大鼠心肌纤维化模型MR T2WI成像的实验研究

目的：应用心脏磁共振成像技术（cardiac magnetic resonance imaging,CMR）分析大鼠心肌纤维化模型的影像学特征,探索心肌纤维化MR T2WI成像表现及病理学改变的相关性。方法：选取50只SD大鼠,随机选取40只皮下注射5 mg/kg异丙肾上腺素10 d建立心肌纤维化模型,10只皮下注射同剂量生理盐水10 d作为对照组。造模成功后,模型组分为3组,分别于第5、7、9天应用7.0 T磁共振设备,进行活体成像扫描,对照组于第7天进行扫描,并计算对比信噪比（contrast noise ratio,CNR）。扫描完成后处死大鼠进行HE及Masson染色,观察心肌组织结构变化并计算胶原容积分数（collagen volume fraction,CVF）。结果：模型组36只,对照组10只纳入统计学分析,磁共振显示5 d模型组磁共振图像CNR(5.84±1.28),7 d模型组CNR(15.26±1.93),9 d模型组CNR(9.37±1.67),与对照组（3.56±0.93）差异具有统计学意义（P<0.01）。MR T2WI成像7 d模型组与对照组相比,左心...     

原肌球蛋白4抗体靶向动脉粥样硬化合成型血管平滑肌细胞体内磁共振成像的实验研究

目的 观察合成型血管平滑肌细胞(VSMC)标记蛋白原肌球蛋白4(TPM-4)在动脉粥样硬化斑块形成过程中的表达变化及分布，探讨靶向合成型VSMC体内MRI的可行性。方法 选择雄性载脂蛋白E(apoE^-/-)小鼠45只为实验组(高脂饲料喂养),雄性6周龄C57BL/6小鼠25只为对照组(普通饲料喂养)。2组小鼠分别于不同时间点取腹主动脉进行苏木精-伊红、免疫组织化学及Masson染色。从实验组随机选取建模成功apoE^-/-小鼠各10只分别为靶向探针组[anti-TPM-4-单纯超微超顺磁性氧化铁纳米颗粒(USPIO)]及单纯USPIO组，在探针注射前及注射24 h后采用7.0 T磁共振采集腹主动脉图像，观察信号变化，扫描完成后取腹主动脉标本进行病理学验证。结果 对照组小鼠无斑块形成，实验组小鼠不同时间点斑块内均可见TPM-4表达，阳性表达主要在斑块周围及胶原纤维分布区域。斑块内TPM-4和胶原纤维阳性面积与斑块面积呈正相关(r=0.875,P<0.01;r=0.811,P<0.01)。靶向探针组腹主动脉斑块T₂...     

靶向Rho激酶1纳米探针联合MRI可视化动脉粥样硬化斑块的实验研究

目的 评估Rho激酶(Rho-kinase, ROCK)1在动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)斑块中的表达,合成ROCK1靶向探针,并探索其可视化AS斑块的可行性。材料与方法 ROCK1抗体与超小超顺磁性氧化铁纳米颗粒偶联制备靶向探针(Fe₃O₄@PEG-ROCK1)并表征。高脂喂养载脂蛋白E基因敲除(Apolipoprotein-Edeficient, ApoE^-/-)小鼠,在10、16、22、28、34周随机取小鼠(n=5)测量体质量。主动脉免疫染色切片及蛋白印迹实验观察ROCK1的表达及活性。将34周ApoE^-/-小鼠分成两组,一组尾静脉注射Fe₃O₄@PEG(n=10),一组尾静脉注射Fe₃O₄@PEG-ROCK1(n=10),注射探针前及注射后8、16 h进行MRI。Image J软件计算斑块信号。病理分析腹主动脉标本。结果 Fe₃O₄@P...     

肌腱蛋白X和肌腱蛋白C及转化生长因子β表达与心肌纤维化形成的相关性分析

目的 观察肌腱蛋白(TN)-X、TN-C及转化生长因子β(TGF-β)在心肌纤维化过程中的表达变化及其与纤维化严重程度的相关性。方法 选择雄性SD大鼠48只,随机分为模型组43只和对照组5只。模型组建立心肌纤维化模型,采用Masson染色观察心肌组织基本结构,计算胶原容积分数(CVF),采用免疫组织化学法检测心肌中TN-X、TN-C及TGF-β表达。结果 与对照组比较,模型组建模后2、5、8、11、14 d CVF明显升高[(19.13±2.83)%、(21.43±1.45)%、(26.68±2.36)%、(30.69±1.01)%、(30.87±0.73)%vs(2.36±0.29)%,P<0.01]。模型组建模后5、8、11 d CVF呈上升趋势(P<0.05)。免疫组织化学显示,模型组建模后5、8、11、14 d TGF-β和TN-X及2、5、8 d TN-C表达明显高于对照组(P<0.05,P<0.01)。TGF-β、TN-X与CVF呈正相关(r_s=0.701,r_s=0.752,P<0.01);TN-X与...     

磁共振靶向成像检测心肌纤维化大鼠模型中TGF-β1表达的实验研究

目的 构建载转化生长因子-β1 (transforming growth factor beta-1, TGF-β1)的超小超顺磁性氧化铁（ultrasmall supperparamagneticironoxide,USPIO）靶向探针（USPIO-anti-TGF-β1）,探究其表征及磁共振成像（magneticresonance imaging, MRI）靶向检测大鼠心肌纤维化（myocardial fibrosis, MF）模型中TGF-β1表达的可行性。材料与方法 选择40只雄性SD大鼠,其中30只采用异丙肾上腺素（isoprenaline, ISO）皮下注射法建立MF模型,另外10只作为健康对照组。通过超声评估大鼠模型建立情况。将造模成功的30只大鼠随机分为实验组、单纯对照组及空白对照组,每组10只;构建USPIO-anti-TGF-β1靶向探针,通过尾静脉注入实验组大鼠体内,单纯对照组及空白对照组分别注入相同剂量的USPIO和生理盐水,并于注射12 h后行T2*序列扫描。扫描完成后取大鼠心肌标本行病理学分析。采用独立样本t检验对给药前后的MRI信号强度变化进行分析。结果 ...     

Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1在动脉粥样硬化血管壁中的表达及其与基质金属蛋白酶2及转化生长因子1的相关性

目的 研究Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)在动脉粥样硬化血管壁中的表达及其与基质金属蛋白酶2(MMP2)、转化生长因子1(TGF-β1)的相关性。方法 选择30只载脂蛋白E基因敲除小鼠为实验组,高脂饲料喂养,另选30只C57BL/6小鼠为对照组,普通饲料喂养。在喂养的第10、16、22、28及34周,取眼球血监测小鼠血脂水平;取小鼠腹主动脉作为标本,包埋切片并进行苏木精-伊红染色观察血管壁形态;应用免疫组化染色观察血管壁中ROCK1、MMP2、TGF-β1的表达;使用Image Pro Plus 6.0软件测量切片中血管壁厚度、斑块面积、血管壁中ROCK1、MMP2及TGF-β1的表达量。采用SPSS 27.0统计软件进行数据分析。采用单因素方差分析进行组间比较,两两比较采用Tukey检验。采用Pearson相关与线性回归分析ROCK1与血管壁厚度及斑块面积、MMP2、TGF-β1的关系。结果 成功建立动脉粥样硬化小鼠模型。在喂养第10、16、22、28及34周,实验组血脂水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。自喂养第16周起,实验组小鼠血管内均有斑块形...