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2.
为寻求新型表达系统来研制戊型肝炎基因工程疫苗,利用甲醇营养型酵母Pichia pastoris表达系统表达戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2 1.3kb基因。对构建的酵母分泌型表达载体pHIL-S1/HEV和pPIC9/HEV重组体,酶切线性化后转化入GS115酵母菌,经表型鉴定,PCR扩增筛选阳性克隆,对不同表型,不同表达载体的重组株用含甲醇的培养基诱导表达,ELISA及SDS-PAGE筛选表达活性菌株,Western-blot证实表达蛋白与HEVORF2单克隆抗体有特异性反应。得到有效表达HEVORF2蛋白的菌株并初步优化表达条件。 相似文献
3.
目的探讨整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)抑制剂在人近端肾小管上皮细胞转分化中的作用及可能机制。方法对数生长期人近端肾小管上皮细胞(HK-2)随机分为对照组(无糖DMEM/F12培养液)、高糖组(30.0mmol/L葡萄糖DMEM/F12培养液)、抑制剂组(30.0 mmol/L葡萄糖DMEM/F12培养液+30.0μmol/L QLT0267 100μL),培养48h后,倒置相差显微镜下观察细胞形态,Western blot法检测HK-2细胞ILK、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(phosphorylated Akt,P-Akt)相对表达量,反转录PCR法检测ILK mRNA、纤连蛋白(fibronectin,Fn)mRNA表达量。结果对照组HK-2细胞呈椭圆形或圆形,细胞间连接紧密,呈岛屿状生长;高糖组细胞向长梭型转变,细胞间紧密连接消失,呈离散状生长;抑制剂组细胞改变同高糖组,但程度较轻;高糖组、抑制剂组HK-2细胞E-cadherin相对表达量(0.43±0.04、0.80±0.05)均低于对照组(1.04±0.05)(P0.05),且高糖组低于抑制剂组(P0.05);高糖组、抑制剂组P-Akt相对表达量(0.49±0.05、0.31±0.03)均高于对照组(0.21±0.01)(P0.05);且高糖组高于抑制剂组(P0.05),高糖组、抑制剂组HK-2细胞ILK相对表达量(0.52±0.02、0.51±0.02)均高于对照组(0.22±0.01)(P0.05),高糖组与抑制剂组比较差异无统计学意义(P0.05);高糖组、抑制剂组及对照组HK-2细胞Akt相对表达量(0.91±0.03、0.92±0.02、0.94±0.05)比较差异均无统计学意义(P0.05);高糖组、抑制剂组HK-2细胞ILK mRNA(1.83±0.23、1.64±0.07)、Fn mRNA相对表达量(2.06±0.07、1.79±0.06)均高于对照组(0.83±0.04、1.14±0.08)(P0.05),且高糖组Fn mRNA相对表达量高于抑制剂组(P0.05),ILK mRNA相对表达量与抑制剂组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论ILK抑制剂QLT0267可抑制ILK下游效应分子Akt的磷酸化,减少Fn、E-cadherin下调,从而抑制或延缓肾小管上皮细胞转分化进程。 相似文献
4.
目的:探讨磷脂酰肌醇-3(PI3K)/蛋白激酶(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路对大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖的调控作用。方法:体外培养大鼠MC,随机分为正常对照组、表皮生长因子(EGF)(10ng/m L)组、PI3K抑制剂LY294002组(2μg/m L)、EGF联合LY294002组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测4组MC的增殖,流式细胞术检测MC周期,免疫荧光法检测系膜细胞m TOR的表达。结果:与正常对照组相比,EGF组能显著促进大鼠MC增殖,G0/G1期细胞减少,S期及G2/M期细胞增加,且m TOR表达增加;LY294002组大鼠MC增殖受抑制,G0/G1期细胞增加,S期及G2/M期细胞减少,且m TOR表达降低;与EGF组比较,EGF联合LY294002干预组MC增殖受抑制,G0/G1期细胞增多,S期及G2/M期细胞减少,且m TOR表达降低。结论:m TOR信号通路参与了大鼠肾小球MC增殖的调控,抑制该信号通路的活化可显著抑制MC的增殖和MC周期的进程。 相似文献
5.
目的 探讨盐酸埃克替尼靶向治疗期间进行手术干预治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的可行性。方法 回顾性分析经盐酸埃克替尼靶向治疗后在不同时机采取手术干预的6例NSCLC患者的临床资料。结果 6例患者经盐酸埃克替尼靶向治疗后,均施行手术干预治疗,其中行左全肺切除1例,肺叶切除3例,局部切除2例。手术过程顺利,术后给予化疗2例,继续靶向治疗3例,观察1例。结论 盐酸埃克替尼靶向治疗期间给予适当、适时、主动的手术干预是可行的。 相似文献
6.
目的了解肝细胞生长因子(HGF)在慢性肾脏病(CKD)中的变化,探讨HGF在CKD中的作用及临床意义。方法收集CKD患者80例,其中CKDⅠ期16例、CKDⅡ期24例、CKDⅢ期15例、CKDⅣ期13例、CKDⅤ期12例,以及20例健康人群血清,应用ELISA方法检测血清中HGF的含量。结果在健康组、CKDⅠ期~Ⅴ期之间比较,各组之间HGF值有显著性差异(P=0.011),其中CKDⅤ期的HGF值最高,CKDⅠ期~Ⅳ期的HGF值也高于正常,但无显著性差异(P〉0.05);HGF与尿素氮、肌酐、血、尿β2-微球蛋白呈中度正相关(P〈0.01);与肾小球滤过率呈中度负相关(P〈0.01)。结论CKD患者HGF值增高,且与肾脏疾病的严重程度相关。 相似文献
7.
目的探讨眼眶炎性假瘤的CT表现特点。方法收集1993年-2006年经我院病理及临床证实的资料完整的17例眼眶炎性假瘤病例进行回顾性分析。结果眼球突出伴眶内软组织肿块占77.8%,眼外肌增粗占83.3%,眼球壁增厚占55.6%,眶内脂肪密度增高占88.9%,造影增强可强化,CT值平均增加38Hu。结论眼球突出、眶内软组织肿块、眼外肌增粗、眼球壁增厚、眶内脂肪密度增高是眼眶炎性假瘤较具特征性的CT表现,多可作出诊断,但对病变充满眼眶和泪腺型炎性假瘤CT表现不具特征性,需活检方可明确诊断。 相似文献
8.
儿童期牙源性囊肿12例临床观察叶青赵秋明(吉林市中心医院132011)张春江(吉林市儿童医院132011)口腔颌骨面部囊肿较多见,在口腔颌面部肿瘤、囊肿及瘤样病变中囊肿约占17%。颌骨牙源性囊肿见于青壮年,然而它的早期常常在儿童时期遇到。现将笔者收治... 相似文献
9.
10.
目的 测定8种清热解毒类藏药异叶青兰、甘青乌头、獐芽菜、乌奴龙胆、五脉绿绒蒿、铁棒锤、蒺藜、兔耳草体外抑菌活性。方法 用琼脂扩散法和微量稀释法研究8种清热解毒类藏药体外抑菌活性,以抑菌圈和最小抑菌浓度(MIC)为评价指标。结果 藏药水提取物和醇提取物对所选菌种都具有一定的抑制作用,形成抑菌圈直径范围为8~22 cm,MIC范围为1.56~50.00 mg·mL-1。其中异叶青兰和甘青乌头抑菌活性最强,五脉绿绒蒿基本没有抑菌作用。结论 8种藏药水提取物,抑菌活性异叶青兰>甘青乌头>獐芽菜>兔耳草>铁棒锤>蒺藜>乌奴龙胆>五脉绿绒蒿;而对于醇提取物,异叶青兰>甘青乌头>铁棒锤>兔耳草>蒺藜>獐芽菜>乌奴龙胆>五脉绿绒蒿。 相似文献