基于网络药理学和分子对接研究钩藤治疗动脉粥样硬化的有效成分和作用机制

[目的]基于网络药理学和分子对接研究钩藤治疗动脉粥样硬化的有效成分、靶点及通路。[方法]利用TCMSP数据库并结合筛选条件,确定钩藤的主要有效成分和有效成分相应的靶点,构建有效成分-靶点网络;利用GeneCards、DisGeNET、OMIM及TTD数据库确定动脉粥样硬化的疾病靶点,获取药物靶点与疾病靶点的交集,并对交集靶点进行PPI网络分析、GO生物功能富集分析和KEGG通路富集分析,应用Cytoscape 3.9.0软件中的“Analyze Network”工具,构建有效成分-靶点-通路网络,筛选出核心成分、核心靶点、核心通路,并对核心成分与核心靶点之间的亲和力进行分子对接验证。[结果]筛选出33种有效成分,其中一种有效成分没有相应的靶点,筛选出1 608个疾病靶点和115个药物与疾病的交集靶点。PPI分析得到的主要靶点为AKT1、TNF、IL-6、IL-1β、TP53、JUN、CASP3、MMP9、PTGS2等。GO生物功能富集分析获得生物过程条目22个、细胞成分条目57个、分子功能条目100个。KEGG通路富集分析筛选出20条信号通路,主要为脂质和动脉粥样硬化、MAPK、癌症信...     

在Transwell小室中分离培养人脐静脉内皮细胞的研究

目的建立一种在特殊材料Transwell培养小室中分离培养原代人脐静脉内皮细胞的技术。方法采用酶消化法分离得到人脐静脉内皮细胞(HUVEC),免疫荧光法检测内皮因子Ⅷ予以鉴定,待长满后用不含EDTA的0.25%胰酶传代到Transwell小室中,观察小室中HUVEC的生长情况。结果在脐带长度一定的情况下,HUVEC分离所得到细胞的多少以及细胞的状态与胰酶的用量、时间、温度及是否含EDTA关系密切。本研究胰酶消化时间在室温(25℃左右)情况下要消化30min,用的胰酶是含EDTA和不含EDTA的胰酶1∶1混合;长满之后传代消化的胰酶只能用不含EDTA的胰酶消化,时间以在镜下的细胞状态为准。结论在特殊材料Transwell小室中成功分离培养HUVEC,一定要在比较温和的条件下消化HUVEC,这样才可能得到活力比较好、数量比较多的细胞。     

HPLC-MS/MS法检测小鼠体内京尼平苷血药浓度的价值分析

目的:评价用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测小鼠体内京尼平苷血药浓度的价值,以建立一种高效、快速测定小鼠体内京尼平苷血药浓度的方法.方法:以芍药苷为内标,用乙腈沉淀血浆蛋白.采用液相质谱-电喷雾离子源(ESI)正离子多反应离子(MRM)法检测小鼠体内京尼平苷的血药浓度,估算其主要药代动力学参数.色谱条件是:...     

前动力蛋白2在心血管病变中的研究进展北大核心CSCD

心血管疾病是以心脏和血管发生病理性改变的一类疾病。前动力蛋白2(prokineticin 2,PK2)是新近发现的一种分泌型蛋白,通过与受体(prokineticin receptor,PKR)1和2结合,参与机体多种生理功能。研究显示,PK2/PKR1信号通路在心血管疾病方面具有重要作用。该文就PK2/PKR1信号通路在心肌梗死、心衰和血管内皮功能紊乱等方面的研究进展进行综述。     

高效液相色谱法测定喜炎平注射液中穿心莲内酯的含量

目的建立高效液相色谱法测定喜炎平注射液中穿心莲内酯的含量。方法采用Eurospher 100～5 C18色谱柱,以甲醇-水(90∶10)为流动相,在225nm下以1.0mL/min的流速进行测量。结果在24.84～248.4μg/mL范围内,穿心莲内酯具有良好的性关系(r2=0.9996),平均回收率为100.7%,RSD为1.7%。结论高效液相色谱法测定喜炎平注射液中穿心莲内酯的含量,简便、快速。     

当归A_3活性部位对小鼠巨噬细胞环氧化酶-2活性及基因表达的影响

目的研究当归A3活性部位对小鼠巨噬细胞RAW264.7环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)活性及基因表达的影响。方法采用酶联免疫法(enzyme-line immu-nosorbnent assay,ELISA)检测前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)产量及COX-2活性,采用RT-PCR和Western blot法检测COX-2 mRNA及蛋白表达水平。结果 A3(20、40、80mg.L-1)剂量依赖性地抑制LPS诱导的RAW264.7细胞PGE2产量、COX-2活性、COX-2 mRNA及蛋白表达水平增高。结论 A3能够直接抑制PGE2产量,此作用可能与抑制COX-2基因表达有关。     

槲皮素及其衍生物对心肌缺血再灌注损伤的作用机制研究进展

心肌缺血再灌注损伤(MIRI)通常发生于心肌细胞在缺血后血运重建的条件下,可引起无复流现象、再灌注性心律失常等,甚至出现心肌不可逆性损伤。槲皮素及其衍生物作为众多中药的共有成分,在抗氧化应激、抗炎、抗细胞凋亡,调节细胞自噬等方面具有显著疗效,我们就近几年关于槲皮素及其衍生物对MIRI的作用机制进行综述与展望,以期为槲皮素及其衍生物在临床治疗MIRI的初步应用提供理论基础。     

CDKAL1基因rs7756992位点A>G多态性与2型糖尿病易感性的meta分析

目的 系统评价CDKAL1基因rs7756992位点A＞G多态性与2型糖尿病(T2DM)易感性的关系.方法 制定原始文献的纳入、排除标准及检索策略,通过检索学术期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库及EMBASE、PubMed、ScienceDirect等数据库,收集有关CDKAL1基因rs7756992位点A＞G多态性与T2DM易感性的病例对照研究,以病例组与对照组CDKAL1基因rs7756992位点各种基因模型的比值比(OR)及其95％置信区间(CI)为效应指标进行meta分析,并根据研究人群种族不同进行亚组分析.结果 本研究共纳入15篇文献,T2DM组和对照组病例数分别为24 315例和35 132例.Meta分析显示,CDKAL1基因rs7756992位点A＞G多态性与T2DM易感性有关联[等位基因模式(G vs A):OR=1.171,95％CI 1.122～1.223,P＜0.001;共显性模式(GG vs AA):OR=1.380,95％CI1.258～1.515,P＜0.001;共显性模式(AG vs AA):OR=1.131,95％CI 1.089～1.176,P＜0.001;显性模式(AG+GGvs AA):OR=1.168,95％CI 1.101～1.240,P＜0.001;隐性模式(CG vs AA+AG):OR=1.343,95％CI 1.282～1.405,P＜0.001].亚组分析显示,亚洲人群和白种人群中携带CDKAL1基因rs7756992位点G等位基因的人群发生T2DM的风险增加(P＜0.05);而非洲人群中携带CDKAL1基因rs7756992位点G等位基因与A等位基因的人群发生T2DM风险的差异无统计学意义.结论 在亚洲人群及白种人群中CDKAL1基因rs7756992位点A＞G等位基因的突变可能是T2DM发病的危险因素之一.     

二苯乙烯苷对血小板聚集和细胞质游离钙离子浓度的影响

［摘要］目的观察二苯乙烯苷对兔血小板内游离钙离子浓度（［Ca2+］i）的影响,探讨其抗血小板聚集的作用机制。方法采用比浊法测定兔血小板聚集功能;双波长荧光探针Fura 2测定血小板细胞质内［Ca2+］i。结果1～10 μmol•L 1二苯乙烯苷体外给药对二磷酸腺苷（ADP）和凝血酶引起的血小板聚集有浓度依赖性抑制作用。有无细胞外钙时, 1～10 μmol•L 1二苯乙烯苷对静息态血小板的［Ca2+］i均无明显影响,但对激活态血小板［Ca2+］i的升高有明显抑制作用,呈剂量依赖性。结论二苯乙烯苷抑制血小板聚集的作用机制可能与其抑制血小板细胞质 ［Ca2+］i的升高有关。     

一种颈总动脉部分结扎-内膜新生模型的制备

目的 探讨一种左颈总动脉部分结扎后诱导血管重构（内膜新生）的方法。方法 8周龄雄性C57BL/6 J小鼠40只,随机分为6组：正常组（WT）、假手术组（sham）、术后4周、8周、10周和12周组。手术结扎左颈总动脉（LCA）远心端4个分支中的颈内、颈外和枕动脉,保留甲状腺上动脉,造成左颈总动脉血管内膜新生和血管重构。术后观察小鼠体重和饲料的消耗情况;HE染色观察血管形态学变化;天狼猩红染色观察血管胶原纤维聚集情况。结果 除正常组小鼠外,其他组小鼠术后1～2 d体重和饮食量均降低,第3天开始上升,假手术组小鼠第2天开始上升;HE染色表明,假手术组和正常组小鼠LCA均未形成新生内膜,部分结扎手术后4、 8、10和12周组小鼠LCA均出现内膜和中膜层的增厚、管腔狭窄等。右侧未结扎的颈总动脉无内膜增厚,但出现了管腔增大;天狼猩红染色显示,内膜和中膜增生部分有胶原积聚。结论 左颈总动脉部分结扎可以建立小鼠动脉内皮损伤模型并伴有明显的内膜新生。