等位基因测序的简便快速方法

目的：探索一种简便快速的等位基因测序方法。方法：用银染方法对待检个体的血样本进行简短串联重复（short tandem repeat,STR)基因分型，将需测序的等位基因条带从凝胶图上切下，PCR扩增，产物经纯化作为测序模板。采用循环测序法测序.结果：对D12S391、D11S554 STR基因座的等位基因Ladder及STR基因座（FGA、D12S391、D11S554）等位基因发生突变的19个家系的等位基因进行了测序。STR分型表现为杂合子或纯合子的等位基因用此方法测序都得到了清晰的信号。结论：此方法 不仅给等位基因测序提供了一种有效手段，而且对于只要能利用电泳分离的混合的DNA片段，就能用此方法将各DNA片段分别测序。     

抗AB血型单克隆抗体的研制和鉴定

抗ＡＢ血型单克隆抗体的研制和鉴定＊２３００３２安徽医科大学分子生物学研究室徐镜庾蕾熊江霞王晓琴陈华堂淋巴细胞杂交瘤技术［１］的问世、血型单抗的产生为人类ＡＢＯ血型分型提供了新的手段。本室继１９９０年研制成抗Ａ、抗Ｂ和抗Ｈ血型单抗后［２、３］，现又研制...     

细菌—酵母穿梭表达质粒pGBKT7—LMP1的构建与鉴定

目的 构建能在酵母中表达EBV潜伏膜蛋白1（LMP1）的穿梭表达质粒pGBKT7-LMP1。方法 RT－PCR方法扩增EB病毒LMP1全外显子片段，利用DNA重组技术将其定向插入细菌－酵母穿梭质粒pGBKT7启动子下游。结果 限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实RT－PCR获得的LMP1 cDNA片段与GenBank中的数据完全吻合；LMP1准确克隆入pGBKT7的多克隆位点，未改变读码框架。结论 成功构建了穿质粒pGBKT7-LMP1。     

抗人H血型物质单克隆抗体的研制

经H血型物质免疫的BALB/C小鼠脾细胞与SP2/0细胞用PEG融合,获得一株分泌抗人H血型物质单克隆抗体的杂交瘤细胞株—6H_3,为IgG_1类。其效价,细胞培养上清液为512,腹水达16384。凝血特异性试验、吸收放散试验、血凝抑制试验证明其仅对人H血型物质特异。杂交瘤细胞在液氮中贮存1年,分泌抗体能力不变。抗体经56℃保温30min及-20℃和37℃反复冻融试验,凝血活性保持稳定。可望能取代传统的抗H试剂而用于临床血型分型。