应用树胶印模玻片封制法制作寄生虫卵标本

在人体寄生虫学实验教学过程中,传统的寄生虫虫卵实验教学,是将虫卵悬液滴于载玻片上,再覆以盖玻片置于显微镜下观察,即临时滴片法进行。此法对寄生虫卵消耗过大且不能回收。在人体寄生虫的人群感染率日趋下降,虫卵收集已较为困难的现状下,故常采用虫卵玻片封制标本来应对,虫卵封装标本能保存较长时间,重复学习使用可提高寄生虫卵实验教学效率。     

诱导小鼠淋巴细胞表达γ-干扰素的血吸虫成虫可溶性抗原组分

目的分离纯化日本血吸虫成虫可溶性抗原(soluble adult worm antigens,SAWA)各个组分,并分别鉴定其诱导小鼠脾淋巴细胞表达γ-干扰素(IFN-γ)的能力。方法常规制备血吸虫SAWA,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)层析法分离、收集并透析纯化各抗原组分,SDS-PAGE检测分析其含量及相对分子质量(Mr)。常规制备感染42 d小鼠脾淋巴细胞悬液,设立PBS阴性对照组及各组分抗原实验组,分别刺激体外培养的感染小鼠脾淋巴细胞,诱生IFN-γ,用双抗夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组IFN-γ水平,筛选出能诱导IFN-γ高表达的抗原组分。结果获得20种Mr不同且含量较高的SAWA组分抗原,Mr(×10~3)分别为22、23、24、28、40、45、56、62、64、65、68、70、71、74、78、91、95、100、102、105,其电泳图谱均显示为清晰的单一带。各组分抗原均能不同程度地诱导IFN-γ表达,其中Mr(×10~3)为22、24、45、62、64、65的组分抗原诱导IFN-γ的表达量较高,尤其是62×10~3组分抗原诱导表达IFN-γ水平显著高于其他实验组(P＜0．01)。结论电泳层析法能很好地将日本血吸虫成虫可溶性抗原分成多个组分：62×10~3组分抗原具有诱导小鼠脾淋巴细胞高表达IFN-γ的能力,推测它可能是一个很强的Th1型淋巴细胞活性诱导分子。     

系统性硬皮病患者的护理研究

目的:研究护理PSS患者的方法,从而改善临床治疗PSS患者的效果。方法:对患者身体内部微循环进行改善,进行抗炎治疗,帮助患者锻炼肢体;给予热水疗、光疗以及药物治疗,在治疗的同时,进行有效护理干预。结果:皮肤颜色变浅,并逐渐恢复正常;肌肉萎缩以及组织变硬现象得到有效改善,肢体功能逐渐恢复。结论:护理干预可以显著改善PSS患者的生存状态,要重视采用正确方法护理患者。     

日本血吸虫感染新模型小鼠IFN-γ及IL-4 mRNA的动态变化

目的 构建日本血吸虫感染小鼠伴随免疫新模型,通过观察比较新模型小鼠与常规感染小鼠脾细胞诱生Th1细胞因子（γ-IFN）和Th2细胞因子（IL-4）mRNA的动态变化,从分子水平探讨日本血吸虫感染小鼠伴随免疫新模型的细胞免疫机制。方法 小鼠感染日本血吸虫尾蚴20d后,按300 mg/kg.d腹腔注射丙烯基硫脲,持续抑制雌虫产卵,建立日本血吸虫感染小鼠伴随免疫新模型。同时设立常规模型对照组和正常小鼠对照组。在感染后第2,3,6,9和12 w,采用RT-PCR对各组小鼠脾细胞IFN-γ和IL-4的mRNA水平进行半定量检测分析。结果 新模型组与常规模型组小鼠IFN-γ和IL-4 mRNA水平变化趋势基本一致,IFN-γmRNA水平在感染后9w最强,然后逐渐下降,至第12w;IL-4 mRNA水平在感染后3w开始逐渐增强,至12w仍维持高水平。新模型组IFN-γmRNA水平在感染3w后明显高于常规模型组（P〈0.05）;常规模型组IL-4 mRNA水平在感染6w后明显高于新模型组（P〈0.05）。正常小鼠IFN-γ和IL-4 mRNA水平较低,均无明显变化。结论 日本血吸虫感染新模型小鼠与常规模型小鼠的细胞免疫功能变化趋势基本一致,表现为Th1淋巴细胞功能先升高,然后逐渐向Th2淋巴细胞功能极化,提示可溶性虫卵抗原（soluble egg antigen,SEA）不是诱导Th2功能极化的唯一因素,对细胞免疫应答由Th1向Th2功能极化有促进作用。     

别嘌呤醇致重症药疹的护理

别嘌呤醇常用于治疗高尿酸血症、痛风、痛风性肾病，其胃肠道及皮肤等不良反应的发生率约10％，其中药疹约3％。别嘌呤醇致药疹的潜伏期长，病情重，易复发，病死率高，临床主要表现为皮肤不同程度广泛损伤、内脏受累或伴有全身中毒症状。2006年1月至2008年1月，     

日本血吸虫病流行地区人群血清循环抗原和抗体检测的综合分析

目的:观察比较血吸虫循环抗原与循环抗体检测方法的应用效果,为群体化疗后人群提供一条经济可行的综合检测方法。方法:血吸虫肠相关循环抗原(gut-associated Antigens,GAT)检测用Dot-ELISA法,循环抗体检测分别用间接血凝试验(I HA)和环卵沉淀试验(COPT),平行检测血吸虫病疫区人群。结果:在血吸虫病疫区人群212例血清中,Dot-ELISA检测,阳性26例,检出率12.26%。与同时使用的抗体检测法COPT和I HA双阳性检出率(14.15%)无显著差异(P>0.05)。而将Dot-ELISA与COPT或I HA分别组合的双阳性检出率(19.34%)则显著高于COPT+I HA双阳性检出率(14.15%,P<0.05)。结果提示:在血吸虫病流行区普查病人,可先行使用COPT和I HA,在此基础上,再行循环抗原检测,可相互验证结果,节约资金,提高检出率,减少假阳性,较为准确地反映血吸虫病疫情。     

日本血吸虫可溶性虫卵抗原组分的分离与纯化

目的分离和纯化日本血吸虫可溶性虫卵抗原(soluble egg antigens,SEA)各组分。方法常规制备血吸虫可溶性虫卵抗原,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)柱电泳层析仪分离,分别按每管20、60、120 min的流速各收集15管,并经透析纯化符抗原组分,再用SDS-PAGE检测并分析其相对分子质量(Mr)。结果获得40种相对分子质量不同的可溶性虫卵抗原组分,时间流速对蛋白峰的出现和各组份中相对分子质量大小有明显的影响,当流速为20、60、120 min,相对分子质量(×10~3)分别为34.19±4.56、60.35±11.10、91.08±12.75,组间比较差异有统计学意义(F=12.488.P<0.05)。电泳图显示各蛋白峰均为清晰的单一带。结论SDS-PAGE柱电泳层析方法能有效地分离出日本血吸虫可溶性虫卵抗原相对分子质量不同的抗原组分,流速明显影响分离结果。     

刚地弓形虫DXR基因的克隆表达与生物学特性分析

目的 对刚地弓形虫1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构化酶(TgDXR)基因进行克隆、表达、纯化和生物学特性分析。方法 收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取cDNA和基因组DNA;PCR扩增TgDXR的基因片段;构建成熟TgDXR/pET-24b重组原核表达载体;经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导表达。亲和层析纯化重组TgDXR蛋白,并对该蛋白的生物学特性和酶的动力学活性进行分析。结果 从弓形虫RH株的cDNA和基因组DNA中分别扩增出长度为1 542 bp和5 464 bp的TgDXR片段,成功构建重组质粒;SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠杆菌中高效表达。重组蛋白的相对分子量约50 kDa。酶活性实验显示,Mg²⁺、Mn²⁺是最佳金属螯合离子,反应最佳pH值为7.5,该酶活性抑制剂膦胺霉素(Fosmidomycin)对该酶蛋白的IC₅₀为0.52 μmol/L。结论 RH株刚地弓形虫TgDXR可在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有生物学活性,并有望作为弓形虫特异性药物靶标。     

武汉市江夏区山坡街道农村居民肠道寄生虫感染及其危险因素调查

目的 了解武汉市江夏区山坡街道农村居民肠道线虫感染现况和危险因素,为制定有针对性的防治措施提供依据。 方法 按照《全国人体重点寄生虫病现状调查方案》要求,2014年10月于武汉市江夏区山坡街道随机选取农村居民检查粪便中蛔虫、钩虫和鞭虫虫卵,阳性粪便进行感染度评估。设计问卷,随机对9个村中的600名村民进行肠道寄生虫感染情况与危险因素调查。结果 对236名农村居民进行的粪检仅检获钩虫卵,阳性者18例,阳性率为7.63%。对600名居民进行肠道寄生虫感染情况及危险因素调查显示,疑似蛔虫感染、钩蚴性皮炎、钩虫感染和鞭虫感染者分别为397、355、295例和145例。Logistic 回归分析显示,居民疑似蛔虫感染的危险因素包括未坚持便后洗手、农家肥与化肥混合使用和干农活时不常穿鞋,保护因素包括知道蛔虫感染途径、不使用新鲜粪便施肥;疑似钩虫感染的危险因素包括饮用水源为井水和池塘水、捡食掉在地上的食物、农家肥与化肥混用、一块砧板切菜时不洗砧板,保护因素包括饮用水源为自来水和井水、知道蛔虫感染途径、有时用或不用新鲜粪便施肥;疑似鞭虫感染的危险因素有捡食掉在地上的食物。 结论 武汉市江夏区山坡街道农村居民钩虫感染率较高,并存在肠道寄生虫感染的危险因素。应加强开展健康教育工作,提高农村居民的自我防护意识;同时应定期检查,积极进行驱虫治疗,以有效控制肠道寄生虫病的传播与流行。