高氧环境对肺动脉平滑肌细胞表型的影响

目的探讨不同氧(O2)浓度环境对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)表型的影响及肺动脉高压的形成机制。方法采用酶解法分离培养大鼠原代PASMC, 经鉴定后将稳定传代的PASMC分别置于正常O2含量(C组)及55%O2(H55组)、75%O2(H75组)、95%O2(H95组)的密闭容器培养6 h。分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌22α蛋白(SM22α)、骨桥蛋白(OPN)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的mRNA和蛋白表达。结果 H55组的α-SMA、SM22α、OPN、MMP-2的mRNA和蛋白相对表达量与C组差异均无统计学意义(P均>0.05);与C组和H55组比较, H75组和H95组α-SMA、SM22α的mRNA和蛋白相对表达量均更低, OPN、MMP-2的mRNA和蛋白相对表达量均更高(P均<0.05);与H75组相比, H95组MMP-2的mRNA相对表达量更高(P<0.05)。结论 O2浓度75%以上环境可通过诱导PASMC表型转化, 使PASMC获得较强分泌能力, 形成肺动脉高压病理基础,...     

榆叶合叶子黄酮类成分的微乳薄层色谱鉴别

目的建立榆叶合叶子黄酮类成分的微乳薄层色谱鉴别方法。方法以十二烷基硫酸钠(SDS)-正丁醇-正庚烷-水组成的微乳体系为展开剂,对榆叶合叶子的全草和花的提取物进行薄层层析,考察微乳薄层中的微乳液类型、酸度等因素对黄酮类物质分离效果的影响。结果含水量75%(O/W)的微乳液-甲酸(9∶1)为适宜展开剂,与传统有机溶剂展开剂相比,分离得到的斑点数目更多,更加清晰,分离度更好。结论黄酮类成分的微乳薄层鉴别方法简便易行,重复性好,可作为榆叶合叶子药材的薄层鉴别方法。     

TLC-生物自显影法筛选榆叶合叶子的抗氧化活性

目的：建立榆叶合叶子中黄酮类成分的TLC鉴别方法和运用TLC-生物自显影鉴别方法,初步筛选榆叶合叶子中的抗氧化活性成分.方法：以绣线菊苷、金丝桃苷、芦丁、槲皮素为对照品,采用三种薄层展开系统,选出最佳薄层展开系统;喷以0.1%的DPPH无水乙醇溶液显色,筛选抗氧化活性.结果：榆叶合叶子黄酮类物质的TLC鉴别的最佳展开系统为乙酸乙酯-甲酸-水（8：1：1）;TLC-生物自显影抗氧化活性筛选中,黄酮类成分的薄层板呈紫色背景黄色斑点.结论：榆叶合叶子药材中黄酮类成分的TLC鉴别方法可行,重复性好,可作为榆叶合叶子药材的薄层鉴别方法;榆叶合叶子药材中的黄酮类成分具有抗氧化活性.     

不同时间高氧对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞能量代谢的影响

目的 探讨不同时间高浓度氧对肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体能量代谢的影响。方法 将大鼠RLE-6TN细胞分为对照组(21%O₂常规培养4 h)、高氧1、2、3、4 h组(95%O₂分别培养1、2、3、4 h)。采用荧光素酶化学发光法检测各组细胞的三磷酸腺苷(ATP)含量，采用微量法检测线粒体呼吸链复合体V活性，荧光探针JC-1检测细胞线粒体膜电位，实时荧光定量PCR法检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的核心亚基NADH脱氢酶亚基1(ND1)、细胞色素b(Cytb)、细胞色素C氧化酶亚基I(COXI)、ATP酶6(ATPase6)mRNA的表达水平。结果 与对照组比较，高氧1、2、3、4 h组细胞线粒体呼吸链复合体核心亚基ND1(q=24.800,P<0.001;q=13.650,P<0.001;q=9.869,P<0.001;q=20.700,P<0.001)、COXI(q=16.750,P<0.001;q=10.120,P<0.001;q=8.476,P<0.001;q=14.060,P<0.001...