阳离子脂质体介导rhBMP-2基因转染兔骨髓基质干细胞体外分化成骨活性的实验

目的:探讨阳离子脂质体介导的重组人骨形态发生蛋白(Adv-rhBMP-2)基因对兔骨髓基质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MMSCs)体外成骨活性的影响。方法:2002-05/07在解放军总医院骨科研究所完成。脂质体介导的基因转染和检测方法:pEGFP-rhBMP-2的扩增、浓度及纯度鉴定。①脂质体包裹质粒DNA,转染MMSCs后测定转染率。②检测rhBMP-2,碱性磷酸酶(ALP)和Ⅰ型胶原的表达。结果:脂质体介导的基因转染后的检测结果:①脂质体介导pEGFP-rhBMP-2转染MMSCs后所测定的最大转染率为14.18%。②pEGFP-rhBMP-2转染的MMSCs中rhBMP-2,ALP和Ⅰ型胶原的表达呈阳性,而pEGFP转染的细胞和未染细胞rhBMP-2,ALP和Ⅰ型胶原的表达弱阳性。结论:①MMSCs是一种较理想的骨组织工程种子细胞。②脂质体介导质粒rhBMP-2的基因转移安全性好,但转染率相对较低,随着新一代高转染率脂质体的问世,这种治疗方法有望率先进入临床。     

端侧吻合与自体神经移植神经再生的比较研究

目的 比较周围神经端侧吻合与自体神经移植后神经再生的效果，为临床提供实验依据。方法 选用Wister大白鼠60只，随机分成3组。A组：切断左侧腓神经1cm，造成神经缺损，取对侧相应的腓神经桥接缺损。B组：切断左侧腓神经，在邻近的胫神经干外膜上开一1mm小窗，将腓神经远端吻合到胫神经干侧方开窗处。C组：方法同B组，但束膜开窗。各组分别于术后8、12周取材并进行大体、组织学、形态定量学和电生理检测。结果 自体神经移植体修复神经缺损后，再生神经的数目、有髓神经纤维截面积、运动神经传导速度均优于端侧吻合的外膜、束膜开窗组（P＜0．05）；外膜开窗组与束膜开窗组之间无显性差异（P＞0．05）。结论 自体神经移植修复大鼠周围神经缺损，其再生神经纤维质量优于端侧吻合法。     

模拟低压低氧暴露对大鼠脊髓损伤后有关行为和病理指标的影响

目的：分析低压低氧环境对大鼠脊髓损伤模型有关行为和病理指标的影响,为脊髓损伤患者航空后送的安全性论证和防护提供实验依据。方法将90只体重为200～250 g的雌性SD大鼠随机分为6组,每组15只,分别为A1（1 h对照组）、B1（2 h对照组）、C1（4 h对照组）、A2（1 h实验组）、B2（2 h实验组）、C2（4 h实验组）。大鼠水合氯醛腹腔注射麻醉后手术暴露T10节段脊髓,使用NYU脊椎冲击损伤仪（撞击高度25 mm,撞击针重10 g,接触面积约2 mm2）制作脊髓挫伤模型。对照组模拟地面环境,不进低压氧舱;实验组放入小动物低压氧舱内,匀速减压至模拟舱内保持2500 m高度的气压值机舱环境。实验组与对照组各组分别维持1 h、2 h、4 h,模拟短程（1 h）、中程（2 h）、远程（4 h）航程。环境干预结束后即刻抽取动脉血,监测血氧分压及二氧化碳分压;于术后24 h分别观测大鼠后肢运动功能[Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分、Rivlin斜坡法]及脊髓打击处血肿面积。结果分别比较各相应时长,实验组与对照组氧分压及二氧化碳分压差异均有统计学意义（P＜0.05）;正常环境与低压低氧环境下,时长4 h组与时长1 h组氧分压及二氧化碳分压差异均有统计学意义（P＜0.05）。以BBB评分标准评价运动功能：实验组与对照组各时程差异均无统计学意义（P＞0.05）。Rivlin斜坡法评价后肢肌力：实验组与对照组各时程差异均无统计学意义（P＞0.05）。实验组与对照组各时程脊髓撞击处血肿面积差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论短程（1 h）、中程（2 h）、远程（4 h）低压低氧环境下,脊髓损伤大鼠血氧分压和二氧化碳分压会受到明显影响,航空后送过程中应当注意呼吸监测与氧疗。     

术中神经监测技术在脊柱手术中的临床应用

术中神经监测(Intraoperative Neuromonitoring,IOM)伴随着科技和麻醉技术的发展,逐渐被推广并广泛使用,尤其在脊柱手术对脊髓和神经功能的有效监测,降低了手术风险。但在手术的施行过程中,引起监测信号变化的影响因素非常多。本文将对时下常用的几种监测方式进行回顾,并进一步讨论和分析在脊柱手术的过程中,监测信号变化的原因。     

Promotion of nerve regeneration in peripheral nerve by exogenous epidermal growth factor after terminolateral neurorrhaphy: an experimental study

Objective To evaluate the effect of exogenous epidermal growth factor (EGF) on promoting nerve regeneration after terminolateral neurorrhaphy (TLN). Methods Thirty-two adult Wistar rats were randomlydivided into 2 groups. In the EGF group, the left peronealnerve was transected, then an 1mm epineural window wascreated on the neighbouring-tibial nerve. The distal end of peroneal nerve was sutured to the windowed tibial nerveby means of end-to-side attachment. In the control group,nerve TLN was performed as In the EGF group. Injectionof EGF/normal saline (20 μg/μL) and normal saline (10 μL) was done at the distal site of peroneal nerve transected in the EGF group and control group for two weeks respectively. Histological, morphological and electrophysiological examinations were performed in 4 and 8 weeks after the operation. Results The cross area of the regenerated myelinated nerve fibres, axon numbers, motor nerve conduction velocity were significantly better in the EGF group than in the control group     

椎管成型术结合Arch钢板螺钉系统治疗颈椎管狭窄的初步探讨

目的观察Arch钢板系统与颈椎椎管成形术相结合治疗颈椎管狭窄的疗效。方法对1997年3月至2011年10月诊治的21例颈椎病患者,采用颈椎后路单开门椎管扩大成形基础上加用颈椎后路Arch钢板固定治疗的临床资料和影像资料进行回顾分析。结果 21例患者随访3～15个月,术前JOA评分7.9,术后评分13.5。结论利用后路固定Arch钢板系统固定颈椎管扩大成形后椎管,能有效地防止再关门和减少轴性症状,从而减少再次手术的机率。     

腰椎后路减压术在老年退行性腰椎管狭窄症的个体化应用

目的分析腰椎后路减压术个体化应用的临床疗效,优化老年退行性腰椎管狭窄症的后路减压治疗方案。方法回顾性分析我科2009-05~2010-12收治的退行性腰椎管狭窄症患者80例,依据患者病情特点,个体化应用腰椎后路减压术,即分为中央椎板切除减压内固定组35例、全椎板切除减压椎间植骨融合组45例。均于术前及术后12个月进行腰椎JOA评分、Prolo评分及腰腿痛视觉模拟评分(VAS),并根据JOA评分结果进行疗效分级。结果获得随访75例,时间12-36个月,平均25个月。两组患者术后12个月腰椎JOA评分、Prolo评分及腰腿痛VAS评分结果较术前相比差异均有统计学意义(P<0.05)。中央椎板切除减压内固定组和全椎板切除减压椎间植骨融合组JOA评分术后改善率依次为77.57%和74.26%。依改善率划分疗效等级,其中优46例,良25例,可4例,优良率94.67%。4例患者术后短期症状加重,经治疗于术后2-5周症状较术前改善;1例患者术后脑梗死,转入神经内科联合治疗后恢复良好;1例患者术后脑脊液漏,治疗后切口甲级愈合。结论腰椎后路减压术治疗老年退行性腰椎管狭窄症安全有效。对于不同的病例,严格制定个体化手术方案,可优化该术式临床疗效。     

阳离子脂质体介导重组人骨形态发生蛋白-2基因转染的兔骨骼肌干细胞体外成骨分化的实验研究

目的初步探讨阳离子脂质体介导的重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)基因对兔骨骼肌干细胞(SMSCs)体外成骨活性的影响。方法pEGFP-rhBMP-2的扩增、浓度及纯度鉴定。脂质体包裹质粒DNA，转染SMSCs后测定转染率。检测rhBMP-2、碱性磷酸酶(ALP)和Ⅰ型胶原的表达。结果脂质体介导pEGFP-rhBMP-2SMSCs转染后最大转染率为14．18％，rhBMP-2、ALP和Ⅰ型胶原的表达呈阳性，而pEGFP转染的细胞和未染细胞rhBMP-2、ALP和Ⅰ型胶原的表达弱阳性。结论SMSCs是一种较理想的骨组织工程种子细胞。脂质体介导质粒rhBMP-2的基因转移安全性好，但转染率相对较低。