红毛五加多糖中单糖组成的气相色谱分析

目的:研究红毛五加多糖的单糖组成以及它们的物质的量之比。方法:多糖经三氟醋酸水解后,采用糖腈乙酰酯气相色谱法,利用OV-1毛细管柱分析单糖组成。采用相对校正因子法测定多糖中单糖的物质的量之比。结果:AHP-I含有阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其物质的量之比为0.32:0.45:0.20:1.00:0.67;AHP-II含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其物质的量之比为:1.83:5.09:0.79:1.00:5.61;AHP-III含有鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其物质的量之比为:4.63:3.79:1.53:1.05:1.00:3.90。结论:红毛五加的三种多糖AHP-I、AHP-II和AHP-III均由多种单糖构成。OV-1型毛细管柱可用于红毛五加多糖的单糖组成分析。     

5-氟尿嘧啶-花生凝集素结合物的制备与结合率测定

采用碳二亚胺法将经过羧基化衍生的5-氟尿嘧啶连接到花生凝集素上,制备一种导向肿瘤的5-氟尿嘧啶-花生凝集素结合物,并应用改进的三硝基苯磺酸法测定药物结合率。测得的药物结合率为76.33%。结果表明碳二亚胺法可成功实现药物与花生凝集素的连接,该法制备得到的结合物其药物结合率高。     

α-苦瓜素和PEG-α-苦瓜素抑制绒癌JAR细胞迁移和侵袭的研究

目的 考察α-苦瓜素(α-MMC)对绒癌JAR细胞体外迁移侵袭行为的影响及其聚乙二醇(PEG)修饰物保留这一活性的程度.方法 利用分子量为20 kDa的聚乙二醇氨基酸衍生物[(mPEG)2-Lys-NHS]以共价连接的方式对α-MMC分子表面进行修饰.采用MTT法、细胞黏附试验、划痕损伤试验、transwell法和明胶...     

苦瓜蛋白MAP30的HLA-A2/A3限制性CTL表位预测

目的:预测苦瓜蛋白MAP30的HLA - A2/A3限制性CTL表位.方法:应用lasergene 7.0和NetCTL-1.2 Server对MAP30进行HLA - A2 /A3限制性CTL表位预测.结果:MAP30的二级结构含有8个α-螺旋和9个β-折叠股;柔韧性良好氨基酸区域为19-40、99-146、166-273;亲水性指数较高区域为22-45、97-114、117-148、180-198、224-257、265-275;抗原性指数较高区域为19-28、63-71、98-114、118-123、224-246、248-260、262-274;有30个可能CTL表位,综合分析后获得2个HLA - A2和5个HLA - A3限制性CTL表位.结论:MAP30具有潜在的7个HLA-A2/A3限制性CTL表位.     

药用真菌马勃多糖中单糖组成GC-MS分析

目的:研究马勃多糖的单糖组成及其物质的量之比.方法:马勃多糖经三氟醋酸水解,糖腈乙酰酯衍生化后,利用GC-MS法分析单糖组成,相对校正因子法测定单糖的物质的量之比.结果:马勃的三种多糖CGPⅠ-1、CGP-Ⅱ和CGP-Ⅲ均含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖,各单糖对应物质的量之比分别为1.22∶11.28∶3.92,1.74∶26.45∶0.36,1.06∶9.90∶3.29.此外,CGP-Ⅲ还含有一种未知单糖,由于无相应标糖无法确定其成分.结论:马勃的三种多糖均由多种单糖构成.Rtx-5silms柱可用于马勃多糖的单糖组成分析.     

聚乙二醇修饰对苦瓜核糖体失活蛋白的肝细胞毒性影响

【摘要】 目的建立体外分离、培养人羊膜上皮细胞(hAECs)的方法,研究其向雌性生殖细胞转分化的潜能。方法体外分离、培养并鉴定hAECs后,采用添加5%人卵泡液的培养基作为诱导剂,倒置显微镜下观察细胞形态的改变,化学发光免疫技术检测培养基中雌二醇(E2)含量的变化,应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)、Western blot等方法检测雌性生殖细胞相关基因及蛋白表达水平的变化。结果体外培养hAECs呈多角形,具有上皮细胞特有的铺路石样外观,并表达其特异性细胞角蛋白19(CK19),同时能表达胚胎干细胞(ESC)特异的转录因子POU5f1转录因子4(Oct-4)。采用添加5%人卵泡液的培养基诱导14d后,对照组大部分细胞仍保持上皮细胞的多角形态,而诱导组细胞融合呈集落样生长。E2含量检测结果显示,对照组无E2生成,而诱导组E2水平从第8d开始增加,至第10d达到高峰,然后下降。RT-PCR、Western blot结果表明,诱导组生殖细胞特异性基因生长分化因子9(GDF9)、无精症缺失基因(DAZL)的mRNA表达水平明显升高(P<0.05),而联会复合体蛋白3(SCP3)的mRNA表达水平无明显升高(P>0.05),DAZL的蛋白表达水平亦明显增加(P<0.05)。结论人卵泡液可在体外诱导hAECs向雌性生殖细胞方向转分化。     

α苦瓜素对大鼠长期毒性实验的血液学指标分析

目的探讨长期毒性实验中α苦瓜素（α-MMC）对大鼠的血液学影响。方法将SD大鼠随机分为生理盐水对照组、α苦瓜素各剂量组（6.25,2.08,0.70mg/kg）,隔日经尾静脉注射给药一次,连续28天,停药后恢复14天,分别在给药期末和恢复期末进行血液常规检查、流式细胞分析和骨髓象检查。结果连续给予大鼠α苦瓜素28天后,随着剂量的增加,WBC、LYM、RBC、HGB逐渐减少,NEU和PLT则逐渐增多。经过14天的恢复期,各血液学指标的异常变化有所改善。结论长期给予α-MMC会引起大鼠以血细胞数量变化为主的血液学毒性变化。     

苦瓜籽α-苦瓜素的分离纯化及其生物活性的研究

目的 建立一种快速、高效制备α-苦瓜素的方法,并初步研究其部分生物活性.方法 用硫酸铵分级沉淀、SP-Sepharose FF离子交换层析、Sephacryl S-100分子筛层析以及Macrocap SP离子交换层析等方法,从苦瓜籽中纯化出苦瓜蛋白(α-MMC);通过MTT实验,研究了α-MMC的抗肿瘤活性;测定HepG2.2.15 cell的培养上清液中HBsAg和HBeAg的含量,研究了α-MMC的抗HBV活性.结果 与结论α-MMC具有抑制HBV和肿瘤细胞增殖的作用,呈时效和量效依赖性.     

兰州地区1213株细菌培养分析研究

１２１３株细菌培养分析结果表明革兰氏阴性菌有不断上升趋势。在各种细菌的构成比中，肠杆菌科和非发酵菌二者达到５７．７９％；在血液、尿液、胸、腹水和胆汁等临床标本中均以肠杆菌科细菌占优势；在痰、咽拭子、脓及病灶分泌物、前列腺液、脑脊液和穿刺液等标本中以葡萄球菌占优势；在粪便标本中以福氏志贺氏菌占优势，福氏志贺氏菌亚型以２ａ、１ｂ、２ｂ、ｌａ型所占比例较大。条件致病菌逐渐转化为常见菌，混合感染也占有一定比例，应引起足够的重视。     

抗α-苦瓜素单克隆抗体的制备与鉴定

用α-苦瓜素(α-MMC)免疫小鼠(BALB/c),分离免疫脾细胞,采用聚乙二醇(PEG)法将免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,筛选出分泌抗α-MMC素的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株;采用小鼠体内诱生法制备腹水,Mabselect亲和层析纯化McAb,所得McAb经亚类鉴定为IgG2b亚类,通过间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot检测,所得McAb与α-MMC特异反应,与相同来源的MAP30无交叉反应,为深入研究α-MMC的结构与功能提供了检测手段。