胚胎植入前遗传学检测在阻断常染色体隐性多囊肾病家系多囊肾/多囊肝病变1基因新突变遗传的应用

目的 探讨基于二代测序（NGS）技术的单核苷酸多态性（SNP）连锁分析在常染色体隐性遗传性多囊肾病（ARPKD）家系胚胎植入前遗传学检测（PGT）中的应用价值。方法 选取1个ARPKD家系,女方孕期产检发现胎儿有多囊肾行引产,胎儿基因检测为多囊肾/多囊肝病变1基因（PKHD1）复合杂合突变c.10444C> T（父源）和c.4303del（母源）,其中c.4303del突变为首次报道。采用多重聚合酶链反应（PCR）和NGS在突变位点两侧2M区域内选择335个信息丰富、紧密连锁的SNP位点作为遗传连锁标记,构建夫妇双方携带基因突变的SNP风险单体型。体外受精后行囊胚培养。对活检获得的滋养层细胞进行全基因组扩增（WGA）后,采用Sanger测序直接检测PKHD1基因突变,采用基于NGS的SNP连锁分析鉴别携带突变的染色体,同时进行拷贝数变异（CNV）分析以进行低深度的染色体非整倍性筛查。结果 6个活检囊胚中有4个为未携带突变的整倍体,有1个携带杂合突变的嵌合体,1个测序数据波动大,无法判断。选择其中1枚未检测到突变的优质整倍体胚胎进行冻融胚胎移植（FET）,足月分娩一健康婴儿。结论 ...     

无创PGT技术的临床应用及研究进展

胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing, PGT)技术广泛应用于辅助生殖技术(assisted reproductive technology, ART)。PGT可以检测胚胎的单基因遗传病、染色体结构和数目变异, 同时能改善胚胎植入效果、临床妊娠结局和活产率。但该技术涉及到的活检过程对胚胎具有一定的侵袭性, 同时对设备和人员的要求颇高。而随着从囊胚液和胚胎培养液中发现了可以用于基因分析的游离DNA, 无创PGT(noninvasive PGT, NiPGT)成为一种有潜力的检测方式, 在辅助生殖领域有广阔的应用前景。现就目前NiPGT技术的应用及研究的有效性和局限性进行阐述, 为临床应用提供依据。     

解冻复苏囊胚行植入前遗传学检测临床结局分析

目的 分析二次冷冻、二次活检(DFDB)囊胚和二次冷冻、一次活检(DFSB)囊胚行植入前遗传学检测(PGT)的临床结局相关资料，旨在扩大现有数据，为冻融胚胎PGT的临床价值和安全性问题提供一定的指导。方法 回顾性分析38例行解冻复苏囊胚患者的PGT周期临床资料，依据囊胚活检次数的不同，分为DFDB组和DFSB组。冷冻方法均为玻璃化冷冻。结果 DFDB组共24例患者，上个PGT周期未获诊断的囊胚共34枚，解冻后存活32枚，解冻囊胚存活率为94.12%。这32枚囊胚二次活检后，行遗传学检测，正常囊胚15枚(46.88%),异常囊胚数17枚(53.13%)。DFSB组共14例患者，共解冻复苏上个单精子胞浆内显微注射(ICSI)周期剩余的50枚囊胚，50枚囊胚解冻后均存活。活检这50枚囊胚，再进行遗传学分析，47枚囊胚诊断明确，其中正常囊胚9枚(18%),异常囊胚28枚(56.00%),嵌合体囊胚为10枚(20.00%),未获诊断的囊胚数为3枚(6.00%)。DFDB组和DFSB组分别有8例患者和5例患者解冻移植，解冻后囊胚均存活，分别临床妊娠5例和3例，各活产1例，活产婴儿均健康。结论 DF...