重组人皮肤模型在化妆品皮肤刺激性评价中的应用研究

目的 探讨重组人皮肤模型应用于化妆品体外皮肤刺激性评价的可行性.方法 以重组人皮肤模型(EpiSkinTM)为受试模型,在对10个已知刺激性分类的标准化学品进行方法验证的基础上,再根据化妆品的使用特性对23个产品进行皮肤刺激性分类评价,其中6个基础型化妆品和10个美容型化妆品暴露18 h、7个清洁型化妆品分别暴露18、...     

金属硫蛋白在细菌脂多糖引发肝脏损伤中的作用

目的探讨金属硫蛋白(Metallothionein,MT)对细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)引起的肝脏损伤的影响及其可能机制。方法利用MT基因敲除(MT-/-)小鼠及与之对应的野生型(MT / )小鼠腹腔注射LPS(10 mg/kg)造成急性肝损伤模型,通过测定不同时间点血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活力,肝脏丙二醛(MDA)含量,以及肝脏组织病理学检查结果,判断LPS对两种小鼠肝脏损伤程度的差异。结果LPS可以使两种小鼠血清酶ALT、AST活力均呈时间依赖性升高,肝脏内脂质过氧化产物增加。组织病理学检查显示,肝脏出现肝细胞浊肿,空泡变性,液化坏死,星状细胞增生。MT / 小鼠血清ALT,AST升高趋势较MT-/-小鼠更为显著。炎症反应早期MT-/-小鼠肝组织内炎性细胞浸润程度轻于MT / 小鼠,随炎症反应时间延长,MT-/-小鼠较MT / 小鼠肝组织损伤程度呈加重趋势。LPS致MT-/-小鼠肝脏脂质过氧化程度较MT / 小鼠更为严重。结论MT对LPS引起的肝脏损伤具有一定的保护作用,其可能机制与MT增强机体清除LPS能力以及对LPS致炎过程中生成的ROS的清除作用有关。     

硫辛酸延缓衰老作用的研究进展

简要分析硫辛酸的一般理化及毒理学特点,并从改善老年机体的氧化状态和线粒体的氧化状态以及代谢酶活性两方面阐述了硫辛酸延缓衰老作用的研究进展。     

α-硫辛酸大鼠90d喂养实验研究

[目的]观察大鼠经α-硫辛酸（α-lipoicacid,’ALA）较长期喂养后,对其毒作用特征及所作用的靶器官,并初步确定未观察到有害作用的最大剂量（NOAEL）。[方法]取Sprague—Dawley大鼠96只,按体重随机分成4组,雌雄各半,分别给予实验组动物180、90、45mg／kg的ALA与1％羧甲基纤维素钠（CMC—Na）混悬液,对照组即给予1％CMC—Na。[结果]给予ALA90d后,180mg／kgALA组雌性大鼠出现较明显的中毒体征,死亡动物多达5只,谷丙转氨酶及谷草转氨酶与对照组相比升高2倍以上,提示肝细胞损伤;病理组织学同时显示,180mg／kgALA组部分雌性大鼠的肝脏出现不同程度的病变。染毒第4周开始,90、180mg／kgALA组雄性大鼠的体重出现明显下降。除此以外,各组雄性大鼠和对照组及45、90mg／kgALA组雌性大鼠血常规、肝功能、肾功能、脏器系数、病理组织学检查均未见异常。[结论]ALA的可能作用靶器官为雌性大鼠的肝脏。ALA大鼠90d喂养实验的NOAEL雌雄均为90mg／kg。     

蔗糖喂饲GK大鼠和Wistar大鼠致胰腺病理结构的改变

[目的]观察蔗糖喂饲Goto-Kakizaki（GK）大鼠和Wistar大鼠致胰腺病理结构及超微结构的改变。[方法][GK和Wistar大鼠各26只,随机分为（1）Wistar（W）组;（2）Wistar＋30%蔗糖（WS）组;（3）GK（G）组;（4）GK＋30%蔗糖（GS）组。WS、GS组给予30%蔗糖饮水,另两组给予正常饮水。实验第6周结束时处死动物,分离胰腺,采用组织化学染色法及电镜技术对其组织结构改变进行观察。[结果]给予30%蔗糖饮水后,Wistar大鼠胰岛出现一定程度的纤维化,胰岛β细胞数量显著下降,细胞核出现不规则变形,细胞内分泌颗粒明显减少,线粒体出现空泡变性;与Wistar大鼠相比,GK大鼠给予30%蔗糖饮水后胰岛组织出现严重的纤维化病变,胰岛β细胞仅零星可见,细胞核出现固缩,细胞内分泌颗粒大量减少,线粒体严重空泡变,并出现嵴溶解和嵴断裂,胰岛组织出现更为严重的病理改变。[结论]高蔗糖摄入可引起或加重GK和Wistar大鼠胰腺的病理性损伤,提示30%蔗糖喂饲GK大鼠可以用作非肥胖型糖尿病胰腺病变动物模型的优先品种。     

微囊藻毒素诱导细胞凋亡和促进肿瘤发生的双重作用研究进展

微囊藻毒素（Microcystin）是世界各地水华中存在最普遍、危害最严重的一类藻类毒素,对环境和人类健康具有极大的危害性。以往研究表明,微囊藻毒素作为一种特异性的肝脏毒素,对细胞内蛋白磷酸酶具有强烈的抑制作用,表现为诱导细胞凋亡和促进肿瘤发生的双重毒性效应。本文简要综述报道微囊藻毒素诱导细胞凋亡和促进肿瘤生成双重毒性作用的研究进展。     

流式细胞术检测体外微核方法的建立

目的 探讨基于流式细胞术(FCM)和细胞高内涵筛选技术(HCS)的两种高通量体外微核试验方法应用于化学品遗传毒性评价的可行性。方法 参考经济合作与发展组织(OECD)TG487推荐的程序方法,采用化学品遗传毒性评价的典型阳性剂环磷酰胺(CP)、丝裂霉素C(MMC)为受试物,CP剂量范围为5~20 mg/L,MMC剂量范围为0.25~1.0 mg/L,分别设3个剂量组,短时处理(4 h)体外培养的CHL细胞模型,分别建立基于FCM和HCS的高通量体外微核测试方法。平行采用传统胞质分裂阻断微核法,在加/不加代谢活化系统条件下,检测各剂量组细胞的微核形成情况,并分析微核细胞率。实验同步设置阴性对照组(无血清MEM培养液)。结果 经常规人工显微镜阅片和高通量方法的FCM及HCS得到的CP、MMC体外微核试验结果均为阳性：经CP诱导产生的微核细胞率(CP浓度由低到高)依次为1.9%、7.6%、10.4%(人工阅片),2.8%、2.6%、7.8%(FCM),2.8%、6.2%、9.1%(HCS);经MMC诱导产生的微核细胞率(MMC浓度由低到高)依次为5.9%、11.4%、16.7%(人工阅片),3.2%、3.7%、5.1%(FCM),7.9%、10.1%、10.2%(HCS)。受试物各剂量组与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P < 0.05),且呈现剂量-反应关系。结论 在本试验条件下,流式细胞术、高内涵体外微核检测的方法与传统人工阅片的方法得到的检测结果均一致,提示体外微核高通量方法可以实现细胞微核形成的自动化检测,提高检测效率,可为将高通量体外微核测试方法纳入化学品遗传毒性评价相关标准提供数据支持。     

高糖暴露对小鼠脑微血管内皮细胞通透性的影响

【目的】探讨高糖暴露对脑微血管内皮细胞通透性的影响。【方法】选取小鼠脑微血管内皮细胞系(bEnd.3)作为研究模型,检测跨内皮细胞电阻值(TEER)、碱性磷酸酶(ALP)及γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)的活性,对细胞模型的血脑屏障特征进行鉴定;再通过细胞形态学、细胞活力、细胞内乳酸脱氢酶活性及ZO-1、Occludin基因相对表达量的变化评价高糖暴露对脑微血管内皮细胞通透性的影响。【结果】细胞的TEER值、ALP及γ-GT的活性随细胞培养时间的增加而逐渐升高;细胞形态学结果显示,高糖作用下细胞数目明显减少,贴壁不稳;细胞活力实验显示,经葡萄糖暴露处理后,受试细胞活力呈剂量和时间依赖性降低;随着葡萄糖暴露浓度的增高,细胞内乳酸脱氢酶活性逐渐增高,各剂量组差异均有统计学意义(P<0.05)。此外,对紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的mRNA表达水平进行检测发现,高糖暴露可抑制ZO-1、Occludin基因的表达,且表达水平呈剂量依赖性降低。【结论】体外培养的bEnd.3细胞模型具有血脑屏障的特征,高糖暴露能够抑制紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达,该结果可能与脑微血管内皮细胞通透性的改变有关。     

基于重组人角膜模型SkinEthicTM的化学品眼刺激性体外替代方法研究

目的 建立重组人角膜模型SkinEthicTM体外替代方法并探讨其用于化学品眼刺激性评价的预测能力。方法 选取11种已知刺激性分类的标准化学品（包括5种固体化学品和6种液体化学品;涵盖不同溶解度、含自身颜色反应以及与MTT发生直接还原反应的化学品）,采用重组人角膜模型SkinEthicTM评估其作为体外眼刺激性替代方法的可行性。以MTT法测定细胞活性作为检测终点,设置相对细胞存活率50%（固体）或60%（液体）为判定依据来预测刺激性和非刺激性。结果 11种已知刺激性分类的化学品经重组人角膜模型测试,其中7种被正确评价为刺激性物质（3种固体和4种液体）,4种被评价为非刺激性物质（2种固体和2种液体）。评价方法在灵敏度与特异性方面均表现良好,可区分无危险性分类和具有潜在风险性（严重眼损伤/眼刺激性）的化学品,得到的分类结果和UN GHS分类结果一致。结论 基于重组人角膜模型SkinEthicTM的眼刺激性体外替代方法可用于快速预测和评价无危险性分类和严重眼损伤/眼刺激性化学物质。     

洋茉莉醛遗传毒性的实验研究

[目的]评价洋茉莉醛的遗传毒性。[方法]应用果蝇伴性隐性致死试验（sex-linked recessive lethal,SLRL）及小鼠骨髓微核试验对洋茉莉醛进行遗传毒性评价。[结果]与对照组相比,不同剂量染毒组对果蝇的诱发突变率差异均无统计学意义（P〉0.05）;与对照组相比,不同剂量染毒组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率差异均无统计学意义（P〉0.05）。[结论]本实验结果提示洋茉莉醛无致突变作用。