底高低不平，肠腔狭窄。在十二指肠镜直视下溃疡部取活检。病理检查：     

食管癌中癌基因产物c-fos,c-jun的表达及意义

目的探讨癌基因c-fos、c-jun表达产物与食管癌的发生、发展及预后的关系。方法用免疫组化SABC法,以兔抗c-fos、c-jun抗体标记90例食管癌和30例食管上皮不典型增生。观察其分化程度和组织学类型,食管癌的表达及阳性率比较。结果c-fos、c-jun阳性反应见于不典型增生上皮和食管癌组织,不典型增生上皮c-fos、c-jun阳性率分别为70.0%和50.0%,癌组织为58.8%和48.9%;食管癌表达的阳性率与癌组织分化程度和组织学类型有关（P〈0.05）。结论提示c-fos、c-jun过量表达可发生在不典型增生的食管上皮和食管癌组织。     

SATB1与p53,Ki-67在子宫内膜样腺癌中的表达及临床意义

目的 检测核基质结合区结合蛋白质1（SATB1）在子宫内膜样腺癌中的表达情况,探讨其对子宫内膜样腺癌病程演变的作用及临床意义.方法 应用免疫组织化学方法（SP法）检测20例子宫内膜增生症、56例子宫内膜样腺癌组织中SATB1与p53,Ki-67的表达情况,分析其与肿瘤生物学行为的相关性.结果 SATB1在子宫内膜增生症、子宫内膜样腺癌组织中的阳性表达率分别为15％与69.6％,其在两组中的表达差异具有统计学意义（P=0.000）.SATB1的表达与子宫内膜样腺癌的组织学分级、临床分期及淋巴结转移呈正相关（P=0.009,P=0.007,P=0.031）,与是否绝经无关（P=0.494）.SATB1与p53,Ki-67在子宫内膜样腺癌中的表达呈正相关（P =0.016,P=0.005）.结论 SATB1的表达与子宫内膜样腺癌病程演变及p53,Ki-67的表达密切相关,联合检测SATB1与p53,Ki-67对子宫内膜样腺癌早期诊断及靶向治疗有着重要的临床意义.