人骨髓源性肝干细胞体外扩增方案的探讨

目的探讨体外扩增骨髓源性肝干细胞的可行方案。方法采用密度梯度离心分离法从新鲜骨髓中获取富含CD117阳性细胞和CD184阳性细胞的组分,然后将细胞在体外培养扩增0、7d、14d,扩增方案采用含10%自体血清的高糖DMEM培养基体系中和无血清的高糖DMEM培养基体系中加入不同浓度的促肝细胞生长素(HGPF)、促血小板生长素(TPO)和白细胞介素3(IL-3),最后用流式细胞计数法测定扩增细胞中CD117阳性细胞和CD184阳性细胞的数量变化。结果含10%自体血清的高糖DMEM培养基体系中加入HGPF40μg/ml、TPO50ng/ml、IL-310ng/ml组的扩增效果最好,扩增7d的CD117阳性细胞数量和CD184阳性细胞数量分别增加6.55倍和6.20倍,扩增14d的CD117阳性细胞数量和CD184阳性细胞数量分别增加11.62倍和20.57倍。结论含10%自体血清的高糖DMEM培养基体系中加入HGPF40μg/ml、TPO50ng/ml、IL-310ng/ml是体外扩增骨髓源性肝干细胞的可行方案。     

胰岛素瘤的影像学特征

Insolinoma is a rare disease,but with an increased incidence in recent years.From March 2003 to October 2010,16 patients with insulinoma had been admitted to the Nanfang Hospital,and the results of ima...     

正常、肝纤维化和肝硬化患者肝内人单核细胞趋化蛋白-3的表达变化

目的 观察正常、肝纤维化和肝硬化患者肝组织内人单核细胞趋化蛋白-3(MCP-3)的表达变化.方法 用ELISA方法分别检测9例正常、10例肝纤维化、11例肝硬化患者肝组织内MCP-3的表达水平.结果 正常对照组、肝纤维化组和肝硬化组的MCP-3水平分别为(2.03±1.14)、(5.09±1.51)和(4.57±1.42)pg/mg.肝纤雏化组和肝硬化组的MCP-3水平显著高于正常对照组,肝硬化组的MCP-3水平低于肝纤维化组,但肝硬化组与肝纤维化组的差异无显著性.结论 在肝纤维化阶段,肝内表达MCP-3增多有利于趋化骨髓间充质干细胞向肝内迁移时对损伤进行修复,这符合临床上肝纤维化具有可逆性的特点.肝硬化时,肝内MCP-3表达水平与肝纤维化组比较有下降趋势,这或许是肝硬化时肝修复能力较肝纤维化时低下的原因.     

肝纤维化和肝硬化患者肝内基质细胞衍生因子-1α水平的变化

目的观察肝纤维化和肝硬化患者肝内基质细胞衍生因子-1α（SDF-1α）表达情况。方法用ELISA法分别检测8例正常、10例肝纤维化、12例肝硬化病人肝组织内SDF-1α表达水平。结果正常对照组、肝纤维化组、肝硬化组的SDF-1α水平分别为（5．18±1．90）、（18．94±7．05）和（4．79±1．86）pg／mg。肝纤维化组的SDF-1α水平显著高于正常对照组和肝硬化组,而正常对照组和肝硬化组的SDF-1α水平无显著性差异。结论在肝纤维化阶段,肝脏仍具有较强的修复与再生能力,肝内表达SDF-1α增多,趋化肝干细胞向肝内定植并诱导其分化而修复肝损伤。肝硬化时,肝内SDF-1α表达水平低下,这或许是硬化肝再生与修复能力低下的重要因素,但SDF-1α水平低下的确切原因与意义还有待研究。     

自体骨髓源性肝干细胞移植治疗肝炎后肝硬化的临床研究

目的探索自体骨髓源性肝干细胞在体外诱导与扩增后肝内移植治疗肝炎后肝硬化的效果。方法选取2008年6月至2009年4月入住我科的肝炎后肝硬化、门脉高压症,并在我科接受了脾切除、门奇静脉断流术治疗的患者12例。治疗组6例,采集并分离自体骨髓源性肝干细胞,在体外培养诱导与扩增7天后,收集细胞在接受脾切除、门奇静脉断流术中经肝固有动脉注入法将其移植至肝内;对照组6例,以同样方法注入等体积生理盐水。通过术前术后患者肝功能及肝纤维化的指标来评估治疗的效果。结果两组病人的术后均未发现手术并发症,术前的各项检验均无统计学差异,术后治疗组肝功能指标谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、血浆白蛋白、凝血酶原时间;肝纤维化指标:透明质酸、人III型前胶原,均好转:对照组未见明显变化,治疗组优于对照组(P<0.05)。结论自体骨髓肝干细胞体外培养诱导与扩增后肝内移植是一种安全有效的肝病治疗方法,可以显著改善肝炎后肝硬化患者肝功能及肝纤维化的指标。     

肝内趋化因子CCL21和CCL25在不同肝组织中的表达变化

目的观察正常肝、肝纤维化和肝硬化患者肝组织内趋化因子CCL21和CCL25的表达变化。方法ELISA方法检测9例正常肝、10例肝纤维化、11例肝硬化患者肝组织中CCL21和CCL25的含量。结果正常组、肝纤维化组、肝硬化组的CCL21含量分别为(0.14±0.21)、(0.92±0.69)和(3.22±1.45)pg/mg;肝硬化组的含量高于正常组和肝纤维化组,肝纤维化组和正常组CCL21的含量差异无统计学意义。正常组、肝纤维化组、肝硬化组的CCL25含量分别为(4.06±2.23)、(14.46±4.10)和(21.97±2.98)pg/mg;肝硬化组的含量高于正常组和肝纤维化组,肝纤维化组的含量高于正常组。结论肝脏发生纤维增生性损伤时,肝内CCL21和CCL25的含量显著增加,随着病变由肝纤维化向肝硬化阶段发展,肝内CCL21和CCL25含量也进一步升高,提示CCL21和CCL25很可能是肝纤维化和肝硬化状态下趋化骨髓源性肝干细胞迁移到肝脏修复损伤的重要因素。     

提高肝胆外科实习生临床教学质量的体会和思考

临床实习是医学教育中的重要环节,针对新形势下肝胆外科临床实习教学中遇到的具体问题,就如何提高学生的学习积极性,培养临床思维能力,创造和谐的教学环境,采用适当的教学方法提高临床教学质量,提出了自己的体会和思考.     

正常人和肝纤维化与肝硬化病人肝内CXCL13和CXCL16的表达变化

目的　观察正常人和肝纤维化与肝硬化病人肝组织中趋化因子CXCL13和CXCL16的表达变化。方法　用ELISA方法分别检测9例正常人和10例肝纤维化、11例肝硬化病人肝组织中的CXCL13和CXCL16含量。结果　正常对照组、肝纤维化组、肝硬化组的CXCL13浓度分别为(2.34±2.05)、(6.04±2.97)和(12.10±10.38) ng/g；肝硬化组的浓度显著高于正常对照组和肝纤维化组，正常对照组与肝纤维化组的CXCL13浓度差异无统计学意义。正常对照组、肝纤维化组、肝硬化组的CXCL16浓度分别为(1.32±0.91)、(3.34±1.81)和(3.49±1.90) ng/g；肝硬化组和肝纤维化组浓度均显著高于正常对照组浓度，肝硬化组和肝纤维化组的CXCL16浓度差异无统计学意义。结论　肝脏发生纤维化损伤时，肝脏表达CXCL13和CXCL16的数量都显著增多，但二者的变化规律不同。肝内CXCL13水平在肝纤维化阶段开始升高，至肝硬化阶段升高到显著水平。肝内CXCL16水平在肝纤维化阶段就已经升高到显著水平，至肝硬化阶段仍维持在高水平状态。     

肝纤维化与肝硬化组织中趋化因子CXCL5和CXCL8的表达意义

目的 探讨肝纤维化与肝硬化组织中趋化因子CXCL5和CXCL8的表达意义.方法 收集2008年5月至2009年5月南方医科大学南方医院9例肝血管瘤患者、10例肝纤维化患者和11例肝硬化患者肝组织标本,采用ELISA法检测肝组织中的CXCL5和CXCL8的含量.采用单因素方差分析,双变量正态分布采用Pearson等级相关分析,不符合双变量正态分布的采用Spearman相关系数表示.结果 肝血管瘤、肝纤维化、肝硬化患者肝组织中CXCL5的含量分别为(0.8±0.7)、(2.0±2.0)、(17.1±4.8)ng/g;CXCL8的含量分别为(6.2±3.7)、(11.6±3.5)、(12.3±3.9)ng/g;3者比较差异有统计学意义(F=60.050,7.690,P＜0.05).CXCL5与ALT、AST、PT具有相关性(r=0.502,0.468,0.523,P＜0.05);CXCL8与ALT、AST、TBil、PT具有相关性(r=0.477,0.504,0.537,0.431,P＜0.05).结论 肝脏发生纤维化损伤时CXCL5和CXCL8的含量均显著增高,但两者的变化规律不同.CXCL5和CXCL8的变化与肝脏损伤有关,但变化的程度与肝病的损害程度不完全一致.