食管鳞癌组织的常见基因组DNA异常改变及其临床预后的相关性分析

目的：分析食管鳞癌组织的常见基因组DNA改变,以期获得可能用于该病诊断和预后判断的分子标志。方法：对112例食管鳞癌手术组织标本,提取基因组DNA采用聚合酶链式反应（PCR）和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测位于染色体3p和13q上的6个微卫星的杂合性丢失（LOH）情况,并与我们已报道的高频基因突变进行联合分析。结果：在被测的微卫星中,D3S1768的LOH频率最高,为48.9%;D3S2452的LOH最低,为28.8%。当与所测突变联合分析时,发现一个较优的组合,包括D3S1768、D13S171、D13S1493、TP53和TTN,该组合中任意2个标志同时出现异常改变的频率为75.6%,远高于任何单一标志的改变频率。生存分析的结果显示,在本组病例中所测微卫星LOH频率与患者生存率之间无统计学相关性,但PBRM1和SYNE2基因突变多存在于生存期较短的病例中。当将基因突变与淋巴结转移联合分析时,发现这两类指标同为阳性患者的总生存期显著短于仅有其一阳性或均为阴性的患者（P=0.027）。结论：食管鳞癌组织中存在较高频率的微卫星D3S1768杂合性丢失,包括TP53突变的标志物组合有助于提高检测食管鳞癌的敏感度,PBRM1、SYNE2基因突变联合淋巴结转移可作为食管鳞癌预后判断的指标。     

lncRNA-TUG1作为竞争性内源RNA在心血管疾病中的研究进展

<正>长链非编码RNA(long no-coding RNA,lncRNA)是指长度超过200个核苷酸的RNA分子,虽然本身并不具备直接编码蛋白质的作用,却可通过参与多种生物过程,包括细胞增殖、分化、凋亡等介导疾病的发生^[1]。lncRNA-牛磺酸上调基因1(taurine upregulated gene 1, TUG1)被认为与人类疾病进展密切^[2]。此外,过表达lncRNA-TUG1是心血管疾病后心脏预后不良的生物标志物[3]。竞争性内源RNA(completing endogenous RNA,ceRNA)主要由lncRNA、环状RNA、     

P53和多粘连细胞外基质蛋白LAMC2在食管鳞癌中的表达相关性研究

目的:探讨P53蛋白和多粘连细胞外基质蛋白LAMC2在食管鳞癌中的表达相关性.方法:采用组织芯片免疫组织化学技术检测2011至2012年间河南林州肿瘤医院病理科收取的150例食管鳞癌组织中P53和LAMC2蛋白的表达情况,分析其与食管癌患者临床病理特征的关系以及两个蛋白之间的相关性.结果:免疫组织化学染色结果显示,LAMC2蛋白和P53蛋白在正常食管上皮组织中均不表达,而在食管鳞癌组织中的表达阳性率分别为43.3％(65/150)和59.3％(89/150).LAMC2的表达与患者性别、肿瘤分化程度及淋巴结转移相关.P53蛋白在食管鳞癌组织中的表达也与患者性别、肿瘤分化程度及淋巴结转移相关.P53和LAMC2在食管鳞癌的表达具有相关性(P<0.001).结论:P53和黏蛋白LAMC2在食管鳞癌中具有统计学相关性,可以联合作为食管鳞癌的标志物.     

炎症及动脉硬化相关因子与视网膜静脉阻塞的相关性

目的：研究视网膜静脉阻塞(RVO)患者血清白介素6(IL-6)、脂联素(ADPN)、Apelin、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血管内皮生长因子(VEGF)水平变化情况,从分子角度探究其与RVO的相关性。

方法：收集中央型视网膜静脉阻塞(CRVO)35例,分支型视网膜静脉阻塞(BRVO)37例为试验组1、2,年龄相关性白内障患者32例为对照组,记录其发病时间、视力、心脑血管疾病病史及OCT示黄斑水肿高度,酶联免疫吸附法检测其外周血血清中与炎症及动脉硬化紧密相关因子—IL-6、ADPN、Apelin、hs-CRP、VEGF的表达情况。

结果：BRVO组、CRVO组Apelin值分别为6.69(4.25,10.52)、7.12(3.78,8.58)ng/mL,均高于对照组1.19(0.74,1.49)ng/mL(P<0.05)。BRVO组、CRVO组ADPN值分别为8.06(4.67,10.81)、9.74(4.10,11.67)μg/mL。BRVO组、CRVO组IL-6值分别为35.89(17.63,37.50)、37.16(11.52,42.80)pg/mL。BRVO组、CRVO组hs-CRP值分别为161.10(54.51,164.01)、206.93(51.47,331.29)μg/mL。BRVO组、CRVO组VEGF值分别为158.25(82.24,230.41)、174.14(76.04,243.98)pg/mL。该四项因子试验组与对照组比较均无差异(P>0.05)。RVO组视力及黄斑水肿高度与上述血清因子水平未见明显相关。

结论：RVO患者Apelin增高,且Apelin可能为RVO发生的相关危险因素。ADPN、IL-6、hs-CRP、VEGF在RVO急性期未见特异性表达。     

NEDD4在食管鳞癌中的表达及作用研究

目的：检测神经前体细胞表达发育下调蛋白4（neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4,NEDD4）在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义,并探讨其过表达对食管鳞癌细胞恶性表型的影响。方法：应用组织芯片-免疫组织化学染色技术,检测131例食管鳞癌及配对癌旁正常食管上皮组织中NEDD4蛋白的表达情况,并分析其表达水平与临床病理指标的相关性;同时,使用TCGA和GTEx数据库中的mRNA表达数据,分析食管鳞癌组织中NEDD4 mRNA的表达变化。然后,在NEDD4表达水平较高的食管鳞癌细胞系中用特异性siRNA敲降NEDD4的表达,采用CCK8法检测细胞增殖活力的变化。结果：免疫组化染色结果显示,NEDD4在40%（53/131）的食管鳞癌组织中高水平表达,而在癌旁正常食管上皮组织中不表达或低水平表达。NEDD4蛋白的表达水平与食管鳞癌的浸润深度、病理学分期呈正相关（均为P < 0.05）。同时,TCGA及GTEx数据库分析结果显示,NEDD4 mRNA表达水平在食管鳞癌组织中明显升高（P < 0.01）。细胞增殖活力检测结果显示,在KYSE30和KYSE150细胞中,转染NEDD4 siRNA的实验组细胞的增殖活力均显著低于对照组细胞（均为P < 0.01）。结论：NEDD4在食管鳞癌组织中表达上调,其高表达可增强食管鳞癌细胞的增殖活力,提示NEDD4过表达可能在食管鳞癌的发生发展过程中发挥促癌作用。     

食管鳞癌TP53基因突变及其瘤内异质性分析

目的 探讨食管鳞癌瘤内多个取材位点中TP53基因突变异质性状态及其与临床病理特征的相关性。 方法 对食管鳞癌原发肿瘤及其配对的手术切端组织,采用聚合酶链式反应(PCR)法和直接测序法检测TP53基因第2～11号外显子突变状态,评估各病例瘤灶内4个不同位点TP53基因突变与临床病理参数的相关性及其在瘤内的异质性。 结果 在30例被测食管鳞癌肿瘤中,发现18例患者存在TP53基因突变,占60%(18/30)。16例为点突变,其中3例为无义突变,13例为错义突变;另2例为导致移码的缺失突变。大部分突变集中于TP53基因5～8号外显子,其中5号外显子的突变率最高,为23.3%(7/18)。在2例肿瘤中检测到第282位密码子突变(R282W),3例检测到第175位密码子突变(R175H)。观察每例肿瘤各位点突变等位基因峰高与正常等位基因峰高之比(relative intensity,RI值),发现在有点突变的16例中,12例的4个肿瘤位点的RI之间存在很大差异,其余4例瘤内各位点RI值也不一致。 结论 食管鳞癌存在较高频率的TP53基因突变,而且每例肿瘤均存在不同程度的瘤内异质性。      

肾上腺素和去甲肾上腺素治疗非静脉曲张性上消化道出血疗效和安全性的Meta分析

目的 系统评价肾上腺素注射和去甲肾上腺素喷洒对于非静脉曲张性上消化道出血的疗效和安全性。方法 计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、CNKI、CBM、维普、万方数据库,检索时限为建库至 2018年 12月,搜集肾上腺素注射和去甲肾上腺素喷洒治疗上消化道出血的相关临床研究,同时对纳入研究的参考文献进行回溯补充。由 2 位研究者独立进行文献筛选、资料提取、纳入研究偏倚风险评价,采用 RevMan 5.3 软件进行 Meta 分析,并按照推荐分级的评估、制定与评价（GRADE）系统进行证据质量评价。结果 最终纳入10项研究,包含884例受试者。Meta 分析结果显示肾上腺素注射治疗非静脉曲张性上消化道出血在以下4方面均优于去甲肾上腺素喷洒治疗：有效率（RR=1.21,95%CI：1.12~1.30,P＜0.001）;一周再出血率（RR=0.28,95%CI：0.17~0.45,P＜0.001）;即时止血率（RR=1.38,95%CI：1.25~1.52,P＜0.001）;急诊手术率（RR=0.35,95%CI：0.19~0.63,P＜0.001）,差异均有统计学意义。结论 肾上腺素注射治疗非静脉曲张性上消化道出血疗效与安全性明显优于去甲肾上腺素喷洒治疗。     

食管鳞癌中SERPINB5表达降低的作用机制及其临床意义

目的：探索SERPINB5在食管鳞癌中的表达变化、作用机制及其临床意义。方法：利用癌症基因组图谱（TCGA）和基因表达库（GEO）数据库的RNA表达数据、以及临床标本的Western blot分析,研究食管鳞癌组织中SERPINB5的mRNA和蛋白表达情况,并分析其表达水平与临床病理指标的相关性;通过细胞增殖和克隆形成实验,设置亲本组、空载组和SERPINB5过表达组,在体外检测SERPINB5对食管癌细胞增殖的影响;通过裸鼠移植瘤实验,设置空载组和SERPINB5过表达组,在体内检测SERPINB5对食管鳞癌细胞成瘤能力的影响;利用Western blot检测该分子调控的下游通路及关键分子;进一步利用靶向抑制实验,探讨SERPINB5对食管鳞癌治疗的可能意义。结果：与正常食管上皮相比,食管鳞癌组织中SERPINB5的mRNA和蛋白水平均明显降低（P<0.01）,且其mRNA低表达与肿瘤低分化（P=0.004）和较晚的分期（P=0.037）显著相关。体外及体内实验结果显示,与对照组比较,SERPINB5过表达可显著降低食管鳞癌细胞的增殖和集落形成、以及裸鼠成瘤能力（P<0.05）。分子水平检测表明,过表达SERPINB5显著降低AKT和mTOR的磷酸化水平。通过靶向抑制实验,观察到SERPINB5过表达可显著增强食管鳞癌细胞对Aurora A抑制剂Alisertib和mTOR抑制剂Everolimus的敏感性（P<0.01）。结论：SERPINB5在食管鳞癌中的表达降低,提高SERPINB5的表达水平,尤其是与Aurora A或mTOR抑制剂的联合使用,可作为食管鳞癌潜在的治疗策略。