硫链丝菌肽对人鼻咽癌HNE-1细胞生长及Foxm1表达的影响

目的研究硫链丝菌肽(TST)对人鼻咽癌HNE-1细胞株增殖能力及Forkhead box protein M1(Foxm1)表达的影响。方法以MTT法分别测定不同浓度(1、2、4、8、12、16μmol/L)TST作用于人鼻咽癌HNE-1细胞48h的增殖抑制率;通过流式细胞仪(FCM)检测不同浓度(1、2μmol/L)TST分别作用于HNE-1细胞48h后对其细胞周期动力学的影响;采用免疫细胞化学法和Western blot检测HNE-1细胞中Foxm1蛋白表达以及不同浓度TST作用于HNE-1细胞48hFoxm1蛋白表达的变化。结果不同浓度(1、2、4、8、12、16μmol/L)TST作用于HNE-1细胞48h后的增殖抑制率分别为8.31%、17.46%、34.28%、58.68%、87.91%、99.05%;浓度分别为1、2μmol/L的TST作用于HNE-1细胞48h后,均使HNE-1细胞停滞于G1/G0期(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05);同时将TST作用于HNE-1细胞48后,经免疫细胞化学法和Western blot均检测到Foxm1蛋白在HNE-1细胞胞质中表达显著降低(P<0.05)。结论 TST对人鼻咽癌HNE-1细胞株具有明显的增殖抑制作用,可能与降低肿瘤细胞中Foxm1蛋白表达有关。     

硫链丝菌肽对人喉癌Hep-2细胞生长及FoxM1表达的影响

目的研究硫链丝菌肽(thiostrepton,TST)对人喉癌Hep-2细胞株增殖能力及FoxM1表达的影响。方法用MTT法测定TST作用于人喉癌Hep-2细胞48 h的增殖抑制率;通过流式细胞仪(FCM)检测不同浓度TST分别作用于Hep-2细胞48 h后对其细胞周期动力学的影响;采用免疫细胞化学法、RT-PCR和Western blot检测Hep-2细胞中FoxM1mRNA及蛋白表达,以及不同浓度TST作用于Hep-2细胞48 h FoxM1蛋白表达的变化。结果不同浓度(1、2、4、8、12、16μmol/L)TST作用于Hep-2细胞48 h后的增殖抑制率分别为5.27%、9.43%、20.25%、41.61%、67.96%、96.95%;浓度分别为2、3μmol/L的TST作用于Hep-2细胞48 h后,均使Hep-2细胞停滞于G1/G0期(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05);同时将TST作用于Hep-2细胞48 h后,经免疫细胞化学法、RT-PCR和Western blot均检测到FoxM1 mRNA及蛋白在Hep-2细胞中表达显著降低(P<0.05)。结论 TST对人喉癌Hep-2细胞株具有明显的增殖抑制作用,其可能机制是与降低肿瘤细胞中FoxM1蛋白表达有关。     

鼻咽癌畸胎瘤细胞源性生长因子表达及siRNA对HNE-1细胞株增殖的抑制

目的探讨畸胎瘤细胞源性生长因子(PC cell-derived growth factor,PCDGF)在人鼻咽癌中的表达,研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对鼻咽癌HNE-1细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学的方法检测34例鼻咽癌、20例鼻咽慢性炎症组织中PCDGF蛋白的表达情况。根据PCDGF基因设计合成2条siRNA,利用LipofectamineTM2000转染鼻咽癌HNE-1细胞。通过PT-PCR、Western blot、荧光免疫细胞化学法检测转染后细胞PCDGF mRNA和蛋白表达,采用MTT检测转染后细胞的生长增殖情况,FCM法检测细胞周期分布。结果 34例鼻咽癌组织中PCDGF阳性表达率为85.3%(29/34),20例鼻咽部慢性炎症组织中阳性率为15.0%(3/20),2组间差异有统计学意义(P<0.01)。2条重组质粒均能特异性的抑制PCDGF mRNA和蛋白的表达,其中siRNA-1的沉默效率最高。转染48 h后,HNE-1细胞中PCDGF mRNA和蛋白表达水平分别下调64.7%和69.8%,细胞增殖抑制率为(37.07±12.4)%,siRNA-1组G0/G1期细胞增多,S期细胞数量明显减少(P<0.05),细胞周期被阻滞于G1期。结论特异性siRNA能够有效沉默PCDGF基因表达,并显著抑制鼻咽癌HNE-1细胞增殖。     

声门旁间隙自体脂肪注射术治疗单侧声带麻痹的疗效分析

目的评价声门旁间隙自体脂肪注射术治疗单侧声带麻痹的疗效。方法选取单侧声带麻痹患者21例行声门旁间隙自体脂肪注射术。采用频闪喉镜观察术前及术后3个月、6个月患侧声带表面积、声带闭合时声门裂隙。在术前及术后3个月、6个月进行嗓音声学参数[频率微扰(Jitter)、振幅微扰(Shimmer)和标准化噪声能量(NNE)、最长发声时间(MPT)]分析。结果所有患者术后患侧声带体积显著增加,声带表面积增加,声带向内侧移动,闭合时声门裂隙明显缩小。术后3个月、6个月声带表面积及声带闭合时声门裂隙和术前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后3个月、6个月MPT较术前延长,NNE、Jitter、Shimmer较术前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。所有患者注射后无呼吸困难,无喉部及腹部感染,无局部血肿形成等并发症。结论声门旁间隙自体脂肪注射术治疗单侧声带麻痹简单、方便、效果良好,具有较好的临床应用价值。