吉西他滨对白血病细胞系HL-60细胞的抑制作用

目的观察吉西他滨对HL-60细胞增殖、凋亡及C-myc蛋白表达的影响,探讨吉西他滨对白血病细胞的作用及其与c-myc间的关系,为其作为新的抗白血病药物提供实验依据。方法体外培养HL-60细胞,吉西他滨及阿糖胞苷处理细胞0、24、48、72 h后倒置显微镜下观察细胞生长状态及形态学改变;锥虫蓝拒染法计数活细胞,计算细胞存活率,观察吉西他滨对细胞生长的影响;应用流式细胞仪进行细胞周期分析、检测凋亡率;免疫组织化学染色法检测C-myc蛋白表达改变。结果24 h时不同质量浓度吉西他滨组均显著抑制细胞存活,随药物质量浓度增加存活率减小,各组间比较有显著性差异（P〈0.01）;各组随作用时间延长存活率降低,在48、72 h抑制作用显著强于24 h;G0/G1期细胞比例升高而S期细胞比例降低,细胞阻滞在G0/G1期;凋亡率为（17.4 f1±4.88）%,较空白组（4.29±3.07）%和阿糖胞苷对照组（8.16±3.43）%显著升高（Pa〈0.01）;免疫组织化学染色示吉西他滨组C-myc蛋白在细胞中表达阳性平均积分为42.00±8.54,较空白组（248.33±20.74）和阿糖胞苷组（102.67±12.06）显著降低（Pa〈0.01）。结论吉西他滨对HL-60细胞生长及C-myc蛋白表达有明显抑制作用;能使细胞周期发生重新分布,将细胞阻滞在G0/G1期,从而抑制细胞增殖,并可诱导白血病细胞凋亡;在抑制HL-60细胞增殖、诱导其凋亡及抑制C-myc表达方面,吉西他滨的作用显著强于相同剂量的阿糖胞苷,有望成为新药物用于白血病的治疗。     

伊马替尼与干扰素联合治疗慢性粒细胞白血病的疗效分析

目的:探讨伊马替尼与干扰素联合化疗治疗慢性粒细胞白血病(CM L)的疗效。方法:2004年6月—2009年7月新诊断的58例Ph染色体阳性CM L慢性期患者,随机分为伊马替尼组和干扰素联合化疗组,比较两组临床疗效。结果:两组总有效率差异无统计学意义(P>0.05);伊马替尼组完全血液学缓解率,完全细胞遗传学缓解率、完全分子学效应率、5年总生存率均明显高于干扰素联合化疗组(P<0.05)。结论:伊马替尼和干扰素联合化疗都可作为CM L慢性期的有效治疗方法,应依据不同情况实施个体化治疗。     

来那度胺辅助常规药物治疗多发性骨髓瘤患者的效果观察

目的:探讨来那度胺辅助常规药物治疗多发性骨髓瘤患者的效果及其对免疫因子、血管新生能力的影响.方法:选取80例多发性骨髓瘤患者,随机分为对照组40例给予硼替佐米联合地塞米松,观察组40例在对照组治疗基础上增加来那度胺.2个月后,对比两组患者临床疗效,以流式细胞仪检测免疫因子,以全自动生化分析仪检测血管新生能力,以酶联免疫分析法检测血清生化指标.结果:观察组总缓解率大于对照,观察组CD4+/CD8+、CD3+、CD4+水平均大于对照组,观察组血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、肝癌衍生长因子、β2-微球蛋白、血清白蛋白、血清肌酐尿素氮水平均小于对照组(P<0.05).结论:来那度胺辅助常规药物治疗多发性骨髓瘤患者效果确切,能够抑制血管生成,改善免疫功能及肝肾功能.     

原发性抗磷脂综合征长期误诊一例并文献复习

目的 分析原发性抗磷脂综合征(primary antiphospholipid syndrome,PAPS)的误诊原因,探讨其临床特点及诊治要点.方法 对我院收治的1例以反复自发性流产为主要表现的PAPS的临床资料进行回顾性分析.结果 本例因停经20周,发现无胎心、胎动4d入院,行彩超检查诊断为死胎.既往自然流产6次,均伴有血小板减低,考虑再生障碍性贫血.行肝功能、骨髓穿刺等检查结合酶联免疫法测定抗心磷脂抗体(ACA)(+++),确诊为PAPS.本例误诊时间长达7年,目前仍在随访中.结论 PAPS临床少见,易误诊.患者出现反复的动静脉血栓形成、习惯性流产或死胎及血小板减少等临床表现时,行ACA检测有助于及早诊断并治疗本病.     

糖皮质激素联合根除幽门螺杆菌治疗IT P的疗效观察

目的 探讨糖皮质激素联合根除幽门螺杆菌(HP)治疗特发性血小板减少性紫癜(ITP)的临床疗效 ,以及对血小板计数和T细胞亚群的影响.方法 将94例HP阳性的ITP患者分为两组 ,每组47例.对照组给予泼尼松治疗 ;观察组给予泼尼松联合根除 HP治疗 ,观察两组患者的临床疗效及1年内复发率 ,并检测治疗前、后血小板计数和 T细胞亚群变化情况.结果观察组治疗的总有效率为89 .36% ,对照组为70 .21% ;观察组1年的复发率为36 .17% ,对照组为72 .34% ,两组比较均差异有统计学意义(P＜0 .05).两组患者治疗后血小板计数均明显升高 ,血小板相关抗体(PAIgG)水平均明显降低 ,但观察组改善更明显(P＜0 .05).两组患者治疗后CD3+CD4+ % 均明显升高 ,CD3+CD8+ % 均明显降低 ,但观察组改善更明显(P＜0 .05).结论 糖皮质激素联合根除 HP治疗ITP临床疗效确切 ,能够提高血小板计数 ,改善T细胞亚群比例失调 ,值得临床推广.     

盐酸吉西他滨对K562细胞增殖、凋亡及bcr/abl mRNA表达的影响

目的 观察盐酸吉西他滨对K562细胞增殖、凋亡及bcr/abl基因表达的影响,探讨盐酸吉西他滨用于慢性粒细胞白血病急变期治疗的可行性. 方法 采用水溶性四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测盐酸吉西他滨对K562细胞增殖的影响,采用凋亡的原位酶标记检测(TUNEL)法检测盐酸吉西他滨对K562细胞凋亡的影响,采用半定量RT-PCR技术检测盐酸吉西他滨作用于K562细胞后bcr/abl融合基因mRNA表达变化. 结果 0.1 mg/L、1.0 mg/L 、10.0 mg/L盐酸吉西他滨分别作用K562细胞12 h、24 h、48 h、72 h 后,K562细胞增殖受到抑制,抑制作用随质量浓度及时间增加而增强,但48 h和72 h比较无显著性差异,10.0 mg/L吉西他滨组作用K562细胞48 h抑制率达(29.3±0.008)%.吉西他滨组对K562细胞的抑制作用明显强于同质量浓度同时间的阿糖胞苷组,二者比较有显著性差异(P<0.01).TUNEL实验结果 显示10.0 mg/L吉西他滨作用于K562细胞48 h,凋亡率为15.3%,明显高于阿糖胞苷组 3.7%(P<0.05)和空白对照组2.0%(P<0.05).RT-PCR结果 显示10 mg/L吉西他滨作用48 h对K562细胞bcr/abl融合基因mRNA的表达有明显抑制作用,与同剂量阿糖胞苷组比较无显著性差异.结论 盐酸吉西他滨对K562细胞有一定的增殖抑制及促凋亡作用,且具有剂量和时间依赖性.10 mg/L吉西他滨能够明显下调慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因mRNA表达,有望联合应用于慢性粒细胞白血病急变期的治疗.     

吉西他滨对HL-60细胞c-myc基因表达的影响及其诱导细胞凋亡作用

本研究探讨吉西他滨对HL-60细胞c-myc基因表达及细胞凋亡的影响及吉西他滨应用于白血病治疗的可行性。体外培养人白血病细胞系HL-60细胞,以不同浓度吉西他滨作用于HL-60细胞,用RT-PCR方法检测细胞c-myc mRNA表达的变化;以Western blot方法检测细胞C-MYC蛋白表达水平;原位酶标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡情况。结果表明,1.0μg/ml吉西他滨作用于HL-60细胞12、24、36、48小时后,不同程度地抑制HL-60细胞c-myc mRNA的表达,并具有时间依赖性,其最适作用时间为24小时,与阿糖胞苷(Ara-C)组及空白对照组比较,抑制作用差异有统计学意义(p0.05)。1.0μg/ml吉西他滨作用于HL-60细胞24、48、72小时后,C-MYC蛋白表达水平明显下降,于48小时抑制作用最明显,抑制率为94.16%,方差分析显示,各时间点吉西他滨组与空白对照组和Ara-C组比较,差异均有统计学意义(p0.01);吉西他滨作用24小时组、48小时组及72小时组组间比较,也有显著性差异(p0.01)。1.0μg/ml吉西他滨作用于HL-60细胞24小时后,出现明显的诱导细胞凋亡作用,阳性率83.67%,与空白对照组(阳性率3.00%)和Ara-C组(阳性率10.67%)比较差异均有统计学意义(p0.01)。结论:吉西他滨对HL-60细胞c-myc基因及C-MYC蛋白表达有显著的抑制作用,能够诱导HL-60细胞凋亡,其抑制及诱导凋亡作用强于阿糖胞苷,提示吉西他滨可能作为白血病治疗的新选择。     

伊马替尼与干扰素联合治疗慢性粒细胞白血病的疗效分析

目的：探讨伊马替尼与干扰素联合化疗治疗慢性粒细胞白血病（CML）的疗效。方法：2004年6月-2009年7月新诊断的58例Ph染色体阳性CML慢性期患者,随机分为伊马替尼组和干扰素联合化疗组,比较两组临床疗效。结果：两组总有效率差异无统计学意义（P〉0．05）;伊马替尼组完全血液学缓解率,完全细胞遗传学缓解率、完全分子学效应率、5年总生存率均明显高于干扰素联合化疗组（P〈0．05）。结论：伊马替尼和干扰素联合化疗都可作为CML慢性期的有效治疗方法,应依据不同情况实施个体化治疗。     

参芪扶正注射液联合环孢素A、安雄治疗慢性再生障碍性贫血

目的观察参芪扶正注射液联合环孢素A（CsA），安雄治疗慢性再生障碍性贫血（CAA）的疗效。方法将48例CAA患者随机分为两组，对照组22例，应用CsA、安雄；治疗组26例，在对照组基础上应用参芪扶正注射液。结果治疗结束后，治疗组外周血白细胞（WBC）、血红蛋白（Hgb）、血小板（Plt）、网织细胞计数（Ret）均有明显升高，与较治疗前和对照组比较均有显著性差异（P〈0．05）；治疗组骨髓增生程度及造血组织比例，较治疗前和对照组明显增加，均有显著性差异（P〈0．05）。结论参芪扶正注射液联合CsA、安雄可提高CAA的疗效。     

人端粒酶逆转录酶反义寡核苷酸联合顺铂对HL-60细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究人端粒酶逆转录酶基因反义寡核苷酸(ASODN)联合顺铂(CDDP)对HL-60细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用.方法:选用20 μmol/L ASODN和正义寡核苷酸(SODN)封闭HL-60细胞hTERT基因的表达,作用48 h后加用2.5 μmol/L,5 μmol/L CDDP,继续作用于HL-60细胞48 h;台盼蓝拒染法检测各组细胞的增殖抑制情况,姬姆萨染色后倒置显微镜观察凋亡细胞形态;分别采用流式细胞仪、TUNEL法检测细胞凋亡.结果:hTERT ASODN联合CDDP组HL-60细胞的增殖明显抑制,与hTERT SODN联合CDDP组、单用CDDP组比较差异有统计学意义(P<0.05);hTERT ASODN联合5 μmol/L CDDP与hTERT ASODN联合2.5 μmol/L CDDP比较差异有统计学意义(P<0.05);而SODN联合CDDP与单用CDDP比较,差异无统计学意义(P>0.05).姬姆萨染色后,hTERT ASODN联合CDDP组可见大量凋亡小体,而单用CDDP组仅见少量凋亡小体.流式结果与TUNEL结果一致:hTERT ASODN联合CDDP组对HL-60细胞具有明显诱导凋亡作用,同其余各组比较差异有统计学意义(P<0.05);而SODN联合CDDP组与单用CDDP组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论: hTERT ASODN联合低浓度CDDP能明显抑制HL-60细胞的增殖,并提高细胞凋亡率.