宫颈永生化细胞和癌细胞的α、β、γ-微管蛋白比较分析

目的：探讨中心体α、β、γ-微管蛋白在人鳞状上皮宫颈永生化细胞（H8细胞株）和癌细胞（Caski细胞株）的表达差异及其在宫颈癌发生发展过程中的作用。方法：采用免疫细胞化学sP法检测中心体α、β-微管蛋白在人宫颈永生化细胞和癌细胞中的表达差异,提取两株细胞的骨架蛋白并用Western blotting对α、β、γ-微管蛋白的表达水平进行半定量分析。结果：Caski细胞中α、β-微管蛋白表达水平高于H8细胞,差异均有统计学意义（P〈0．05）。半定量分析α、β、γ-微管蛋白,Caski细胞中的表达量高于H8细胞。结论：中心体异常可能是宫颈癌细胞恶性表型的特征之一,以中心体微管蛋白为治疗靶点的研究有着可期待的前景。     

宫颈永生化细胞和癌细胞的胞浆差异蛋白组学研究

目的:对HPV-16阳性的H8细胞株(宫颈上皮永生化细胞)和Caski细胞株(宫颈癌细胞)胞浆蛋白进行双向电泳和质谱分析,寻找与宫颈癌相关的特异性差异蛋白质.方法:采用双向凝胶电泳(2-dimensronal gel electrophoresis,2-DE)和基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(Matrix-assisted laser,desorption/ionization time-of-flight tandem mass spectrometry,MALDI-TOF-MS/MS)以及SWISS-PROT数据库,对H8和Caski细胞胞浆蛋白进行比较,找出差异蛋白质.结果:通过对宫颈永生化细胞和癌细胞胞浆蛋白2-DE图谱比较和质谱分析,初步鉴定出6个差异蛋白,它们分别为STK3、TRAF5、SLOOP、IKKb、CDK6、TAF2,其中S100P、IKKb、CDK6、TAF2、TRAF5这5种蛋白质在宫颈癌细胞胞浆中高表达,STK3蛋白质在宫颈癌细胞胞浆中表达缺失.结论:初步发现STK3、TRAF5、SLOOP、IKKb、CDK6、TAF2蛋白质在宫颈癌前病变和宫颈癌细胞胞浆中存在差异表达,通过对其功能的了解研究为宫颈癌前病变向癌转变机制的探讨、特异性肿瘤标志物的寻找提供实验依据.     

宫颈永生化细胞和癌细胞胞膜差异蛋白质组学研究

目的建立HPV-16阳性的宫颈上皮永生化细胞（H8细胞株）和宫颈癌细胞（CaSKi细胞株）胞膜蛋白双向电泳图谱,寻找特征性的差异蛋白点。方法提取两种细胞胞膜蛋白质进行双向凝胶电泳（2-dimensronal gel electrophore-sis,2-DE）,建立电泳图谱,然后筛选出差异点进行基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱（matrix-assisted laser desorption/i-onization time-of-flight tandem mass spectrometry,MALDI-TOF-MS/MS）分析,鉴定出蛋白质。结果获得了分辨率和重复性均较好胞膜蛋白2-DE图谱,并分析找出了13个的差异蛋白点,对其中3个显著差异点进行质谱分析和初步鉴定。结论建立了H8和Caski细胞胞膜蛋白2DE图谱,并初步发现LRC8D、EDAR、MTX1蛋白在宫颈癌前病变和宫颈癌细胞胞膜中存在差异表达,为宫颈癌及癌前病变的诊断及癌变机制提供了帮助。     

B细胞非霍奇金淋巴瘤患者治疗后发生间质性肺炎的临床分析

目的 探讨B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者治疗后发生间质性肺炎(IP)的临床病理特征、相关因素及治疗转归。方法 收集2015年1月至2020年10月1163例B细胞NHL患者的临床病理资料,其中94例发生IP(病例组),另随机抽取未发生IP的95例患者作为对照组。主要治疗方案包括R-CHOP、CHOP、R-CDOP和CDOP。归纳总结IP治疗转归,并采用Logistic回归模型分析影响IP发生的因素。结果 B细胞NHL患者治疗后IP的发生率为8.1%(94/1163)。单因素分析显示,年龄,心肺基础疾病,IPI评分,结外侵犯部位数量,应用含利妥者单抗(RTX)和聚乙二醇脂质体阿霉素(PLD)的方案,治疗前后乳酸脱氢酶(LDH)、红细胞沉降率(ESR)和中性粒细胞绝对值的变化与IP的发生有关(P<0.05); Logistic多因素分析显示,应用含RTX的方案,治疗前后LDH和ESR水平变化以及IPI评分是影响IP发生的独立因素(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,治疗前后LDH变化预测IP发生的曲线下面积(AUC)为0.584,灵敏度和特异度分别为66....     

枳椇水提物对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的相关机制研究

目的:探究枳椇水提物对对乙酰氨基酚致小鼠急性肝损伤的相关机制。方法:采用对乙酰氨基酚建立小鼠急性肝损伤模型,将大鼠分为正常组、对乙酰氨基酚(APAP)组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组,枳椇水提物低、中、高剂量组,计算各组小鼠的肝脏指数及肝质比指数;全自动生化仪检测血清ALT、AST、ALP水平变化;HE染色法观察小鼠肝组织病理学变化的影响;TUNEL法检测肝细胞凋亡情况;免疫组化法检测Bax、Bcl-2相关蛋白的表达;Westernblot检测Csapase-3、Caspase-9蛋白表达水平。结果:与正常组比较,APAP组小鼠肝脏重量及肝指数显著升高(P<0.01),ALT、AST、ALP水平显著升高(P<0.05),呈现明显肝组织病理损伤,TUNEL阳性细胞数升高(P<0.05),Bax蛋白表达上调(P<0.05),Bcl-2蛋白表达下调(P<0.05);与APAP组比较,枳椇水提物低、中、高剂量组小鼠肝脏重量及肝指数降低(P<0.05),ALT、AST、ALP水平显著降低(P<0.05),肝组织损伤、炎症细胞浸润明显减轻,肝组织坏死区域明显减少,TUNEL阳性细胞数减少(P<0.05),Bax蛋白表达下调(P<0.05),Bcl-2蛋白表达上调(P<0.05),Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:枳椇水提物对APAP致小鼠急性肝损伤有保护作用,其作用机制可能与抑制肝细胞凋亡,下调促凋亡蛋白Bax的表达,上调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。     

宫颈永生化细胞和癌细胞的胞质蛋白双向电泳图谱的建立及初步分析

目的:建立HPV-16阳性的宫颈上皮永生化细胞(H8细胞株)和宫颈癌细胞(CaSKi细胞株)胞质蛋白双向电泳图谱,并初步分析找出特征性的差异蛋白点.方法:分别培养H8和CaSki细胞,用亚细胞结构蛋白质提取试剂盒提取胞质蛋白进行双向电泳,用ImageMaster 2D V2002.1图像分析软件分析电泳图谱,筛选差异蛋白点.结果:获得了分辨率和重复性均较好的宫颈永生化细胞和癌细胞胞质蛋白2-DE图谱,并分析找出了显著的差异蛋白点8个,其中3种蛋白质在宫颈癌细胞株表达上调,1种蛋白质表达明显下调,2种蛋白质在宫颈癌细胞株表达缺失,2种蛋白质在永生化细胞株表达缺失.结论:应用亚细胞蛋白双向凝胶电泳技术对HPV-16阳性的宫颈癌前和癌变的胞质蛋白分析,能有效找出蛋白质表达差异点,为进一步确定宫颈癌前病变和癌细胞的关键性差异蛋白质的结构和功能奠定了基础.     

宫颈永生化细胞和癌细胞的亚细胞蛋白质组学初步研究

目的通过蛋白质双向凝胶电泳方法（2-DE）建立人类乳头状瘤病毒．16阳性的宫颈上皮永生化细胞（H8细胞株）和宫颈癌细胞（Caski细胞株）亚细胞（细胞质、细胞膜、细胞核）蛋白电泳图谱,进行差异蛋白质组学研究筛选差异蛋白点。方法分别对H8和Caski细胞提取细胞质、细胞膜和细胞核蛋白,通过2-DE筛选出差异点进行基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱（MALDI-TOF-MS／MS）分析。结果对H8细胞和Caski细胞亚细胞蛋白双向电泳图谱比较,初步比较筛选了6种细胞质差异蛋白点、3种细胞膜差异蛋白点和9种细胞核差异蛋白点。结论通过对HPV-16阳性的宫颈癌前和癌变的亚细胞结构差异蛋白进行分析,为寻找宫颈癌特异性肿瘤标志物和靶向治疗提供实验依据。     

P21及CDK6与宫颈鳞状细胞癌的关系

目的 观察P21、CDK6在宫颈鳞状细胞癌中的表达情况,探讨其与宫颈鳞状细胞癌的关系.方法 采用免疫组织化学ABC法检测100例宫颈鳞状细胞癌、20例宫颈上皮内瘤变(CIN)及20例正常宫颈组织中P21及CDK6的表达情况,分析他们与癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期的关系.结果 宫颈鳞状细胞癌组织的P21及CDK6表达率均明显高于CIN组及正常组;P21的低表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床分期(P＜0.05)有关,与肿瘤分化程度(P＞0.05)无关;CDK6的高表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期(P＜0.05)均有关.结论 P21及CDK6表达异常可能在宫颈鳞状细胞癌的发生、发展中起重要作用;且二者对判断宫颈鳞状细胞癌的预后有一定意义.