人型支原体和解脲脲原体对氟喹诺酮类药物的敏感性研究

目的 探讨人型支原体和解脲脲原体对氟喹诺酮类药物的敏感性，指导临床合理用药。方法 采用微量肉汤稀释法测定人型支原体和解脲脲原体对6种氟喹诺酮类药物的敏感性。结果 司帕沙星和加替沙星对人型支原体和解脲脲原体具有良好的抑菌活性，其MIC50分别为0．03125、0．25mg／L和0．25、0．50mg／L。左氧氟沙星和氧氟沙星对两种支原体的MIC50均分别为1．0、2．0mg/L。诺氟沙星对两种支原体的活性较差，MICl卯分别为16．0、32．0mg／L。环丙沙星对人型支原体的MIC50为2．0mg／L，而对解脲脲原体的MIC50则为8．0mg／L。结论 氟喹诺酮类药物新品种司帕沙星、加替沙星和左氧氟沙星的抗Mh和抗Uu活性强于环丙沙星和氧氟沙星等老一代氟喹诺酮类药物，本结果可为选择氟喹诺酮类药物治疗泌尿生殖道支原体感染提供实验依据。     

8种氟喹诺酮药物体外抗淋球菌的活性研究

目的　为了解淋球菌对氟喹诺酮的耐药状况 ,指导临床合理用药及开发新一代氟喹诺酮药物提供实验依据。方法　临床标本分离的 80株淋病流行株 ,采用琼脂稀释法测定淋球菌对 8种氟喹诺酮药物的最小抑菌浓度 (MIC)及交叉耐药情况。结果　Y98- 11、Y98- 35、Y98- 36、Y98- 48对淋球菌均有很强活性 ,其MIC50均为 0 .0 16μg/ml,MIC90 均为 0 .0 62 5～ 0 .12 5μg/ml。而盐酸环丙沙星、氧氟沙星、左旋氧氟沙星、司帕沙星存在不同程度耐药 ,其MIC50 分别为 1μg/ml、1μg/ml、0 .5μg/ml、0 .2 5μg/ml,其MIC90 分别为 4 μg/ml、4 μg/ml、2μg/ml、1μg/ml;且耐环丙沙星的淋球菌株 ,对氧氟沙星、左旋氧氟沙星、司帕沙星有显著性交叉耐药 ( χ2 =18.37、8.60、6.92 ,P <0 .0 5)。结论　近年来 ,对氟喹诺酮敏感性下降或耐药的淋球菌在我国已出现 ,并存在交叉耐药 ,应引起人们的高度重视 ,但新一代的氟喹诺酮药物仍具有较好的抗菌效果     

解脲支原体的生长条件研究

目的　探讨解脲支原体 (Uu)在液体培养基中的最佳营养条件和在固体培养基上形成菌落的最佳气体条件。方法　采用不同的pH值、不同的酵母及小牛血清含量配制解脲支原体培养基 ,将法国Merieum生产的培养基作对比研究。结果　解脲支原体生长最适pH值为 6.0～ 6.5 ;10 %酵母提取液、10 %小牛血清能加速解脲支原体的生长 ,90 %N2 、5 %～ 10 %CO2 能促进解脲支原体菌落生长。结论　本研究为改进解脲支原体的培养质量、开发高效的支原体培养基及药敏检测板提供实验依据     

妇康乐药液的杀菌性能观察

目的　进一步验证妇康乐药液在杀微生物方面的性能。方法　实验观察妇康乐药液的杀微生物作用、毒性作用与稳定性。结果　含 10 %妇康乐的水溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、淋球菌、白色念珠菌、解脲支原体作用 2 0min ,杀灭率分别达 10 0 %、69.3%、10 0 %、60 .2 %、10 0 % ,杀菌效果随作用时间的延长而增加 ,2 0 %的小牛血清对其杀菌效果的影响较小。结论　该消毒剂具有较强的杀菌作用 ,对皮肤、粘膜无刺激 ,对人体无毒副作用     

妇康乐纯中草药消毒剂性能的实验观察

目的进一步验证中草药消毒剂在杀微生物方面的作用。方法实验观察妇康乐中草药消毒剂的杀微生物和毒性作用及稳定性。结果含５０％原液的水溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌繁殖体作用３０ｍｉｎ,杀灭率分别达５０％、４６．６７％和７１．１１％,对白色念珠菌也有一定的杀菌作用,杀菌效果随作用时间的延长而增强,２０％的小牛血清对其杀灭白色念珠菌效果的影响较小。结论该消毒剂具有较强的杀菌作用,对皮肤粘膜无刺激,对人体无毒副作用。     

hDaXX与12型腺病毒E1B55KD癌蛋白在体内外的结合反应

目的：研究12型糖尿病(Adenovirus 12,Ad12)E1B 55KD癌蛋白（Ad12E1B 55KD）打破hDaxx与急性早幼粒细胞性白血病蛋白（promyelocytic leukemia protein,PML）在细胞核共定位的机制。方法：构建hDaxx原核细胞表达质粒pQE30/hDaxx，并在大肠杆菌（E.coli）BL21中诱导表达，用镍-氮基三乙酸（Ni-NTA）琼脂糖加以纯化。通过体内外共免疫沉淀反应，Western blot方法研究hDaxx与Ad12E1B55KD直接结合反应。结果：质粒qQE30/hDaxx在E.coli BL21中成功诱导表达了hDaxx,其N端有6个组氨酸分子附着（6His-hDaxx）.Wetern blot结果显示hDaxx在体内外与Ad12E1B 55KD发生直接结合反应。结论：表达并获得纯化的6His-hDaxx,hDaxx能在体内外与Ad12E1B55KD直接结合。     

SARS病毒S蛋白部分片段B-细胞表位的多参数预测

目的预测SARS病毒S蛋白(spike glycoprotein)部分片段(aa No.400～600 & aa No.1 100～1 195)的B-细胞表位.方法应用多种参数和方法进行综合分析,包括跨膜分析、保守区分析、同源性比较、Hopp ＆ Woods亲水性参数、抗原性参数、可及性参数、β-转角、万氏法等综合预测方法.结果显示B-细胞识别的表位可能在436～456和1 136～1 146残基或其附近,这两个被预测的表位均含有β-转角和不规则卷曲结构.结论本研究为应用合成肽抗原制备抗SARS病毒S蛋白抗体、诊断非典型肺炎(severe acute respiratory syndrome, SARS)提供了依据.     

人乳头瘤病毒16型 E6蛋白真核表达载体pGADT7-E6的构建与鉴定

目的 构建HPV16 E6基因的真核表达载体,为在酵母菌中表达以及进一步探讨HPV16 E6基因与宫颈癌发生的关系奠定前期实验基础.方法 用PCR扩增含EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的E6基因序列,双酶切pGADT7载体与E6基因PCR产物,纯化回收后,用连接酶将二者连接并转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定,构建HPV16 E6基因的真核表达载体pGADT7-E6.结果 双酶切pGADT7-E6后,琼脂糖凝胶电泳显示2个片段,分别在约500 bp与8.0 kb处.DNA测序结果经与GenBank登录的序列做BLAST分析,显示重组质粒含有477 bp的目的 基因片段,读码框正确,无碱基错配和移码突变.结论 成功构建了HPV16 E6基因真核表达载体pGADT7-E6.     

GFP-HPVl8 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定

目的 构建人乳头瘤病毒18型早期蛋白2(HPV18 E2)删除突变体N端(TAD)、C端(DBD)与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的真核表达载体,为研究HPV18 E2基因与宫颈癌发生的关系提供实验基础.方法 用PCR扩增HPV18 E2 TAD、DBD基因序列,用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pEGFP-Cl载体与TAD、DBD基因PCR产物,纯化回收后,用连接酶连接并转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定.结果 阳性克隆质粒经双酶切后,琼脂糖凝胶电泳可见4.7 kb、618 bp和243 bp附近的片段.DNA测序结果经与GenBank登录的序列做BLAST分析,显示重组质粒分别含有618 bp与243 bp的目的基因片段,无碱基错配和移码突变,读码框完全正确.结论 成功地构建了GFP-HPV18 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体pEGFP-C1/TAD与pEGFP-C1/DBD.     

人型支原体Ⅱ型拓扑异构酶基因突变与耐氟喹诺酮类药物关系的研究

我们从 10 3株临床株中筛选出 8株对 6种氟喹诺酮类药物呈不同程度交叉耐药的人型支原体 (Mh)株 ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增喹诺酮耐药决定区 (QRDR)。报告如下。一、材料与方法1.标本收集 :2 0 0 1年 4～ 8月从性病门诊收集泌尿生殖道感染患者的分泌物标本 5 12份 ,按文献 [1]方法 ,共分离鉴定出 10 3株Mh。2 .抗菌药物 :粉剂诺氟沙星 (NFX)、氧氟沙星 (OFX)、左氧氟沙星 (LFX)、环丙沙星 (CFX)、加替沙星 (GFX)和司帕沙星 (SFX)由浙江医药股份有限公司新昌制药厂惠赠。3.药敏试验和模板DNA提取 :均按文献 [1]方法。耐药株的M…