紫杉醇对宫颈癌TC-1细胞表面PD-L1表达的影响

目的：探讨紫杉醇对宫颈癌TC-1细胞程序性凋亡配体1( PD-L1)表达的影响及其机制。方法①将细胞分为紫杉醇组及紫杉醇联合蛋白激酶D(PKD)阻断药(G?6976),每组设4个浓度梯度,各5个复孔,分别加入对应浓度试剂,MTT法检测紫杉醇对TC-1细胞活力的影响及G?6976对紫杉醇IC50值的影响。②将细胞分为0.9％氯化钠溶液组及紫杉醇组,每组5个复孔,分别加入对应浓度试剂,免疫组化法检测紫杉醇对TC-1细胞PD-L1表达的影响。③将细胞分成阴性对照组、G?6976组、紫杉醇组、紫杉醇联合G?6976组4组,每组5个复孔,分别加入对应浓度试剂,免疫组化法检测紫杉醇、G?6976对 TC-1细胞 PD-L1表达的影响。结果紫杉醇组紫杉醇对 TC-1细胞的 IC50值为40μg·mL-1,紫杉醇联合G?6976组紫杉醇对TC-1细胞IC50值为38.9μg·mL-1,两组IC50值差异无统计学意义( P>0.05)。紫杉醇处理TC-1细胞24 h后PD-L1的表达为(88.48±13.44)％,显著高于阴性对照组(39.59±5.99)％(P<0.05)。紫杉醇联合G?6976处理TC-1细胞24 h后PD-L1表达为(79.7±4.7)％,显著低于紫杉醇组(96.8±2.5)％(P<0.05)。结论紫杉醇可增加TC-1细胞PD-L1表达,阻断PKD途径可显著抑制PD-L1表达增加的程度,紫杉醇可能是通过PKD途径发挥作用。     

中晚期宫颈癌组织HIF-1α、Twist、MDR1的表达及意义

目的 研究低氧诱导因子-1α (hypoxiainducible factor-1,HIF-1α)、上皮转化因子Twist、多耐药基因(multi-drug resistance,MDR1)在人宫颈癌组织中的表达,探讨HIF-1α、Twist及MDR1与宫颈癌浸润、转移和耐药中的关系.方法 免疫组化法检测中、晚期宫颈癌组织微阵列芯片78例组织标本中HIF-1α、Twist及MDR1表达,探讨其与宫颈癌临床病理特征的关系及它们之间的相关性.结果 78例宫颈癌组织中HIF-1α、Twist及MDR1阳性表达率分别为69.2％、71.8％和85.6％,随着FIGO分期的变晚、淋巴转移的出现、分化程度的降低,HIF-1α、Twist及MDR1的表达均逐渐增高,3者间表达呈正相关(P＜0.05).结论 HIF-1α与宫颈癌的浸润、转移、耐药有关,它可能是通过上调Twist、MDR1表达发挥作用的.     

Twist在低氧微环境中宫颈癌上皮间质转化中的作用

目的 研究Twist在低氧微环境中宫颈癌上皮间质转化(EMT)中的作用.方法 以二氯化钴处理Hela细胞模拟低氧微环境,细胞的形态变化、迁移能力分别应用倒置显微镜及划痕实验进行评价.Twist、Vimentin和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在Hela细胞中的表达应用细胞免疫荧光法进行检测.结果 低氧处理后Hela细胞获得了间质细胞的形态特征;Hela细胞低氧组迁移率为(20.4±5.9)%,常氧组为(5.2±1.7)%(P<0.05);低氧组Hela细胞HIF-1α、Twist、Vimentin表达均较常氧组显著增高(P均<0.05);低氧组Hela细胞中HIF-1α、Twist、Vimentin的表达两两均呈正相关(P<0.05).结论 低氧条件下Hela细胞中Twist高表达,这可能与宫颈癌EMT发生有关.     

顺铂对TC-1细胞表面PD-L1表达的影响及机制

目的 探讨顺铂对宫颈癌TC-1细胞表面程序性凋亡配体PD-L1表达的影响及其作用机制,为提高宫颈癌化疗效果提供理论依据.方法 MTT方法检测顺铂对TC-1细胞的增殖活力,筛选顺铂最适作用浓度;免疫组化方法检测顺铂、PKD阻断剂G0 6976对TC-1细胞表面PD-L1表达的影响.结果 (1)顺铂对TC-1细胞具有显著的增殖抑制作用,IC50值为25.5 μg/mL; (2)顺铂处理24 h后TC-1细胞表面PD-L1的表达为(64.96±11.55)％,阴性对照组为(39.59±5.99)％,2组比较差异有统计学意义(P＜0.05); (3)顺铂联合PKD阻断剂G(O) 6976处理TC-1细胞24 h后TC-1细胞表面PD-L1的表达为(61.56±3.43)％,顺铂单独处理的TC-1细胞表面PD-L1表达为(79.54±5.09)％,二者比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 顺铂可增加TC-1细胞表面PD-L1的表达,阻断PKD途径可显著抑制顺铂对TC-1细胞表面PD-L1表达增加的程度,顺铂可能是通过PKD途径影响PD-L1表达的.     

低氧微环境与宫颈癌耐药的关系

目的：通过检测低氧诱导因子－1α（ HIF－1α）、多耐药基因1（ MDR1）在人宫颈癌组织、HeLa细胞中的表达及两者间的关系,探讨低氧微环境与宫颈癌耐药的关系。方法应用免疫组化法检测78例中、晚期宫颈癌组织微阵列芯片组织标本中HIF－1α、MDR1的表达;以二氯化钴（ CoCl2）处理HeLa细胞模拟细胞低氧微环境,设置低氧组、常氧组。细胞免疫荧光法检测HIF－1α、MDR1蛋白在HeLa细胞中表达。结果 HIF －1α、MDR1在宫颈癌组织中的阳性表达率分别为69.2％、85.6％,且表达呈正相关（r＝0.348,P＜0.05）。低氧组HeLa细胞HIF－1α、MDR1表达分别为34.76±7.09、57.61±57.61,显著高于常氧组的19.46±3.57、29.57±12.85（P＜0.05）,低氧组HIF－1α与MDR1表达呈正相关（r＝0.315,P＜0.05）。结论低氧微环境与宫颈癌耐药发生有关,可能的机制是HIF－1α促进MDR1的表达从而导致耐药的发生。