吗啡对人胃癌MGC-803细胞p53 mRNA和E2F-1 mRNA表达的影响

目的 探讨吗啡对人胃癌MGC-803细胞p53 mRNA和E2F-1 mRNA表达的影响.方法 人胃癌MGC-803细胞以1×103/ml或2×105/ml密度接种于6孔培养板中,1 ml/孔,随机分为2组(n=18),正常对照组(C组)不作任何处理,吗啡组(M组)加入吗啡,使其终浓度为10μmol/L.于吗啡孵育7 d时应用克隆形成实验测定细胞增殖情况,于吗啡孵育24 h时测定细胞中p53 mRNA、E2F-1 mRNA的表达情况,并采用透射电子显微镜观察细胞超微结构.结果 与C组比较,M组克隆形成率降低,p53 mRNA表达上调,E2F-1 mRNA表达下调(P＜0.05).C组细胞核膜完整、核仁及染色质清晰,M组细胞核膜破裂、核仁碎裂,并出现凋亡小体.结论 吗啡可上调人胃癌MGC-803细胞p53基因表达、下调E2F-1基因表达,从而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.     

丙泊酚或依托咪酯对大鼠空间学习记忆能力的影响

目的 观察丙泊酚或依托咪酯对大鼠空间学习记忆能力的影响.方法 雄性SD大鼠45只,4周龄,随机均分为对照组、丙泊酚组和依托咪酯组.Morris水迷宫测试大鼠空间学习记忆能力,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠海马组织中神经球蛋白(Ngb)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)mRNA的表达.结果 与第1天比较,三组大鼠第2、3、4、5天逃避潜伏期均逐渐缩短(P＜0.05)；与对照组比较,丙泊酚组和依托咪酯组第4、5天逃避潜伏期延长(P＜0.05).各组大鼠Ngb的表达量差异无统计学意义,而丙泊酚组和依托咪酯组bFGF和CaMKⅡ的表达量明显少于对照组(P＜0.05).结论 丙泊酚或依托咪酯可使幼年大鼠的空间学习记忆能力降低,其机制可能与降低海马bFGF和CaMKⅡ的表达有关.     

丙泊酚或依托咪酯对大鼠海马胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的观察丙泊酚或依托咪酯对出生28 d大鼠海马胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic pro-tein,GFAP)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cyclic AMP response elementbinding protein,CREB)表达的影响。方法选取雄性SD大鼠60只,随机分为对照组、丙泊酚组和依托咪酯组,每组20只。丙泊酚组腹腔注射丙泊酚总量为200 mg/kg,依托咪酯组腹腔注射依托咪酯总量为60 mg/kg,对照组不注射任何药物。血气分析仪检测大鼠动脉血呼吸和代谢指标的变化,免疫组织化学染色法检测大鼠海马组织中GFAP的表达,并应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠海马组织中PKA和CREB mRNA的表达。结果各组大鼠动脉血pH值、氧分压、二氧化碳分压、HCO3-、BE、氧饱和度之间比较差异无统计学意义(P>0.05);丙泊酚组与依托咪酯组GFAP的平均积分光密度值均高于对照组(P<0.05),而丙泊酚组与依托咪酯组比较差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,丙泊酚组与依托咪酯组PKA和CREB mRNA的表达均降低(P<0.05),丙泊酚组与依托咪酯组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论丙泊酚或依托咪酯可能通过抑制PKA-CREB信号通路而损害大鼠海马神经元,使星形胶质细胞反应性增生、GFAP表达增加。     

异丙酚或依托咪酯对幼龄大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 评价异丙酚或依托咪酯对幼龄大鼠海马神经元凋亡的影响.方法 雄性SD大鼠140只,4周龄,体重40～60 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为7组(n=20):对照组(C组)、异丙酚50 mg/kg组(P1组)、异丙酚100 mg/kg组(P2组)、异丙酚200 mg/kg组(P3组)、依托咪酯10 mg/kg组(E1组)、依托咪酯30 mg/kg组(E2组)和依托咪酯60 mg/kg组(E3组).P1组和E1组单次腹腔注射异丙酚50 mg/kg或依托咪酯10 mg/kg;P2组、P3组、E2组和E3组首次注射异丙酚50 mg/kg或依托咪酯10 mg/kg,待大鼠有体动反应后,再每次追加异丙酚50 mg/kg或依托咪酯10 mg/kg,直至给完总量.大鼠苏醒2h时,每组取5只大鼠,抽取动脉血样进行血气分析.每组取5只大鼠,取海马CA1区,电镜下观察超微结构.每组取5只大鼠,取海马组织,采用RT-PCR法测定Survivin mRNA和Caspase-3mRNA的表达.每组取5只大鼠,取海马组织,采用Western blot法测定Survivin蛋白和Caspase-3蛋白的表达.结果 七组间pH值、PaO2、PaCO2、HCO3-、BE和SaO2比较差异无统计学意义(P＞0.05).与C组比较,P1组、P2组、E1组和E2组海马Survivin和Caspase-3的mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05),P3组和E3组海马Survivin mRNA和蛋白表达下调,Caspase-3 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05),海马CA1区神经元出现核固缩、染色质边集及凋亡小体.结论 较大剂量异丙酚和依托咪酯可能通过抑制Survivin的表达,增强Caspase-3的活性,导致幼龄大鼠海马神经元凋亡.     

芬太尼对胃癌MGC-803细胞E2F-1、p53基因表达的影响

目的观察芬太尼对人胃癌MGC-803细胞生长增殖及E2F-1、p53基因表达的影响。方法芬太尼10-4μmol/L与胃癌MGC-803细胞共同孵育为芬太尼组,未加入芬太尼的胃癌MGC-803细胞孵育为对照组。7d后检测胃癌MGC-803细胞生长增殖的变化,观察细胞超微结构的变化,检测细胞E2F-1、p53基因的表达。结果与对照组相比,芬太尼组MGC-803细胞生长增殖缓慢,细胞克隆形成率更低(P<0.05);细胞胞质深染、细胞核固缩、染色质碎裂,出现明显的凋亡表现;细胞E2F-1基因表达增加、p53基因表达减少。结论 10-4μmol/L芬太尼可抑制胃癌MGC-803细胞的生长增殖,促进细胞的凋亡,并改变E2F-1、p53基因的表达。     

右美托咪定联合阿片类镇痛药对心脏瓣膜置换手术后患者早期认知功能的影响

目的 探讨右美托咪定联合阿片类镇痛药(舒芬太尼或芬太尼)对心脏瓣膜置换手术后患者早期认知功能的影响,评估不同麻醉药物在围手术期对大脑认知功能的保护作用.方法 选择2016年5月-2018年3月在广西壮族自治区人民医院于全身麻醉低温体外循环下行单瓣膜置换术的患者120例,采用随机数字表法将患者分为舒芬太尼组、芬太尼组、右...     

Fluoro-JadeB法检测异丙酚麻醉后新生大鼠海马神经元的变性死亡

异丙酚是临床常用的静脉麻醉药,因其具有起效快、苏醒迅速等特点,也被广泛应用于新生儿和婴幼儿的全身麻醉中[1].但是,异丙酚对发育期的大脑是否产生神经毒性,大家观点不一[2-3].我们采用Fluoro-Jade B(FJB)染色法,观察异丙酚麻醉后新生大鼠海马CA1区、CA3区和齿状回神经元的变性死亡情况.     

不同剂量异丙酚麻醉对新生大鼠远期认知功能的影响

目的 探讨不同剂量异丙酚麻醉对新生大鼠远期认知功能的影响.方法 雄性SD大鼠100只,出生后7d,体重9～18g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为5组(n =20)∶对照组(C组)、异丙酚25 mg/kg组(P1组)、异丙酚50 mg/kg组(P2组)、异丙酚100 mg/kg组(P3组)和异丙酚200 mg/kg组(P4组).P1组和P2组分别腹腔注射异丙酚25和50 mg/kg;P3组和P4组首次注射异丙酚50 mg/kg,翻正反射恢复时,再追加异丙酚50 mg/kg,直至给完总量.每组取5只大鼠,于苏醒后即刻抽取动脉血样进行血气分析.苏醒后放回笼内继续饲养直至9周龄,采用Morris水迷宫实验测定认知功能,处死后,取海马组织,分别采用Western blot法和RT-PCR法测定神经生长因子(NGF)和Caspase-9蛋白及其mRNA的表达;电镜下观察海马神经元超微结构.结果 5组大鼠血气分析指标差异无统计学意义(P＞0.05).与C组比较,P1组逃避潜伏期和穿越原平台次数差异无统计学意义(P＞0.05),P2组～P4组逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少,P1组～P4组海马NGF蛋白及其mRNA表达下调,Caspase-9蛋白及其mRNA表达上调(P＜0.05);P1组～P4组逃避潜伏期逐渐延长,NGF蛋白及其mRNA表达逐渐下调,Caspase-9蛋白及其mRNA表达逐渐上调,P2组～P4组穿越原平台次数少于P1组(P＜0.05),但P2组～P4组间差异无统计学意义(P＞0.05);P2组～P4组海马神经元出现核固缩、染色质边集、核碎裂、凋亡小体.结论 异丙酚麻醉可损害新生大鼠的远期认知功能,且该作用与剂量有关;其机制可能与抑制NGF表达,增强Caspase-9活性有关.