TGIF拮抗TGF-β诱导胃癌细胞的凋亡

目的探讨TGIF对TGF-β诱导胃癌细胞凋亡的影响。方法将pcDNA3.1-TGIF质粒稳定转染胃癌细胞BGC823细胞,然后以流式细胞术分析BGC823细胞凋亡率的改变,以western blot分析TGIF,caspase8和caspase9蛋白含量变化。结果TGF-β1作用后,BGC823细胞凋亡率明显增加,同时伴有caspase9的激活,但不伴caspase8的激活;与对照组相比,pcDNA3.1-TGIF质粒转染细胞对TGF-β诱导的细胞凋亡敏感性明显降低。结论TGF-β通过caspase9途径诱导BGC823细胞的凋亡;TGIF可抑制TGF-β诱导的细胞凋亡。     

人乳头瘤病毒18型L_1基因果蝇表达系统的构建和鉴定

目的:利用基因重组技术,构建人乳头瘤病毒18型(HPV18)L1基因果蝇表达质粒。方法:以pUC18-HPV18为模板,运用PCR方法扩增不含核定位序列的HPV18L1DNA片段;PCR产物连接至PGEM-TEasy质粒,并测序鉴定;将测序正确的HPV18L1DNA片段亚克隆到果蝇表达载体pMT/BiP/V5-HisA中;利用酶切及PCR方法鉴定重组质粒。结果:经双酶切及PCR鉴定,证实成功构建重组果蝇表达质粒pMT/BiP/V5-HPV18L1。结论:pMT/BiP/V5-HPV18L1重组果蝇表达质粒为下一步转染果蝇S2细胞及制备HPV18VLPs奠定了基础。     

医学基础课的改革应整体进行

近年来分子生物学成就使医学基础学科的传统界限正在消失 ,现代医学整体化趋势日益突出 ,为了适应未来医学发展 ,医学基础课教学改革难以在一门课中进行 ,必须整体进行。我校于 1988年在大专层次开始实施这项改革 ,在基础课深化阶段以临床病案结合病理生理学设置中心问题引导基础课学习 ,以学生自学、讨论的方法进行。在培养学生的自学能力、分析解决问题的能力等方面取得了较好的效果。因为基础课整体进行教改有利于教材内容的合理分配与取舍 ;有利于学生获得整体医学知识。让学生自学、讨论 ,有利于培养学生认真思考的习惯 ,独立临床思维能力及自学能力     

抓住机遇 以评促建开创实验室工作新局面

医学基础课实验教学是医学生前期课程学习的重要环节 ,在培养学生科学态度、思维方法、动手能力及实用技术、理论联系实际、分析问题、解决问题等方面都至关重要。只有重视和加强实验室建设及实验室评估 ,不断增加投入 ,提高仪器设备档次并加强管理 ,开创实验室工作新局面 ,才能为培养实用型医学人才提供可靠保证     

内皮素1串联体的构建及其在COS-7细胞中的表达鉴定

目的:克隆、表达内皮素1(endothlin1,ET1)串联体,提高ET1的免疫原性及其免疫机体后产生抗体的效价.方法:通过pGEX-4T-1载体对ETl的基因进行了串联,并在ETl串联基因下游引入GM-CSF基因,酶切鉴定及序列分析构建重组质粒;再将含有ETI串体与GM-CSF的融合基因连接至真核表达载体pcDNA3.1( )中,同样经过酶切鉴定及序列测定证实;并对构建表达载体转染COS-7细胞,应用间接免疫荧光法及ELISA检测表明目的基因在COS-7细胞中的表达情况.结果:正确构建了ET1重复序列4串体基因与GM-CSF基因重组的克隆载体pGEX-ET1④-GM-CSF以及真核共表达质粒pcDNA3.1-ET1④-GM-CSF;间接免疫荧光法及ELISA检测表明目的基因ETI和GM-CSF在COS-7细胞中都得到了表达.结论:内皮素1串联体的构建及其在COS-7细胞中的成功表达将对ET1的免疫学特性、核酸疫苗的研制以及相关自身疾病免疫治疗的进一步研究奠定基础.