NRG1在肝细胞肝癌中杂合性丢失和蛋白表达的研究

目的：分析在肝细胞性肝癌中NRG1基因的两个多态性位点D8S278和D8S499杂合性丢失（loss ofheterozygosity,LOH）情况及其与NRG1蛋白表达水平之间的关系,探讨NRG1在肝细胞肝癌发生发展中的作用。方法：酚氯仿抽提经石蜡包埋的肝癌和癌旁正常组织DNA,进行PCR扩增,扩增出来的产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳并分析两位点杂合性丢失情况;用免疫组织化学方法检测肝癌组织和癌旁正常组织中NRG1的表达情况。结果：D8S278和D8S499的LOH率分别为32.43%（24/74）、37.86%（26/69）,总频率为48.65%（36/74）;NRG1在肝癌组织中的阳性表达率为67.57%（50/74）,显著低于在正常组织中的表达水平（97.30%,72/74）（P〈0.05）,这种降低与NRG1基因多态性位点的LOH有关;NRG1表达下调与肿瘤大小、Edmondson分级相关,而与年龄、性别、HBsAg、AFP、肝硬化和肝内外转移无明显相关。结论：NRG1基因可能是肝细胞肝癌的一个候选抑癌基因,在肝癌发生发展中起一定的作用;可为临床诊断、治疗及预后评估提供理论依据。     

肝细胞癌染色体4q和8p杂合性丢失的研究

目的：检测肝细胞性肝癌患者的4q和8p两个区域上相关的9个微卫星位点的杂合性丢失频率,探讨杂合性丢失与临床病理学特征的关系。方法：选取45例信息性肝癌标本,提取组织DNA,并检测浓度,然后进行PCR扩增,最后将产物通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离并观察目的条带有无密度减少或丢失。结果：45例信息性肝癌病例的9个微卫星位点总染合性缺失率为66.7%。其中D8S552的LOH率最高为41.9%,通过χ2检验或Fisher确切概率法进行统计学分析（P〈0.05）,得到该位点在性别（P=0.023）,血清AFP（P=0.004）,有无肝内转移（P=0.023）中均有统计学差异。D4S415为22.5%,D4S3331为22.3%,D8S1810为18.8%,D4S2954为15.4%,D4S3030为15.4%;D8S1725为12.5%,D8S1827为9.8%,D8S1754为6.3%。结论：染色体4q和8p上D4S415、D4S3331、D8S552位点杂合性丢失是肝细胞性肝癌发生发展的重要事件,提示其临近部位可能存在潜在的抑癌基因;为其他肝癌相关抑癌基因的研究提供理论基础。     

长链非编码RNA-C00473在子宫内膜癌中的表达及其通过miR-15b/cyclin D1对Ishikawa细胞增殖的影响

目的 观察长链非编码RNA（lncRNA）C00473在子宫内膜癌组织中的表达,及其通过调控微小RNA-15b（miR-15b）对子宫内膜癌细胞（Ishikawa）增殖能力的影响。方法 qRT-PCR检测20例子宫内膜癌组织（研究组）与20例正常子宫内膜组织（正常组）中lncRNA C00473的表达情况。在Ishikawa细胞中转染过表达质粒（pcDNA3.1-C00473）、siRNA C00473以及空质粒（pcDNA3.1）,分别为过表达组、抑制组及对照组（NC组）。CCK8 法检测各组Ishikawa细胞增殖情况。qRT-PCR、western blot检测各组中lncRNA-C00473、miR-15b及其靶基因细胞周期蛋白 D1（cyclin D1）的表达情况。结果 与正常组相比,研究组lncRNA-C00473的表达增高（P＜0.05）。qRT-PCR显示Ishikawa细胞中lncRNA C00473过表达与抑制效果显著（P＜0.05）;与NC组相比,过表达组细胞增殖能力升高,抑制组细胞增殖力降低,差异有统计学意义（均P＜0.05）;过表达组miR-15b水平低于抑制组,cyclin D1在mRNA和蛋白水平均高于抑制组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 lncRNA-C00473与子宫内膜癌相关,其可能通过miR-15b/cyclin D1途径影响子宫内膜癌细胞增殖能力。     

子宫内膜癌细胞外泌体长链非编码RNA-C00473对人脐静脉内皮细胞VEGF和VEGFR-2表达的影响

目的 分析子宫内膜癌患者血清外泌体(exosome,Exo)中长链非编码RNA(lncRNA)C00473表达情况,及子宫内膜癌细胞(Ishikawa)外泌体对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cell,HUVECs)中血管内皮生长因子(vascular end...     

WIF-1启动子甲基化与肿瘤

WIF-1（Wnt Inhibitory Factor-1）是Wnt信号通路的一种拮抗物,能在胞外与Wnt蛋白结合而抑制Wnt信号转导。近年来的研究表明,多种肿瘤中均存在WIF-1基因启动子的异常甲基化。WIF-1启动子甲基化使WIF-1蛋白表达降低,从而降低了抑制Wnt信号转导的作用,使细胞发生增殖、分化,促进肿瘤的发生发展。检测组织中WIF-1甲基化程度,可作为肿瘤早期诊断和评估预后的生物学标志物;运用去甲基化剂如5-氮杂胞苷,可逆转WIF-1的甲基化状态,从而成为肿瘤治疗的一个新靶点。     

肝细胞癌染色体4q和8p杂合性丢失的研究

目的:检测肝细胞性肝癌患者的4q和8p两个区域上相关的9个微卫星位点的杂合性丢失频率,探讨杂合性丢失与临床病理学特征的关系。方法:选取45例信息性肝癌标本,提取组织DNA,并检测浓度,然后进行PCR扩增,最后将产物通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离并观察目的条带有无密度减少或丢失。结果:45例信息性肝癌病例的9个微卫星位点总染合性缺失率为66.7%。其中D8S552的LOH率最高为41.9%,通过χ2检验或Fisher确切概率法进行统计学分析(P<0.05),得到该位点在性别(P=0.023),血清AFP(P=0.004),有无肝内转移(P=0.023)中均有统计学差异。D4S415为22.5%,D4S3331为22.3%,D8S1810为18.8%,D4S2954为15.4%,D4S3030为15.4%;D8S1725为12.5%,D8S1827为9.8%,D8S1754为6.3%。结论:染色体4q和8p上D4S415、D4S3331、D8S552位点杂合性丢失是肝细胞性肝癌发生发展的重要事件,提示其临近部位可能存在潜在的抑癌基因;为其他肝癌相关抑癌基因的研究提供理论基础。     

WIF-1启动子甲基化与肿瘤

WIF-1(Wnt Inhibitory Factor-1)是Wnt信号通路的一种拮抗物,能在胞外与Wnt蛋白结合而抑制Wnt信号转导。近年来的研究表明,多种肿瘤中均存在WIF-1基因启动子的异常甲基化。WIF-1启动子甲基化使WIF-1蛋白表达降低,从而降低了抑制Wnt信号转导的作用,使细胞发生增殖、分化,促进肿瘤的发生发展。检测组织中WIF-1甲基化程度,可作为肿瘤早期诊断和评估预后的生物学标志物;运用去甲基化剂如5-氮杂胞苷,可逆转WIF-1的甲基化状态,从而成为肿瘤治疗的一个新靶点。