m6A修饰的circ_100367通过调控miR-885-5p轴介导甲状腺乳头状癌免疫逃逸

目的:探讨m6A修饰的circ_100367对甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）免疫逃逸的影响,并阐述其可能的机制。方法:采用qRT-PCR法检测PTC患者癌组织及其癌细胞株中circ_100367和miR-885-5p的表达水平。将circ_100367干扰质粒（si-circ_100367）及其阴性对照干扰质粒（si-NC）、circ_100367过表达质粒（oe-circ_100367）及其阴性对照质粒（oe-NC）和miR-885-5p mimics及其阴性对照NC mimics分别转染至TPC1细胞中,分为Blank组、si-circ_100367组、si-NC组、oe-circ_100367组、oe-NC组、miR-885-5p mimics组和NC mimics组。采用qRT-PCR法检测各组TPC1细胞中circ_100367和miR-885-5p的表达水平;采用双荧光素酶报告系统验证circ_100367可靶向调控miR-885-5p;MeRIP-qPCR法检测circ_100367的m6A甲基化水平;Transwell法检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Western blot检测细胞FASL、IDO1、PD-L2和PD-L1表达水平。结果:circ_100367在PTC患者癌组织及其癌细胞株K1、TPC1和IHH4中表达水平明显升高（P＜0.05）,而miR-885-5p表达水平明显降低（P＜0.05）。双荧光素酶报告系统结果说明:circ_100367靶向负调控miR-885-5p。MeRIP试验结果显示:circ_100367含有丰富的m6A甲基化,且与NC mimics比较,miR-885-5p mimics细胞中circ_100367的m6A甲基化水平明显降低（P<0.05）。此外,与Blank或si-NC比较,si-circ_100367细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与Blank或oe-NC比较,oe-circ_100367细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;与Blank或NC mimics比较,miR-885-5p mimics细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。结论:m6A甲基化修饰的circ_100367能诱导PTC细胞侵袭,影响PD-L1的表达进而促进免疫逃逸,其可能与 m6A甲基化修饰的circ_100367和miR-885-5p竞争性结合有关。     

姜黄素抑制STAT3磷酸化对乳腺癌细胞增殖及Hsp90α表达的影响

目的探讨姜黄素对乳腺癌细胞增殖和Hsp90α表达的影响及其可能机制。方法以乳腺癌细胞株MCF-7为材料,分别用不同浓度的姜黄素(0、5、10、15、20μmol/L)处理细胞36 h,或以10μmol/L姜黄素分别处理细胞12、24、36、48 h,用MTT法检测细胞生长抑制率,分别采用实时定量PCR和Western blot法检测Hsp90αmRNA、Hsp90α及磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白的表达。结果姜黄素处理MCF-7细胞后,总STAT3蛋白的表达无明显差异,p-STAT3表达明显下调;同时,姜黄素处理组MCF-7细胞代谢MTT的能力降低,细胞生长的抑制率明显上升,Hsp90αmRNA和蛋白质的表达下调,且该效应呈浓度和时间依赖性(P0.05)。结论姜黄素可能通过STAT3信号途径,调控Hsp90α的表达,进而干预乳腺癌细胞的增殖。     

干扰MAD2L1基因表达对乳腺癌细胞凋亡的影响及机制

目的 探讨干扰有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白1(MAD2L1)基因表达对乳腺癌(BC)细胞凋亡的影响及其机制。方法 采用qRT-PCR检测正常乳腺上皮细胞系MCF-10A和4种BC细胞系(MDA-MB-231、MCF-7、SK-BR-3和BT-20)中MAD2L1 mRNA表达水平。将MAD2L1 siRNA转染至MDA-MB-231细胞中,qRT-PCR和Western blotting检测细胞中MAD2L1 mRNA和蛋白表达水平;MTT检测细胞增殖能力;流式细胞术法检测细胞凋亡率;Western blotting检测细胞中Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK(Thr180/Thr182)和p38MAPK等蛋白表达水平。采用p38MAPK抑制剂SB203580联合处理上述细胞,Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率的变化;Western blotting检测Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK和p38MAPK表达水平的变化。结果 BC细胞系中MAD2L1 mRNA表达水平高于MCF-10A细胞,其中M...     

NPWT促进糖尿病足溃疡创面愈合分子机制的初步研究

目的通过检测与创面愈合进程相关的组织基因表达,探讨采用负压创面治疗(nagetive pressure wound therapy,NPWT),促进糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcer, DFU)愈合的作用机制。方法将纳入的50例DFU患者随机分成NPWT组(25例)和对照组(25例)。对照组接受局部湿敷治疗。两组患者治疗前后10 d均取创面肉芽行组织活检,利用RT-PCR检测转移生长因子-β1(transforminggrowth factor beta 1, TGF-β1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1, MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9, MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1, TIMP-1)的mRNA表达,并进行对比分析。结果治疗后10 d,NPWT组患者创面肉芽组织中VEGF、TGF-β1和TIMP-1 mRNA的表达较治疗前显著增加,IL-1β、TNF-α、MMP-1和MMP-9 mRNA的表达显著下降(P<0.05);而对照组上述各项指标的mRNA表达,治疗前后均无显著变化(P>0.05)。结论 NPWT可能通过影响生长因子、炎症细胞因子和基质金属蛋白酶的表达来促进DFU愈合。     

自制小型负压引流装置的临床应用

目的　探讨自制小型负压引流装置在乳腺甲状腺疾病术后引流中的作用。　方法　将200例入选的乳腺、甲状腺手术患者回顾性分为实验组和对照组,其中对照组患者伤口分别采用橡胶引流膜、T型引流管,实验组患者伤口使用自制小型负压引流装置,比较两组间的引流时间、引流量,敷料更换次数,切口感染等。　结果