大黄素通过调节miR-582-3p影响MAP3K1活性抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡[1]

目的:探究大黄素通过microRNA (miR)-582-3p/MAP3K1对乳腺癌细胞增殖、凋亡的作用及分子机制。方法:检测大黄素及miR-582-3p异常表达对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响。qRT-PCR检测miR-582-3p及MAP3K1的表达。MTT检测乳腺癌细胞增殖,流式细胞术和TUNEL实验检测细胞凋亡。western blot检测增殖标志蛋白Ki-67及凋亡标志蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3在癌细胞中的表达水平。结果:大黄素可以抑制乳腺癌细胞MCF-7及MDA-MB-231的增殖能力及促进凋亡。western blot结果显示大黄素会抑制细胞中Ki-67及Bcl-2的表达并促进Caspase-3 (cleaved)及Bax的表达。大黄素处理乳腺癌细胞后miR-582-3p的表达显著下调。过表达miR-582-3p会下调大黄素对乳腺癌细胞生物学活性的影响。大黄素还会通过miR-583-3p调节癌细胞中MAP3K1的表达。结论:大黄素通过调节miR-582-3p影响MAP3K1活性抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡。     

臭椿酮对非小细胞肺癌H460的作用和机制研究

目的 探究臭椿酮（ailanthone）抗非小细胞肺癌的作用及分子机制。 方法 CCK8检测ailanthone对H460非小细胞肺癌增殖的影响;Cultrex细胞迁移和侵袭法检测ailanthone对细胞迁移和侵袭的作用;细胞免疫荧光检测ailanthone对cyclin d1表达的影响;WB检测ailanthone对细胞蛋白激酶B（Akt）、蛋白酪氨酸激酶Src磷酸化和细胞周期蛋白D1（cyclin d1）蛋白表达的影响。结果 CCK8结果表明,于对照组相比,不同浓度（0.2、0.4、0.6、0.8和1.0μM）的ailanthone处理下H460细胞的增殖能力明显受抑制（P<0.05或P<0.001）;Cultrex 96孔细胞迁移法检测结果显示,于对照组（1.00±0.07）相比,ailanthone组（0.35±0.03,P＜0.01）明显抑制细胞迁移;Cultrex BME细胞侵袭法表明,ailanthone组（0.27 ± 0.04,P＜0.001）与对照组（1.00 ± 0.07）比明显抑制细胞侵袭;细胞免疫荧光实验显示,ailanthone处理细胞（14.67 ±1.20,P＜0.001）与对照组（50.00 ±1.73）比,明显抑制了Cyclin d1阳性细胞数;WB结果显示,H460细胞在ailanthone处理后Akt和Src的磷酸化明显降低,同时cyclin d1的表达明显下降。结论 ailanthone抑制非小细胞肺癌H460的增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能是抑制Akt的磷酸化抑制细胞的迁移和侵袭,同时抑制Src的磷酸化抑制细胞周期相关蛋白cyclin d1的表达。     

大豆皂苷调控miR-584-5p/HDAC1通路对子宫内膜癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究大豆皂苷调控微小RNA-584?5p（microRNA-584?5p，miR-584?5p）/组蛋白去乙酰化酶1（histone deacetylase1，HDAC1）通路对子宫内膜癌（endometrial cancer，EC）细胞增殖及凋亡的影响。方法 以终浓度0μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、120μg/ml、160μg/ml的大豆皂苷处理体外培养的人EC细胞系HEC-1-A，以细胞计数试剂盒8（cell counting Kit-8，CCK-8）法测定各浓度处理后的细胞活力，计算半数抑制浓度（half maximal inhibitory concentration，IC50）。将对数生长期的HEC-1-A细胞随机分为对照组、大豆皂苷组、miR-584-5p抑制剂组、大豆皂苷+miR-584-5p抑制剂组、大豆皂苷+miR-584-5p抑制剂阴性对照组，分组转染及用药处理后，以CCK-8法测定各组细胞活力；以流式细胞实验检测各组细胞凋亡率；以免疫印迹实验检测各组细胞HDAC1蛋白、增殖相关蛋白增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）及凋亡相关蛋白[天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9（cysteine-containing aspartate-specific proteases 9，caspase-9）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（B-cell lymphoma-2-associated X protein，Bax）]表达；以实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR，qRT-PCR）实验检测各组细胞miR-584-5p与HDAC1 mRNA表达。结果 不同浓度大豆皂苷可抑制HEC-1-A细胞生长，IC50为98.56μg/ml。与对照组相比，大豆皂苷组与大豆皂苷+miR-584-5p抑制剂阴性对照组的细胞活力、PCNA蛋白表达、HDAC1 mRNA及蛋白表达降低（P<0.05），凋亡率、caspase-9及Bax蛋白表达、miR-584-5p表达增高（P<0.05）；miR-584-5p抑制剂组的细胞各指标与大豆皂苷组相反。miR-584-5p抑制剂可减弱大豆皂苷对细胞各指标的作用。结论 大豆皂苷可上调miR-584-5p表达，下调HDAC1表达，促使EC细胞凋亡，抑制其增殖。