院内感染的病原菌分布及耐药性分析

目的了解医院临床分离菌的耐药情况,从而控制医院感染.方法2002年1～6月仁济医院分离菌用Kirby-Bauer法进行药敏试验.结果分离菌株825株,其中革兰阳性菌399株(48.36%),革兰阴性菌426株(51.64%).检出率较高的革兰阴性菌对氨苄西林-舒巴坦、头孢唑啉的耐药率最高,而对头孢哌酮-舒巴坦、亚胺培南的耐药率最低.金黄色葡萄球在菌种分布中占第一位,其对万古霉素、利福平和奈替米星耐药率为0,而对青霉素类、头孢类药物的耐药率较高.粪肠球菌的分离率位居第二,未出现对万古霉素耐药者,但对环丙沙星、红霉素、庆大霉素的耐药率相对较高.结论为控制细菌的耐药性,必须加强抗菌药物的合理使用.     

1359株临床分离菌耐药性分析

目的研究本院1999年临床分离菌耐药状况.方法收集该院1999年1～12月临床分离菌共1 359株,对其进行抗菌药物敏感试验,并用WHONET-4软件进行细菌耐药性分析. 结果革兰阳性菌552株(40 6%),分离率占前四位的分别是金黄色葡萄球菌(12.0%)、表皮葡萄球菌(10.7%)、粪肠球菌(7.4%)和溶血葡萄球菌(4.6%).革兰阴性菌807株(59.4%),分离率占前五位的分别是大肠埃希菌(17.0%)、肺炎克雷伯菌(10.4%)、铜绿假单胞菌(8.7%)、阴沟肠杆菌(6.8%)和醋酸钙不动杆菌(5.3%).革兰阳性菌总体上对万古霉素耐药率最低(0.4%),对青霉素G的耐药率最高(92.1%).革兰阴性菌总体对伊米配能的耐药率最低(5.3%),其他依次为阿米卡星(13.8%)、头孢他啶(13.9%)和头孢噻肟.革兰阴性菌对第三代头孢菌素和氟喹诺酮类抗生素耐药率有较显著增加.革兰阳性菌中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的百分率较高(66.2%).结论该院临床标本中分离的细菌耐药问题严重,微生物实验室需加强耐药性监测,以有效控制细菌感染和耐药性的播散.     

多重聚合酶链反应检测革兰阴性杆菌中质粒介导ampC基因

目的运用多重聚合酶链反应（PCR）检测革兰阴性杆菌的质粒ampC基因,了解该基因在我院的流行情况。方法采用头孢西丁初筛试验筛选出符合头孢菌素酶（AmpC）表型筛选条件的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌共50株,通过热裂解法进行DNA抽提,采用6组ampC特异引物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳区分PCR产物,进一步DNA测序确定其基因型。结果50株试验菌中有8株为阳性,分别为肺炎克雷伯菌5株,大肠埃希菌3株,基因型为CIT型1株,DHA型4株,EBC型3株。结论我院质粒介导ampC基因型主要为DHA型、EBC型和CIT型。多重PCR是特异性高、简便检测质粒ampC基因型的分子生物学方法。     

血脂与老年冠心病患者颈动脉粥样硬化斑块的相关性

目的 探讨血脂与老年冠心病(CHD)患者颈动脉粥样硬化斑块的相关性.方法 选取276例老年CHD患者,根据有无颈动脉粥样硬化斑块分为斑块组(138例)和无斑块组(138例).收集所有患者的一般资料,并检测其总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白B...     

鲍曼不动杆菌多重耐药机制研究进展

鲍曼不动杆菌是医院感染重要条件致病菌。近年来,鲍曼不动杆菌感染日益增多,仅次于金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌,并且呈现多重耐药现象,已引起临床医生和微生物工作者的高度关注。鲍曼不动杆菌耐药机制包括染色体基因突变,外膜孔蛋白改变,药物主动外排系统和产生灭活酶等。细菌耐药基因通过接合性质粒、转座子、整合型噬菌体、整合子的水平传递等发生传递。我们就鲍曼不动杆菌多重耐药机制,尤其是整合子与鲍曼不动杆菌多重耐药性的有关研究作一详细综述。     

REP-PCR技术在光滑假丝酵母菌基因分型中的应用价值

目的评估重复序列PCR(REP-PCR)技术在光滑假丝酵母菌基因分型中的作用。方法收集深部真菌感染患者体内分离的光滑假丝酵母菌34株,以API 20C AUX酵母菌鉴定板条鉴定菌种及生化表型。采用REP-PCR对34株光滑假丝酵母菌进行基因分型:提取真菌基因组DNA,以Care-2重复元件设计引物,PCR扩增产物电泳后运用NTSYS软件进行聚类分析,聚类树状图相似系数(SI)≥97%且无明显条带差异定为同一基因型,SI≥97%且仅相差一条条带定为亚型。比较REP-PCR分型与多位点序列分型(MLST)的辨别力指数(DP),分析具有不同生化表型光滑假丝酵母菌的REP-PCR基因分型情况。结果 REP-PCR基因分型结果显示:34株光滑假丝酵母菌分为17个基因型,其中A型8株,B型6株,C、D型各3株,E型2株,F～Q型各1株,未发现亚型。REP-PCR和MLST基因分型的DP(95%CI)分别为0.911(0.770～0.980)和0.369(0.220～0.560),两者比较差异有统计学意义(χ2=21.68,P0.01)。34株光滑假丝酵母菌有两种生化表型,生化表型代码分别为2000040(32株)和6000040(2株),生化表型代码为60000402的2株经REP-PCR分型结果分别为D型和K型(SI=0.43)。结论 REP-PCR对光滑假丝酵母菌基因分型的辨别力较强且操作简便,适用于临床实验室对光滑假丝酵母菌的流行病学研究。     

同一等位基因复合杂合突变导致Ⅰ型遗传性抗凝血酶缺陷症

目的对1例遗传性抗凝血酶（AT）缺陷症先证者及其家系进行表型诊断和基因诊断。方法采用免疫比浊法和发色底物法分别检测先证者及其家系成员的AT抗原（AT：Ag）和AT活性（AT：A）,抽提外周血基因组DNA,PCR扩增AT基因（SERPINC1）7个外显子及其侧翼序列,应用直接测序法对先证者进行AT基因序列分析。针对先证者中发现的突变位点,对其家系成员进行相应基因突变检测,同时在100例正常人中筛查以排除多态性。结果先证者AT：Ag和AT：A分别为114 mg/L和54.8%。其AT基因外显子2区发现了2个杂合点突变,分别为c.134G〉A和c.342T〉G。其家系部分成员检测到相应的杂合突变。家系遗传分析表明,2个杂合突变位于同一等位基因。结论同一等位基因复合杂合突变是导致该家系Ⅰ型遗传性AT缺陷症的分子原因。     

妊娠期CA125水平变化与部分生化指标的相关性

目的探讨糖类抗原(CA)125在不同孕期中的变化及与部分生化指标的相关性。方法选取健康孕妇(妊娠组)167例,按孕期分为早孕(8～12周)组(57例)、中孕(15～19周)组(55例)和晚孕(33～36周)组(55例)。以健康非妊娠女性46名作为对照组。检测所有对象的血清CA125、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、血糖(Glu)、三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)水平。采用Pearson相关分析评估CA125与其他各项指标之间的相关性。结果与对照组比较,妊娠组血清CA125、ALP、TG和TC水平明显升高(P0.05),血清Cr、BUN和Glu水平明显降低(P0.001),血清ALT和AST水平差异均无统计学意义(P0.05)。早孕组血清CA125水平明显高于中孕组和晚孕组(P0.05),且晚孕组明显高于中孕组(P0.05)。晚孕组血清ALP、TG和TC水平明显高于早孕组和中孕组(P0.05),血清ALT及Glu水平均低于早孕组和中孕组(P0.05),而早孕组和中孕组之间差异均无统计学意义(P0.05)。不同孕期各组之间血清Cr、BUN和AST水平差异均无统计学意义(P0.05)。妊娠组CA125与BUN、Glu呈正相关(r值分别为0.221、0.165,P0.05),与Cr、ALP、ALT、AST、TC和TG均无相关性(r值分别为-0.005、-0.059、0.028、0.028、-0.140、-0.071,P0.05)。结论妊娠期尤其是早孕期血清CA125水平明显升高,且与BUN和Glu有关。     

NIPT及NIPT-plus在IVF胎儿染色体异常筛查中的应用研究

目的探究基于孕妇外周血胎儿游离DNA的无创产前基因检测(NIPT)和拓展性无创产前基因检测(NIPT-plus)在体外受精-胚胎移植(IVF)胎儿染色体异常筛查中的应用价值。方法收集2017年5月—2019年10月在复旦大学附属妇产科医院接受NIPT及NIPT-plus的孕妇,根据其受孕方式分为通过IVF方式受孕(IVF组)和自然受孕(对照组)。对所有研究对象NIPT、NIPT-plus及产前诊断检测结果进行回顾性分析,评价NIPT、NIPT-plus在IVF胎儿染色体异常,包括染色体非整倍体及拷贝数变异(CNV)筛查中的应用价值。结果IVF组孕妇1312例,年龄(32.83±4.02)岁,进行NIPT及NIPT-plus时平均孕周(15.59±2.16)周,其中单胎妊娠925例,双胎妊娠387例;对照组23031例,年龄(30.62±4.77)岁,进行NIPT及NIPT-plus时平均孕周(16.44±2.73)周,其中单胎妊娠22444例,双胎妊娠587例。IVF组NIPT提示21三体(T21)4例(3.05‰),阳性预测值(PPV)为100%;13三体(T13)3例(2.29‰);性染色体异常17例(12.96‰),PPV为55.56%;CNV 3例(2.29‰);其他染色体异常6例(4.57‰),PPV为33.33%。结论NIPT及NIPT-plus在IVF胎儿染色体非整倍体筛查中具有重要价值,常染色体及性染色体三体高风险结果具有较高参考价值;应用于IVF胎儿染色体单体及CNV筛查高风险结果具有一定的预警作用。     

Phoenix-100全自动微生物鉴定/药敏系统检测肠球菌方法评估

目的用Phoen ix-100全自动微生物鉴定/药敏系统(简称Phoen ix-100系统)检测肠球菌并评估此检测系统。方法收集50株临床分离肠球菌,用Phoen ix-100系统进行鉴定及药敏试验,通过与API鉴定系统、药敏纸片法和E-test法[筛选耐万古霉素肠球菌(VRE)]比较,对Phoen ix-100系统进行评估。结果与API鉴定系统相比,Phoen ix-100系统鉴定肠球菌的一致率为90.0%。与药敏纸片法相比,Phoen ix-100系统检测肠球菌对庆大霉素(筛选耐高浓度氨基糖苷类抗生素肠球菌)、氨苄西林、环丙沙星、红霉素、呋喃妥因、万古霉素和肽可霉素药敏结果的完全符合率分别为94.0%、94.0%、88.0%、94.0%、70.8%、64.0%和92.0%。与E-test法相比,Phoen ix-100系统筛选VRE的完全符合率为84.0%;未出现极大错误,大错误率为12.0%,小错误率为4.0%。结论用Phoen ix-100系统检测肠球菌是一种简便、快速和比较准确可靠的方法。