腺病毒siRNA抑制RhoA基因并联合TNF-α诱导肝癌细胞凋亡的研究

目的建立RhoA基因的腺病毒siRNA系统,并联合TNF-α诱导肝癌细胞凋亡,分析RhoA在肿瘤细胞中的功能和作用。方法用已构建的RhoA干扰质粒构建RhoA的腺病毒siRNA系统,筛选重组病毒并感染HepG2细胞,应用Western blot和RT-PCR检测RhoA蛋白表达和基因表达水平。感染Ad-siRNA-RhoA腺病毒的肝癌细胞用TNF-α诱导后进行MTT以及细胞内DNA片段化检测。结果成功构建RhoA基因的siRNA腺病毒系统。用重组病毒感染肝癌细胞,RhoA蛋白表达抑制率为76.48%;RhoA基因的mRNA转录水平降低74.46%。MTT检测显示,感染腺病毒Ad-U6-control对照组以及感染腺病毒Ad-siRNA-RhoA实验组的细胞A值差异无统计学意义(F=5.41,P>0.01),即利用siRNA抑制肝癌细胞中RhoA表达,肿瘤细胞凋亡不明显。TUNEL检测显示,RhoA腺病毒siRNA联合TNF-α致肿瘤细胞凋亡作用显著。结论构建的腺病毒siRNA载体系统能抑制目的基因RhoA的表达,联合TNF-α能抑制肿瘤细胞生长和增殖并诱导肿瘤细胞凋亡,为肿瘤基因功能的基础研究和肿瘤基因治疗打下了实验基础。     

柠檬醛对烟曲霉色素及关键基因alb1 mRNA表达的影响

目的研究柠檬醛对烟曲霉色素及其关键基因alb1 mRNA表达的影响。方法观察烟曲霉在含不同浓度柠檬醛的蔡氏固体培养基中的生长情况;RT-PCR检测药物作用后alb1基因mRNA表达的变化。结果在蔡氏固体培养基上随着柠檬醛浓度的增加,菌苔逐渐变稀、薄且烟绿色色素逐渐变淡,甚至白化;柠檬醛对alb1基因表达有明显的抑制作用,随着药物浓度的降低这种抑制作用亦相应呈现不同程度的减弱。结论烟曲霉缺失烟绿色色素可能与alb1 mRNA的表达抑制有关。     

厌氧菌介导的肿瘤靶向自杀基因系统对鼠黑色素瘤B16-F10细胞的杀伤作用研究

目的 构建婴儿双歧杆菌介导的胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)肿瘤基因治疗系统,探讨该系统对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10的体外杀伤效应.方法 构建重组质粒pGEX-CD,以电穿孔法转化婴儿双歧杆菌,筛选阳性克隆菌,然后加入5-FC厌氧培养,24 h后取其上清液,作用于小鼠黑色素瘤B16-F10细胞,采用MTT法检测细胞存活率,并观察细胞形态学改变.结果 成功构建出婴儿双歧杆菌介导的CD/5-FC肿瘤基因治疗系统.与空白对照组和pGEX组相比,CD组肿瘤细胞发生了明显的形态学改变,细胞存活率明显降低.结论 婴儿双歧杆菌介导的CD/5-FC系统对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞具有明显的体外杀伤效应.     

厌氧菌介导的CD/5-FC系统对鼠黑色素瘤的杀伤效应

目的 构建婴儿双歧杆菌介导的CD/5-FC肿瘤基因治疗系统,探讨该系统对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10的体外杀伤效应. 方法 构建重组质粒pGEX-CD,以电穿孔法转化婴儿双歧杆菌,筛选阳性克隆菌,然后加入5-FC厌氧培养,24h后取其上清,作用于小鼠黑色素瘤B16-F10细胞,采用MTT法检测细胞存活率,并观察细胞形态学改变. 结果 成功构建出婴儿双歧杆菌介导的CD/5-FC肿瘤基因治疗系统.与对照组和pGEX组相比,CD组的肿瘤细胞发生了明显的形态学改变,细胞存活率明显降低. 结论 婴儿双歧杆菌介导的CD/5-FC系统对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞具有明显的体外杀伤效应.     

两种宫内节育器临床效果比较

1 临床资料 一般资料:选择2008年2月至2009年7月,来院做人流术的妇女268例.年龄19～40岁,平均年龄29.5岁,妊娠6周～11周,平均8.5周.术前均做妇科检查,排除性传播疾病、盆腔感染、宫颈炎和阴道炎等.     

抑制 RhoA 基因表达诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究

目的：探讨抑制RhoA基因表达诱导乳腺癌（ BC）细胞凋亡的作用。方法通过已建立的RhoA腺病毒载体系统,感染BC MCF -7细胞。经过细胞培养、病毒滴度等,将收集的样本分别用Western blot、RT-PCR技术检测RhoA 蛋白表达和基因表达变化;对感染Adsi RNA-RhoA的BC 细胞进行MTT检测及细胞内DNA片段化检测。结果腺病毒siRNA-RhoA感染BC细胞能明显抑制RhoA基因表达（抑制率为75．64％）,降低RhoA基因的mRNA转录水平69．44％。 MTT检测结果表明,感染腺病毒Adsi RNA-RhoA组的肿瘤细胞生长、增殖被明显抑制。 TUNEL检测显示,抑制RhoA基因表达能明显导致BC细胞凋亡。结论利用siRNA抑制BC细胞中RhoA基因表达,能诱导BC细胞凋亡。     

PBL教学模式初探

PBL教学模式与传统的以学科为基础、以教师为中心、学生被动学习的"填鸭式"教学方式截然不同。它具有以问题为基础、以学生为中心、教师为引导、学生自主学习的教学特点。它强调把学习设置于复杂的、有意义的问题情境中,通过让学习     

以病理生理学为切入点在机能学教学中开展设计性实验的探索

设计性实验是机能学实验中最重要的一个阶段,是一种模拟科研过程,由学生自行选题、大胆设计及探索研究的实验教学项目。以病理生理学为切入点,在2006级临床本科尝试开出的机能学设计性实验,结果表明通过设计性实验的开展有助于学生综合素质的培养和创新能力的提高,是未来机能学实验教学改革的重点。     

食管癌预后生物学指标的研究现状

食管癌是我国最常见的恶性肿瘤之一.早期食管癌患者5a生存率可达90%以上,而中晚期癌仅7%～15%左右.     

铜绿假单胞菌藻酸盐的研究进展

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)又称绿脓杆菌,属条件致病菌,广泛分布于自然界及正常人的皮肤、肠道和呼吸道。铜绿假单胞菌是非发酵菌中最具临床意义的细菌,也是临床标本中最多见的假单胞菌。目前铜绿假单胞菌感染是各种医院内感染中最广泛、最严重的问题之一[1]。由