南昌链霉菌生物合成梅岭霉素种子制备优化

以参数相关理论为指导,优化南昌链霉菌生物合成梅岭霉素种子制备工艺。结果表明,培养20～35h后,pH7.30～7.50,总糖<0.35%,pmv>10%,溶磷<100μg/ml,菌丝分化启动有利于提高梅岭霉素的发酵效价。     

反相高效液相色谱法测定发酵液中梅岭霉素

目的:建立了发酵液中梅岭霉素的定量测定方法。方法:反相高效液相色谱法,Hypersil-C_(18)柱(4 mm×125mm,5μm),流动相为乙腈-水(78:22),流速1.2mL·min~(-1),检测波长238 nm,室温测定。结果:在1O.2～163.2μg·mL~(-1)范围内梅岭霉素浓度与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 7,回归方程为Y=25.44X+2.72。样品的日间 RSD≤1.8％,高中低浓度样品的日内RSD≤2.5％(n=8)。平均回收率为96.9％(n=8,RSD<3.0％)。结论:本方法快速、准确、简便、稳定,为定量分析提供了可靠的依据。     

复合诱变筛选avermectins高产菌株

由Streptomyces avermitilis初始菌株经过自然分离可以得到三种不同类型的菌株，即灰色粉末型、白色和光秃型。其中灰色粉末型产素水平最高，摇瓶发酵效价达到6835．1μg／ml，B1组分达到56．3％。经过紫外线和亚硝基胍对初始菌株的孢子的诱变及对其原生质体的诱变再生。并且经过异亮氨酸和链霉素的定向筛选，得到的高产菌株摇瓶发酵效价达到8542．9μg／ml，B。组分达到64．9％；同时通过对高产菌株进行传代培养检验其传代稳定性，结果表明，传代3代后，菌株开始退化，并且其发酵效价有比较显著的下降。     

利用均匀实验优化利福霉素SV发酵培养基氮源配比

应用均匀设计的方法对利福霉素SV发酵培养基中的氮源配比进行优化。研究了氮源中各成分对发酵效价的影响。确定各成分的最佳配比并用实验验证，使摇瓶发酵效价提高了10％以上。并对利福霉素SV产生菌在新、老培养基中的代谢特性进行了比较。     

梅岭霉素的分离纯化

利用南昌霉素在较低pH介质中加热时易降解而梅岭霉素较稳定的性质,结合溶剂萃取法除去杂质,纯化梅岭霉素.经全波长扫描、HPLC和质谱分析等,推测梅岭霉素同系物的分子结构.     

培养温度对多拷贝毕赤酵母猪胰岛素前体的分泌表达和生理特性影响

研究了培养温度对多拷贝毕赤酵母分泌表达猪胰岛素前体（PIP）的生理特性的影响。将多拷贝重组菌A2（12拷贝）和A3（18拷贝）分别在25 ℃和 30 ℃培养,25 ℃培养时PIP表达水平分别比30 ℃培养时提高了40%和32%,而A3细胞的存活率提高了20%。对A3细胞内相关蛋白折叠和氧化程度的KAR2,PDI1, GLR和TRR1基因转录水平分析发现,相比30 ℃培养25 ℃培养时减少了16%~35%,这表明多拷贝重组A3菌株在低温培养时比高温培养在蛋白折叠和氧化协廹响应有明显的减缓效应,从而导致外源蛋白表达提高了40%.     

亮氨酸对必特螺旋霉素发酵组分的影响

本文针对必特螺旋霉素发酵主要组分异戊酰基螺旋霉素以及异戊酰基螺旋霉素Ⅲ的提高，在摇瓶培养基试验中，通过一次性添加与分批添加终浓度为15．4mmol／L的亮氨酸，发现分批添加亮氨酸可以维持效价基本不变，而总异戊酰基螺旋霉素与异戊酰基螺旋霉素Ⅲ分别由对照的31．1％和12．0％提高至46．9％和19．5％。通过分析发酵过程的有机酸以及氨基酸的变化规律，讨论了亮氨酸提高必特螺旋霉素主要组分的作用机理，同时在15L发酵罐中对分批添加亮氨酸添加效果进行了验证试验，结果表明，发酵液必特螺旋霉素组分中总异戊酰基螺旋霉素和异戊酰基螺旋霉素Ⅲ在96h分别提高至59．91％和21．45％。     

应用神经网络和遗传算法优化利福霉素B发酵培养基

对培养基进行优化时，会获得大量的实验数据，但这些实验数据往往不能被进一步利用。如果使用一些不同的方法对历史数据进一步挖掘就可能得出额外的规律。本文使用神经网络对历史数据进行处理，得到了利福霉素B培养基成份和发酵效价之间的关系；再以这个关系作为遗传算法的适应度函数，在一个相对大的空间内快速搜索最优解。优化的培养基使摇瓶发酵效价提高了17．9％，说明所建立的模型能够实现培养基优化的目的并具有数据挖掘的功能。     

氨基酸对利用红色糖多孢菌发酵生产红霉素的产量及组分影响研究

研究红色糖多孢菌发酵生产红霉素过程中几种氨基酸对产量及组分的影响。通过摇瓶实验证实了0h时向合成培养基中分别添加数种氨基酸，对红霉素的产量与组分都有着重要的影响。本文重点研究甘氨酸在红色糖多孢菌发酵中对产量和组分的影响，试验结果表明，0h添加0．05％的甘氨酸产量明显提高（72．2％），红霉素A组分相对百分含量提高9．7％，红霉素C组分减少78．7％。通过50L FUS-50（A）发酵罐进行验证，红霉素产量达到8939u／ml，比对照提高12．2％，EMA：EMC从5．1：1提高到8.2：1。     

重组毕赤酵母表达猪胰岛素前体代谢参数分析和动力学模型

采用发酵过程参数相关分析理论,分析了毕赤酵母在不同发酵阶段利用不同碳源时的生理代谢参数变化特征。同时,研究了不同比生长速率下重组毕赤酵母表达猪胰岛素前体补料分批发酵过程,建立蛋白表达阶段的细胞生长非结构模型,结果表明:比生长速率和甲醇浓度符合Monod方程,最大比生长速率(μmax)为0.101h-1,基质的半饱和常数(Ks)为0.252g/L,细胞得率系数YX/S=0.386g/g,细胞维持系数m=0.011g/(g·h)。当比生长速率为0.016h-1时猪胰岛素前体(PIP)最大比形成速率(qp,max)达0.098mg/(g·h)。该模型能较好预测毕赤酵母表达阶段细胞生长和PIP表达的发酵趋势,用其控制发酵过程,目标蛋白PIP产量为优化前的1.5倍,达0.976g/L。