高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)与器官纤维化研究进展

高迁移率族蛋白B1(HMGB1)作为一种重要的晚期炎症因子和促炎因子,可以通过损伤/坏死细胞被动释放,也可由活化状态的细胞主动分泌至胞外介导炎症反应.一直以来,HMGB1在各种急慢性炎症中的作用研究备受关注.器官组织纤维化为持续慢性炎症的后期病理变化,近年来,HMGB1在各种器官纤维化中的作用研究越来越多.许多研究结果显示,HMGB1在肝、肺、肾、心脏等器官纤维化的发生发展中发挥重要作用.     

CLDN23基因在结肠癌中的临床意义和预后价值

摘要：目的?检测CLDN23基因在结肠癌中的表达情况，分析其临床意义和预后价值。方法?登录癌症基因图谱数据库(the cancer genome atlas，TCGA)下载结肠癌转录本测序数据和相应患者的临床病理资料，使用R 3.6.0软件提取并分析CLDN23基因在结肠癌中的表达情况。根据CLDN23基因在结肠癌患者中表达水平的中位值，将结肠癌患者分为高、低表达2组，使用卡方检验分析CLDN23基因表达与患者临床病理参数的关系，使用Log rank检验分析2组之间总体生存率的差异。利用单因素和多因素Cox回归分析CLDN23基因在结肠癌中的预后价值。结果?与正常组织相比，CLDN23基因在结肠癌组织中显著下调(P<0.001)。Log rank检验分析结果提示，低表达组患者的总体生存率较高表达组患者更低(P=0.018)。多因素Cox回归分析结果提示，CLDN23基因可作为结肠癌患者的独立预后因子(HR=1.47,95%CI:1.09～1.96,P=0.01)。结论?CLDN23基因在结肠癌组织中表达下调，与结肠癌恶性进展相关，可作为结肠癌的预后因子和潜在的分子标志物。     

耐药大肠埃希菌β-内酰胺酶基因检测与LAP-2型β-内酰胺酶分子对接研究

目的 检测20株耐药大肠埃希菌β-内酰胺酶基因,研究LAP-2型β-内酰胺酶分子对接情况,以了解LAP-2型β-内酰胺酶对11种β-内酰胺类药物水解活性.方法 22种β-内酰胺酶基因检测均为PCR法,在SWISS-MODEL利用PDB数据库作同源建模获得LAP-2型β-内酰胺酶的受体分子3D结构,使用ArgusLab4.1软件中的DOCK模块作11种β-内酰胺类药物和克拉维酸β-内酰胺酶抑制剂与LAP-2型β-内酰胺酶分子对接.结果 20株耐药大肠埃希菌中18株检出β-内酰胺酶基因,检出阳性率为90.0％,其中TEM阳性率50.0％,CTX-M-1群阳性率65.0％,LAP阳性率5.0％,LA T/CMY阳性率5.0％,OXA-1群阳性率25.0％;LAP-2型β-内酰胺酶催化效率最高的为阿莫西林.结论 11种β-内酰胺类药物和1种β-内酰胺酶抑制剂与LAP-2型β-内酰胺酶对接的结合自由能,阿莫西林、氨苄西林和头孢噻肟结合自由能下降为前3位.     

耐药大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶和16S rRNA甲基化酶基因的分析

目的：了解耐药大肠埃希菌（drug-resistant Escherichia coli,DR-ECO）氨基糖苷类修饰酶和16S rRNA甲基化酶基因的分布,探讨该菌对氨基糖苷类药物耐药的分子机制。方法：采用PCR法检测20株DR-ECO中15种氨基糖苷类修饰酶基因和7种16S rRNA甲基化酶基因,并用PCR直接全自动荧光法对阳性产物进行测序。结果：20株DR-ECO中,18株检出氨基糖苷类修饰酶基因;其中,aac（3）-Ⅱ、aac（6＇）-Ⅰb、ant（3″）-Ⅰ、aadA4/5和aph（3＇）-Ⅰ的阳性检出率分别为25%、25%、5%、65%和55%;只有1株检出rmtB型16S rRNA甲基化酶基因,阳性率为5%,其余基因型均未测出。结论：本组DR-ECO对氨基糖苷类药物的耐药主要与aadA4/5和aph（3＇）-Ⅰ等氨基糖苷类修饰酶基因相关,而与16S rRNA甲基化酶基因无明显关系。     

液相色谱串联质谱法分析血清中多囊卵巢综合征相关 甾体激素的性能评价

摘要：目的 建立液相色谱串联质谱法定量检测血清中 １７－α－羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸酯 的方法，并对其进行性能分析评价。方法 采用液相色谱串联质谱法定量检测血清中 １７－α－羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱 氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸酯的含量。根据《中国药典》（２０１５ 年版）通则中 ９０１２“生物样品定量分析方法验证指导原则”和 《液相色谱串联质谱临床检测方法的开发与验证》对所建方法的线性范围、检出限、精密度、样本稳定性、回收率和携带污染率 等基本性能进行确认。结果 液相色谱串联质谱法定量检测血清中 １７－α－羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、脱氢表 雄酮硫酸酯的线性范围分别为 ０．１６～ ４０ ｎｇ ／ ｍＬ、０．１６～ ４０ ｎｇ ／ ｍＬ、３２～ ８ ０００ ｐｇ ／ ｍＬ、０．１６～ ４０ ｎｇ ／ ｍＬ、２～ ５００ μｇ ／ ｄＬ，检出限分别 为０．００８ ｎｇ ／ ｍＬ、０．００８ ｎｇ ／ ｍＬ、０．００３ ２ ｎｇ ／ ｍＬ、０．００８ ｎｇ ／ ｍＬ、１ ｎｇ ／ ｍＬ，定量下限分别为 ０．０３２ ｎｇ ／ ｍＬ、０．０１６ ｎｇ ／ ｍＬ、０．００６ ４ ｎｇ ／ ｍＬ、 ０．０１６ ｎｇ ／ ｍＬ、４ ｎｇ ／ ｍＬ，批内变异系数（ＣＶ）和批间 ＣＶ 均小于 １５％，回收率分别为 ８９． ７９％ ～ １０１． ２３％、８７． ２３％ ～ ９８． ３３％、 ９１．３９％ ～ １０１．１０％、８６．９９％ ～ ９４．３０％、８６．３５％ ～ １０８．３５％。同时，血清中各激素在－２０ ℃ 保存条件下 ７ ｄ 内是稳定的。结论 建 立的液相色谱串联质谱法基本性能符合评价标准，能够灵敏且准确地检测血清中 １７－α－羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱氢表 雄酮和脱氢表雄酮硫酸酯的含量。     

离子交换色谱法检测尿液草酸根、磷酸根和枸橼酸根的性能评价

目的建立离子交换色谱法定量检测尿液草酸根、磷酸根和枸橼酸根的方法,并对其进行性能分析评价。方法采用离子交换色谱法定量检测尿液样本中草酸根、磷酸根和枸橼酸根含量。根据《中国药典》(2015年版)通则中9012"生物样品定量分析方法验证指导原则"对所建方法的线性范围、检出限、精密度、样本稳定性、回收率和携带污染率等基本性能进行确认。结果离子交换色谱法检测尿液草酸根、磷酸根和枸橼酸根的线性范围分别为0.5～50 mg/L、1～100 mg/L、1～100 mg/L,检出限分别为0.01 mg/L、0.02 mg/L、0.02 mg/L,定量下限分别为0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.0 mg/L,批内变异系数(CV)和批间CV均小于5%,回收率分别为92.00%～101.56%、100.10%～101.80%、97.16%～100.80%。结论建立的离子交换色谱法基本性能符合评价标准,能够灵敏且准确地检测尿液草酸根、磷酸根和枸橼酸根含量。     

LPS诱导心肌成纤维细胞HMGB1的释放与Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白分泌的相关性研究

目的:探讨小鼠心肌成纤维细胞(CFs)在LPS刺激下高迁移率族蛋白(HMGB1)释放与Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白分泌的相关性。方法:从7～14 d BALB/c小鼠心脏中分离培养心肌成纤维细胞,分别用LPS(500 ng/mL)刺激0,6,12,24,36,48 h后收取细胞及其上清。采用RT-PCR检测HMGB1以及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平,通过Western blot检测细胞及其培养上清中HMGB1以及Ⅰ、Ⅲ型胶原含量;采用免疫荧光分析HMGB1在细胞内的定位。结果:LPS刺激CFs 6 h时HMGB1以及Ⅰ、Ⅲ型胶原水平无明显变化,12、24、36、48 h后HMGB1、Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达量均增加。Western blot检测发现,LPS刺激CFs 24 h后细胞上清可检测到HMGB1蛋白,且细胞中HMGB1的表达呈现先增加后降低的现象。免疫荧光观察到HMGB1的释放伴随着从细胞核到细胞质的转位过程。Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的Western blot结果均呈现增加趋势。结论:LPS刺激CFs后HMGB1由细胞核转移到细胞质并可主动分泌到胞外,其作用呈现一定的时间依赖性。与心肌纤维化密切相关的Ⅰ、Ⅲ型胶原在LPS刺激后表达量明显增加,提示内源性HMGB1的定位及分泌可能与脓毒症引起的心功能紊乱后期的心肌纤维化可能有一定的关系。     

乙肝病毒DNA定量与血清学模式及血清丙氨酸氨基转移酶的相关性分析

目的 研究乙肝患者乙肝病毒(HBV)DNA载量和血清学模式，以及血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)之间的关系，明确三者在乙肝诊断、治疗及疗效评估中的价值。方法 采集苏州大学附属第一医院2021年11月—2022年4月392例乙肝患者的血清，分别用荧光定量PCR测定HBV-DNA，化学发光微粒子免疫法测定乙肝血清学指标，速率法测定血清酶ALT值，并对其进行统计学分析。结果 大三阳(HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性)患者的HBV-DNA定量总阳性率为85.0%，小三阳(HBsAg、HbeAb、HbcAb阳性)患者的HBV-DNA定量总阳性率为56.5%，两者差异有统计学意义(χ²=29.123,P<0.05);HBsAg、抗-HBc阳性患者的HBV-DNA定量总阳性率为12.5%，与大三阳组的差异有统计学意义(χ²=20.682,P<0.01)，与小三阳组的差异有统计学意义(χ²=4.416,P<0.05)。HBV-DNA定量>1×10⁵拷贝/ml，血清酶ALT异常率为46.6...