化瘀止痛贴膏调节IL-6/STAT3信号通路对急性软组织损伤大鼠炎症反应的影响

目的 探讨化瘀止痛贴膏调节白细胞介素-6（IL-6）/信号转导与转录激活子3（STAT3）信号通路对急性软组织损伤（ASTI）大鼠炎症反应的影响。方法 将SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组、化瘀止痛贴膏低、中、高剂量组、精制狗皮膏组。利用机械冲击挫伤法建立ASTI动物模型,建模成功后,各组贴敷相应药物,1次/d,每次给药8 h,连续7d。对大鼠进行ASTI损伤评分;采用血液流变检测仪检测血液流变学指标;苏木精和伊红（HE）染色法观察大鼠损伤部位肌肉组织病理变化;酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠损伤部位肌肉组织中IL-6、IL-β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测损伤部位肌肉组织中IL-6与STAT3 mRNA表达;蛋白免疫印迹（Western blot）法检测大鼠损伤部位肌肉组织中IL-6/STAT3信号通路蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠软组织损伤评分、全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、肌肉组织病理学评分、IL-6、IL-β、TNF-α水平、IL-6与STAT3 mRNA表达水平及IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平升高（均P＜0.05）;与模型组比较,化瘀止痛贴膏低、中、高剂量组和狗皮膏药组大鼠软组织损伤评分、全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、肌肉组织病理学评分、IL-6、IL-β、TNF-α水平、IL-6与STAT3 mRNA表达水平及IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平降低（均P＜0.05）;化瘀止痛贴膏高剂量组与精制狗皮膏组大鼠以上指标差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 化瘀止痛贴膏可能通过下调IL-6/STAT3信号通路缓解ASTI大鼠的炎症反应     

博落回根中生物碱的组织化学定位研究

目的建立激光显微切割结合HPLC-MS/MS技术测定博落回根不同组织中血根碱、原阿片碱、别隐品碱、白屈菜红碱、二氢白屈菜红碱和二氢血根碱的定量分析方法,开展博落回根的组织化学研究。方法利用激光显微切割技术将两年生不同生长期博落回根的木栓层、皮层、韧皮部、木质部维管束和木射线进行切割,HPLC-MS/MS对切割的组织进行目标生物碱的检测。结果 6种生物碱均有较宽的线性范围和良好的线性关系(r20.996 6);日内、日间精密度RSD均小于2.4%;检出限和定量限最高分别为0.29、0.57 ng/m L;重复性试验RSD均小于13.2%;加样回收率为85.1%~133.9%,RSD值为9.4%~20.7%。苗期根的上述5个组织中6种生物碱的总量分别为0.14、0.10、0.07、0.16、0.11μg/mm2;花期分别为0.38、0.22、0.15、0.41、0.26μg/mm2;果期分别为0.46、0.29、0.27、0.55、0.22μg/mm2;果后期分别为0.52、0.29、0.24、0.41、0.23μg/mm2。结论基于激光显微切割和LC-MS/MS的组织中生物碱的定量分析方法分辨率高、专属性强、灵敏度好、准确可靠;博落回根中6种生物碱主要分布在木栓层和木质部维管束。     

基于异喹啉生物碱质谱裂解规律推断博落回茎中的生物碱

目的:快速分析博落回茎中的生物碱成分。方法:应用高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱对博落回茎的生物碱进行分析,根据一级质谱的分子离子和二级质谱的碎片离子,结合博落回中异喹啉类生物碱的质谱裂解规律,推断博落回茎中的生物碱结构。结果:从博落回茎中推断出11个生物碱的结构,分别为木兰箭毒碱(Magnocurarine,1),网脉番荔枝碱(Reticuline,2),金黄紫堇碱(Scoulerine,3),轮环藤酚碱(Cyclanoline,4),13-甲氧基小檗碱(13-methoxyberberine,5),四氢巴马丁(Tetrahydropalmatine,6),原阿片碱(Protopine,7),别隐品碱(Allocryptopine,8),N-甲基氢化小檗碱(N-methylcanadine,9),血根碱(Sanguinarine,10),白屈菜红碱(Chelerythrine,11),其中化合物1~6及9首次在博落回中报道。结论:经验证,基于异喹啉生物碱质谱裂解规律推断博落回茎中生物碱的方法可行。     

HPLC-Q-TOF/MS鉴定白屈菜中异喹啉类生物碱

目的:利用HPLC-Q-TOF/MS分析技术快速、系统地鉴定白屈菜中异喹啉类生物碱。方法:采用XAqua C8色谱柱(150 mm×2.1 mm,5μm);以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱;体积流量为0.3 m L·min-1;ESI源正离子模式检测。结合对照品的二级质谱及相关文献推测生物碱的结构。结果:从白屈菜的甲醇提取物中鉴定了18个生物碱,其中木兰箭毒碱(1)、北美黄连碱(4)、药根碱(12)、非洲防己碱(14)为首次在白屈菜中报道。结论:HPLC-Q-TOF/MS方法能快捷、准确地鉴定白屈菜中的化学成分,为白屈菜化学成分的进一步提取分离和药效物质基础的研究提供科学依据。