门静脉高压症鼠内脏和血管中环加氧酶的表达

目的研究门静脉高压症鼠血浆前列环素(PGI2)水平、血管和小肠中环加氧酶(COX)基因表达以及内脏血流动力学的变化,探讨PGI2、COXmRNA表达与门静脉高压症高血流动力学之间的关系。方法20只雄性SD大鼠随机分成肝内型门静脉高压症组(IHPH,n=7)、肝前型门静脉高压症组(PHPH,n=7)和假手术组(SO,n=6),同位素微球技术行内脏血流动力学研究,并采取股动脉血行血浆六-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)浓度测定;RT-PCR法半定量测定血管和小肠标本中COXmRNA表达。结果IHPH、PHPH组均具有内脏血流量增加、内脏血管阻力降低等高血流动力学特征;IHPH、PHPH组血浆6-keto-PGF1α及胸主动脉、肠系膜上动脉和小肠COX-1mRNA的表达均显著高于SO组(P<0.05),且其浓度或表达情况均与内脏血流量(PVI)、内脏血管阻力(SVR)和门静脉压力(FPP)显著相关(P<0.05)。结论门静脉高压症时内脏、血管组织中COXmRNA表达和血浆6-keto-PGF1α浓度与内脏血流动力学变化显著相关。     

门静脉高压症鼠内脏和血管中环加氧酶的表达

目的研究门静脉高压症鼠血浆前列环素(PGI2)水平、血管和小肠中环加氧酶(COX)基因表达以及内脏血流动力学的变化,探讨PGI2、COXmRNA表达与门静脉高压症高血流动力学之间的关系.方法20只雄性SD大鼠随机分成肝内型门静脉高压症组(IHPH,n=7)、肝前型门静脉高压症组(PHPH,n=7)和假手术组(SO,n=6),同位素微球技术行内脏血流动力学研究,并采取股动脉血行血浆六-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)浓度测定;RT-PCR法半定量测定血管和小肠标本中COXmRNA表达.结果IHPH、PHPH组均具有内脏血流量增加、内脏血管阻力降低等高血流动力学特征;IHPH、PHPH组血浆6-keto-PGF1α及胸主动脉、肠系膜上动脉和小肠COX-1mRNA的表达均显著高于SO组(P<0.05),且其浓度或表达情况均与内脏血流量(PVI)、内脏血管阻力(SVR)和门静脉压力(FPP)显著相关(P<0.05).结论门静脉高压症时内脏、血管组织中COXmRNA表达和血浆6-keto-PGF1α浓度与内脏血流动力学变化显著相关.     

Smad2特异性siRNA对大鼠抗肝纤维化的作用

目的探讨大鼠体内Smad2特异性siRNA的抗肝纤维化作用。方法肝纤维化大鼠模型,尾静脉注射pEGFP-Cl-CR4质粒转染大鼠肝脏。8周后应用RT-PCR和Westernblot技术检测肝脏Smad2mRNA和蛋白的表达情况,同时检测肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量。结果pEGFP-Cl-CR4克隆转染肝脏组织中,Smad2基因和蛋白表达受到明显的抑制;Hyp含量与各对照组比较显著下降(P<0.05)。结论在体内实验中,载体表达的特异性siRNA可以有效地抑制肝脏组织中Smad2的表达,阻断TGF-β对肝星状细胞的激活,使胶原分泌下调。     

NOS和COX抑制剂对PHT鼠COX表达和血流动力学的影响

目的 探讨在门静脉高压症高动力循环发生发展中前列环素（PGI2）的作用以及一氧化氮（NO）和PGI2之间的关系。方法 将肝内型门脉高压（IHPH）、肝前型门脉高压（PHPH）和手术对照（SO）三组大鼠模型,分别使用生理盐水、长短期N-硝基-L-精氨酸（L-NNA）和长短期吲哚美辛（INDO）治疗后,行血流动力学研究,采取股动脉血行血浆6-keto-PGF1α和NO2^-／NO3^-浓度检测,并测定内脏和血管组织中COXmRNA的表达。结果 与生理盐水对照组比较,长短期应用L-NNA和INDO均能显著改善门脉高压鼠的高动力循环状态（P〈0．05）,并显著降低血浆6-keto—PGF1α和NO2^-／NO3浓度（P〈0.05）;应用L—NNA长期较短期的内脏血流动力学明显改善（P〈0．05）,但内脏和血管组织COX—1mRNA表达增加和血浆6-keto—PGF1α浓度明显升高（P〈0．05）;应用INDO长期与短期比较,内脏血流动力学仍呈现高血流动力学状态（P〈0．05）,血浆NO2^-／NO3^-浓度显著性升高（P〈0．05）。结论在门静脉高压症高动力循环中PGI,和NO之间存在相互作用,其高血流动力学状态主要与NO有关。     

NOS和COX抑制剂对PHT鼠COX表达和血流动力学的影响

目的探讨在门静脉高压症高动力循环发生发展中前列环素(PGI2)的作用以及一氧化氮(NO)和PGI2之间的关系.方法将肝内型门脉高压(IHPH)、肝前型门脉高压(PHPH)和手术对照(SO)三组大鼠模型,分别使用生理盐水、长短期N-硝基-L-精氨酸(L-NNA)和长短期吲哚美辛(INDO)治疗后,行血流动力学研究,采取股动脉血行血浆6-keto-PGF1α和 NO-2/NO-3浓度检测,并测定内脏和血管组织中COXmRNA的表达.结果与生理盐水对照组比较,长短期应用L-NNA和INDO均能显著改善门脉高压鼠的高动力循环状态(P<0.05),并显著降低血浆6-keto-PGF1α和NO-2/NO-3浓度(P<0.05);应用L-NNA长期较短期的内脏血流动力学明显改善(P<0.05),但内脏和血管组织COX-1mRNA表达增加和血浆6-keto-PGF1α浓度明显升高(P<0.05);应用INDO长期与短期比较,内脏血流动力学仍呈现高血流动力学状态(P<0.05),血浆NO-2/NO-3浓度显著性升高(P<0.05).结论在门静脉高压症高动力循环中PGI2和NO之间存在相互作用,其高血流动力学状态主要与NO有关.     

特异性siRNA抑制肝星状细胞Smad2表达

目的构建Smad2特异性siRNA表达克隆,探讨其在肝星状细胞(HSCs)中是否能够有效地抑制Smad2的表达。方法利用生物软件进行Smad2mRNA二级结构模拟,选择合适的靶位点,使用pBSKU6载体表达Smad2特异性siRNA,在体外转染HSC鄄T6细胞株,应用RT鄄PCR和Western鄄blot技术检测Smad2mRNA和蛋白的表达情况。结果成功构建siRNA表达克隆,转染后Smad2在基因和蛋白的表达水平均受到了明显抑制。在构建成功的4个克隆中,CR4抑制mRNA表达最为显著,达90%以上;抑制蛋白表达率也达到80%左右。同时CR1和CR4能有效地下调HSC分泌Ⅲ型胶原。结论在体外实验中,载体表达的特异性siRNA可有效地抑制HSCs中Smad2的表达,并可对激活的HSCs分泌细胞外基质产生有益的影响。     

门静脉高压症动脉血管低反应分子机制研究进展

全身和内脏的高血流动力循环 (心输出量增加 ,内脏充血 ,外周血管阻力下降 )在维持和加重门静脉高压症 (portalhypertension ,PHT)中起极为重要的作用[1] 。而动脉血管对内源性收缩物质如去甲肾上腺素、血管加压素、血管紧张素 -Ⅱ、内皮素 -Ⅰ等低反应导致的内脏小动脉扩张是PHT高血流动力循环的重要发病因素[2 ] ,虽然动脉低反应推测与受体下调和 /或脱敏及过量生成的内源性舒血管物质有关 ,但门静脉高压症时动脉血管平滑肌低反应的分子机制还不十分清楚。现就门静脉高压症时动脉血管平滑肌低反应的分子机制从内源性血管活性物质受体水…     

Smad2特异性siRNA对大鼠抗肝纤维化的作用

目的探讨大鼠体内Smad2特异性siRNA的抗肝纤维化作用.方法肝纤维化大鼠模型,尾静脉注射pEGFP-C1-CR4质粒转染大鼠肝脏.8周后应用RT-PCR和Westernblot技术检测肝脏Smad2mRNA和蛋白的表达情况,同时检测肝脏组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量.结果pEGFP-C1-CR4克隆转染肝脏组织中,Smad2基因和蛋白表达受到明显的抑制;Hyp含量与各对照组比较显著下降(P<0.05).结论在体内实验中,载体表达的特异性siRNA可以有效地抑制肝脏组织中Smad2的表达,阻断TGF-β对肝星状细胞的激活,使胶原分泌下调.