ECT2在宫颈癌组织中的表达及对预后的影响

目的：了解上皮细胞转化序列2(ECT2)在宫颈癌组织与癌旁组织中的表达水平差异及其临床意义。方法：利用Oncomine数据库分析ECT2在宫颈癌组织和癌旁组织中的表达水平,GEPIA软件分析ECT2表达水平与预后的关系。免疫组织化学染色分析ECT2在宫颈癌组织和癌旁组织中的蛋白表达水平及其与临床病理特征的关系。构建ECT2过表达的Hela细胞和ECT2敲降的Siha和C33a细胞。划痕实验检测细胞迁移能力。结果：与癌旁组织相比,宫颈癌组织的ECT2的mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.001);ECT2与宫颈癌患者病理分级相关(P<0.05),且ECT2高表达的宫颈癌患者预后更差;ECT2促进宫颈癌细胞迁移。结论：ECT2在宫颈癌组织中表达水平较癌旁组织更高,通过促进宫颈癌细胞迁移而影响宫颈癌患者的预后。     

ECT2基因对宫颈癌细胞增殖的影响及其机制

目的 探讨ECT2基因对宫颈癌细胞增殖的影响及其机制。方法 构建ECT2过表达及敲低的宫颈癌细胞株,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期。IPA软件查找ECT2的相互作用蛋白,免疫荧光亚细胞定位验证两者间的关系。qPCR及Western blot检测mRNA及蛋白的表达情况。结果 ECT2可能与CDK1相互作用,促进细胞由G₂期进入G₁期,促进细胞增殖。ECT2过表达后宫颈癌细胞中Rac1、Cdc42、CDK1、CyclinB1 mRNA及蛋白的表达水平均升高（均P<0.001）;敲低则作用相反（P<0.05）。结论 ECT2可能通过下游Cdc42/Rac1信号通路,同时与CDK1相互作用促进细胞周期G2向G1转化,进而促进宫颈癌细胞增殖     

HPV16-E6上调MIF对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 检测人乳头瘤病毒16型的致癌基因E6（HPV16-E6）通过巨噬细胞移动抑制因子（MIF）对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 用HPV16-E6过表达和干扰质粒转染能分泌MIF的人宫颈癌细胞C33A、SiHa和Caski。Western blot和荧光定量PCR法检测MIF蛋白和mRNA表达,并用ELISA法检测培养上清液中MIF蛋白量;将转染后的宫颈癌细胞与人巨噬细胞非接触性共培养,检测巨噬细胞中MIF表达;C33A转染HPV16-E6后加或不加MIF抑制剂,CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖、周期和凋亡情况;采用Pearson相关分析法分析HPV16-E6和MIF间的关系、Kaplan-Meier分析HPV16-E6对患者生存率的影响。结果 癌细胞、上清液和巨噬细胞中MIF表达随HPV16-E6表达而上调（P<0.05）;HPV16-E6过表达可诱导C33A细胞增殖、减少G0/G1期细胞和抑制细胞凋亡;抑制MIF后,细胞增殖率下降、 凋亡率增加（P<0.05）;HPV16-E6表达与MIF正相关（P<0.05）,Kaplan-Meier分析显示HPV16-E6表达与患者总生存率和无进展生存率有关（P<0.05）。结论 HPV16-E6可诱导宫颈癌细胞及其微环境中巨噬细胞MIF表达,并可通过MIF诱导宫颈癌细胞增殖和抑制细胞凋亡而影响宫颈癌的预后。