颅眶联合伤大鼠模型建立的实验研究

目的 建立标准化的大鼠颅眶联合伤模型.方法 60只健康SD大鼠随机分为钳夹致伤组、自由落体致伤组、液压冲击致伤组,每组20只,分别建立大鼠颅眶联合伤模型.每只大鼠左眼为模型眼,右眼为正常眼.造模后统计大鼠模型眼Marcusgun瞳孔、眼球突出、眼睑闭合不全、眼底出血、视神经断裂、感染、眼眶骨折、视神经鞘膜出血、脑挫裂伤及死亡的发生情况,以判断是否造模成功.并对比观察大鼠模型眼与正常眼的视网膜结构及视神经节细胞超微结构.结果 钳夹致伤组死亡3只,无一只成功造模;自由落体致伤组死亡9只,成功造模8只;液压冲击致伤组死亡1只,成功造模16只.成功造模大鼠的模型眼视网膜结构紊乱,视神经节细胞计数明显减少.模型眼视神经节细胞的超微结构表现出典型的凋亡特征.结论 液压冲击致伤法可成功建立标准化的颅眶联合伤动物模型,为后续研究奠定基础.     

康复医学知识：脊髓损伤病人的肌肉功能

我院从1998年以来先后对66例不能自行经口进食及昏迷的患采用管饲营养疗法．并进行了临床效果观察。管饲营养不仅能维持病人正常代谢需要．而且对增强抵抗力．降低病死率．配合临床起到了促进康复的作用。     

纳米雄黄的抗小鼠原位乳腺癌作用及其机制

目的：研究纳米雄黄体内体外对小鼠乳腺癌细胞（4T1）的增殖抑制作用及其机制。方法：以萤火虫荧光素酶（Luciferase,Luc）基因标记小鼠4T1乳腺癌（4T1-Luc）细胞,应用噻唑蓝（MTT）比色法和生物发光法（Bioluminescentmethod,BLM）检测细胞增殖活性;细胞形态学及AnnexinV／PI双标记法观察细胞凋亡。4T1-Luc细胞接种雌性BALB／c小鼠乳腺脂肪垫制作原位乳腺癌模型,纳米雄黄（4和8mg·kg-1·d-1）灌胃治疗20d,小动物活体成像系统连续动态观察小鼠乳腺肿瘤生长变化,治疗末期处死动物、剥离肿瘤块称重,并制片HE染色和CD34标记观测肿瘤组织内细胞核分裂像、新生血管形成及坏死改变。结果：MTT法和BLM法检测显示1．56～50gg／mL纳米雄黄体外显著抑制4T1-Luc细胞的增殖（P〈0．05）;形态学观察和AnnexinV／PI染色显示细胞呈现典型的凋亡改变。体内纳米雄黄呈时间和剂量依赖性地抑制小鼠4T1-Luc原位乳腺癌的生长（P〈0．05）;肿瘤组织制片观察,经纳米雄黄治疗后肿瘤组织内细胞核分裂像和微小血管显著减少（P〈0．01）,肿瘤组织内部呈显著的坏死改变。结论：纳米雄黄体外抑制小鼠乳腺癌4TI细胞增殖和诱导细胞凋亡,并主要通过减低原位肿瘤组织内新生血管的形成而导致肿瘤组织坏死而发挥抗乳腺癌作用。     

颅眶联合伤后视网膜神经节细胞活性氧含量与凋亡研究

目的探讨大鼠颅眶联合伤（C01）后视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGC）活性氧含量与凋广的关系。方法88只SD大鼠随机分为损伤组（n=64）和无损伤组（n=24）。损伤组大鼠左眼建立COl模型（模型侧）,右眼作为自体对照（对照侧）．分别在造模后3d、6d、10d、14d取视网膜组织。检测RGC活性氧含量和不同时间点视网膜细胞凋亡率。光镜下观察视网膜微观结构,电镜下观察RGC超微结构。结果造模后模型侧RGC的活性氧含量和视网膜细胞凋亡率逐渐升高,10d达到高峰,与对照侧和无损伤组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。模型侧视网膜结构紊乱,RGC超微结构表现出典型的凋亡特征。结论COI后RGC凋亡失调．活性氧含量增高在其中起到重要作用。     

实验性大鼠颅眶联合伤后依达拉奉对视神经的保护作用

目的：探讨实验性大鼠颅眶联合损伤（cranio-orbital injury,COI）后视神经损伤机制及依达拉奉的保护作用。方法：144只清洁级SD大鼠,雌雄各半,随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组48只。损伤组和治疗组大鼠利用液压冲击颅脑损伤仪建立颅眶联合伤模型,治疗组造模以后腹腔注射依达拉奉30 mg·kg-1,每日2次,共14日。3组分别在造模后3、6、10、14 d取视网膜组织,检测视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）活性氧（reactive oxygen species, ROS）含量及不同时间点RGCs凋亡率,光镜下观察视网膜HE染色微观结构,共聚焦显微镜下观察RGCs的TUNEL荧光标记凋亡情况。结果：造模后损伤组RGCs的ROS含量逐渐升高,第10天达到高峰,RGCs凋亡率变化趋势与此相一致,与对照组及治疗组差异有统计学意义（P＜0.05）,治疗组与对照组相比较无明显差异。光镜下损伤组视网膜结构紊乱,损伤组RGCs的TUNEL荧光标记阳性率明显高于其余两组。结论：COI后RGCs的ROS含量明显升高,导致细胞出现凋亡失调。依达拉奉通过清除ROS逆转这一病理过程,具有明确的视神经保护作用,值得临床推广。     

依达拉奉对大鼠视神经钳夹伤后视网膜细胞的保护作用

目的探讨大鼠视神经钳夹伤致视网膜细胞凋亡过程中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量和依达拉奉对视网膜细胞的保护作用。方法选择健康清洁级SD大鼠192只(384眼),雌雄各半,随机分为正常组、假手术组、对照组、治疗组,每组各48只。对照组、治疗组用视神经钳夹法制作大鼠视神经夹挫伤模型;治疗组造模后腹腔注射依达氉拉奉30mg·kg-1,用生理盐水稀释后每隔12h腹腔注射给药。给药时间为30min,共14d。分别于造模后3d、6d、10d、14d处死大鼠。光镜下观察各组不同时间点视网膜结构,通过激光共聚焦显微镜观察视网膜切片TUNEL荧光标记,2’,7’-二氯双氢荧光素双乙酸酯为标记探针,通过流式细胞术定量检测各组不同时间点视网膜细胞内2’,7’-二氯双氢荧光素的荧光强度。以AnnexinV/PI双染色法通过流式细胞术定量检测各组不同时间点视网膜细胞凋亡率。结果造模后3～14d,正常组及假手术组视网膜细胞偶见TUNEL阳性标记;对照组见大量TUNEL阳性标记细胞,但治疗组明显少于对照组。视网膜细胞中ROS的表达量在造模后3d、6d、10d、14d时正常组分别为32.530±2.203、43.600±3.635、32.800±1.952、45.330±2.902,治疗组分别为84.507±3.754、65.130±5.308、63.400±5.226、66.990±6.320,对照组分别为92.830±2.875、99.900±0.100、99.300±1.212、92.470±2.159,每个时间点治疗组和对照组比较、正常组和对照组比较、正常组和治疗组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05);假手术组与正常组间相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。细胞总凋亡率也明显升高,造模后3d、6d、10d、14d时正常组分别为(9.550±0.325)%、(10.380±0.642)%、(11.540±1.224)%、(10.520±0.839)%,治疗组分别为(22.960±2.574)%、(27.590±1.369)%、(33.950±4.580)%、(25.810±2.170)%,对照组分别为(35.510±3.086)%、(37.550±2.357)%、(40.220±5.011)%、(34.320±3.351)%,每个时间点治疗组和对照组、正常组和对照组、正常组和治疗组之间比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05),假手术组与正常组间相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论依达拉奉通过清除ROS,抑制了视网膜细胞凋亡,具有一定的视网膜细胞保护作用。     

匀浆膳营养治疗的临床观察

我院从１９９８年以来先后对６６例不能自行经口进食及昏迷的患者采用管饲营养疗法，并进行了临床效果观察。管饲营养不仅能维持病人正常代谢需要，而且对增强抵抗力，降低病死率，配合临床起到了促进康复的作用。１资料与方法１．１临床资料６６例患者男３１例，女３５例；年龄最小１６岁，最大８３岁，平均年龄６７岁；脑梗塞假性延髓麻痹２８例，脑梗塞糖尿病９例，脑出血９例，肿瘤术后１０例，自发性食管破裂１例，吻合口瘘１例，脑外伤８例。管饲营最短１周，最长８个月。１．２方法１．２．１治疗原则以求营养平衡，满足病人的机体需…     

三种制作Balb/c小鼠下肢缺血模型方法的比较

目的采用高位结扎并离断一段股动脉、单纯性高位结扎和单纯性低位结扎股动脉三种术式,制作Balb/c小鼠下肢缺血模
型。通过比较3种术式的优缺点,为制作用于再生医学研究的缺血模型提供理论依据。方法选8周龄的雄性Balb/c小鼠30只,
随机分成3组,分别按3种方法制作缺血模型。术后连续观察5 d。第2天行激光多普勒检测。结果激光多普勒显示3种模型
中手术侧的下肢血流阻滞。高位结扎并离断股动脉组中小鼠整个肢体坏疽并脱落;单纯性高位结扎组小鼠中出现小腿及脚爪
坏疽;单纯性低位结扎小鼠脚掌干燥并有脱皮现象,个别脚爪坏死,组织学见大片肌组织坏死及再生俢复反应。结论单纯性低
位结扎股动脉是制作Balb/c小鼠下肢缺血模型比较好的方法。