无标记检测CD4~+T淋巴细胞的免疫传感器构建

目的构建一种无标记检测CD4~+T淋巴细胞的免疫传感器。方法采用葡萄球菌A蛋白(SPA)法定向固定单克隆抗体于金叉指微阵列电极表面以捕获CD4~+T淋巴细胞,并用循环伏安法(CV)扫描对金叉指微阵列电极表面的修饰情况进行表征,最后通过电化学交流阻抗谱法(EIS)对免疫传感器捕获的CD4~+T淋巴细胞进行阻抗检测,通过等效电路拟合获得的阻抗值变化绘制标准曲线。结果该免疫传感器检测CD4~+T淋巴细胞的线性范围是(5.0×103-5.0×106)/mL,检测下限为5.0×102/mL。结论该免疫传感器的结果准确可靠,检测过程简便,价格低廉,有望用于实时检测系统,为实现快速、准确、价廉的CD4~+T淋巴细胞分类计数提供帮助。     

热应激通过激活NLRP3/IL-1β/IL-6途径介导肝脏炎症损伤效应

目的 探究热应激致肝炎症损伤的分子机制.方法 雌性SD大鼠随机分为对照组和热应激组,38℃暴露建立热应激动物模型,每天暴露2 h,连续3 d,分离肝组织;体外培养的L-02细胞分为对照组、热应激组、热应激+二甲基亚砜(DMSO)组及热应激+白藜芦醇组(100μmol/L),采用5％CO2,41℃暴露建立热应激细胞模型,...     

IL-17与H cy、Cys-C联合检测在2型糖尿病肾病肾损伤中的诊断价值

目的：研究白细胞介素-17（IL-17）与同型半胱氨酸（Hcy）和胱抑素C（Cys-C）联合检测在2型糖尿病肾病肾损伤中的诊断价值。方法将107例糖尿病肾病患者随机分为无清蛋白尿组，微量清蛋白尿组和临床清蛋白尿组，对照组选取同期门诊的健康体检者40例，比较其中 Hcy，Cys-C和IL-17的水平变化。结果糖尿病肾病组患者 Hcy，Cys-C 和IL-17水平明显升高，与对照组差异有统计学意义（P＜0．05），且随着蛋白尿排泄量的增加，IL-17，Hcy和Cys-C水平不断升高；IL-17与 Hcy、Cys-C水平呈正相关（分别为r＝0．75、r＝0．59，P＜0．05）；对照组IL-17与 Hcy、Cys-C的综合阳性检出率为5．0％，而微量清蛋白尿组和临床清蛋白尿组的联合检测阳性率分别为88．6％和91．9％，联合检测的阳性率明显高于对照组（P＜0．05），表明3项联合检测可显著提升2型糖尿病的检出率。结论 IL-17与 Hcy和Cys-C检测对糖尿病肾功能损伤较为敏感，联合检测阳性检出率高于各单项检出率，在预防、延缓糖尿病肾病中有较重要的临床价值。     

粒径差异化的纳米脂质载体的制备和表征

利用特色化的中心复合设计,以香豆素-6为模型药物,通过控制特定的因素和指标,制备粒径不同而其他性质相同的纳米脂质载体(NLCs),并对其形态、Zeta电位和包封率等理化性质进行研究。通过体外稳定性实验考察NLCs在K-R液和PBS缓冲液中的稳定性,同时以透析法研究制剂的体外释药行为特性。采用MTT法研究空白NLCs和载药NLCs的细胞毒性,活体成像技术考察NLCs在小鼠胃肠道中的滞留时间。结果显示:制备所得的粒径分别为100,200及300 nm的香豆素-6纳米脂质载体,分散性良好,在K-R液和PBS缓冲液中可以稳定存在,并且体外24 h香豆素-6的累积释放量均不超过总量的7%。MTT实验表明:空白NLCs和载药NLCs对Caco-2毒性较小。小鼠肠内滞留试验显示:NLCs在灌胃给药6 h后仍然能够在胃肠道中检测到。因此,制备得到的不同粒径NLCs可以作为模型制剂,用于细胞水平和动物水平上研究NLCs粒径对口服吸收的影响。     

电化学适配体传感器的研究进展

正核酸适配体是通过指数富集的配体系统进化技术(SELEX)体外筛选获得的,是一个短的单链脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)分子[1]。核酸适配体通过分子内的相互作用折叠形成特定的三维结构而与靶标分子特异性结合,其功能类似于抗体,因此核酸适配体被人们称为"化学抗体"。除此之外,适配体还拥有很多抗体无法比拟的优势,例如易修饰、可     

鲍氏不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药性分析

目的 分析临床分离的鲍氏不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药特点及耐药机制.方法 采用K-B纸片法测定33株鲍氏不动杆菌对喹诺酮类等21种抗菌药物的耐药性;用PCR技术扩增33株鲍氏不动杆菌的gyrA基因的耐药决定区,PCR产物经纯化后测序与GenBank中的标准序列比较,分析其突变情况.结果 33株鲍氏不动杆菌中,8株对环丙沙星耐药,占24.2％,4株对左氧氟沙星耐药占12.1％;对环丙沙星耐药的8个菌株均有gyrA基因突变,导致氨基酸变异为Ser-83→Leu,其中包括对左氧氟沙星耐药的4个菌株;所有对环丙沙星敏感的菌株未出现gyrA基因突变.结论 gyrA基因突变决定鲍氏不动杆菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药.     

常见肠杆菌科细菌临床株aac（6′）-Ib-cr基因的流行现状和耐药特征

目的研究氨基糖苷乙酰胺转移酶基因的突变形式aac（6′）-Ib-cr在肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌临床株中的分布状况;分析携带该基因菌株对环丙沙星、氨基糖苷类和头孢菌素类的耐药特征。方法利用多聚酶链式反应检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌临床分离株中aac（6′）-Ib-cr基因携带情况,采用BtsCI酶切消化,经DNA测序确认aac（6′）-Ib-cr基因;统计分析aac（6′）-Ib-cr基因与环丙沙星、头孢菌素类和氨基糖苷类耐药性关系。结果aac（6′）-Ib-cr基因在肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检出率分别为12．6％（30／238）和18．8％（13／69）;aac（6′）-Ib-cr阳性株与阴性株对环丙沙星的耐药率分别为72．1％（31／43）和48．1％（127／264）,差异有统计学意义（x2=8．52,P〈0．05）。肺炎克雷伯菌aac（6′）-Ib-cr基因阳性株对阿米卡星的耐药率高于aac（6′）-Ib-cr基因阴性株（x2=4．25,P〈0．05）。aac（6′）-Ib-cr基因阳性株和阴性株对庆大霉素的耐药率、常用的头孢菌素类的耐药率和多重耐药率均较高,无统计学差异。结论本地区肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌临床分离株中,aac（6′）-Ib-cr基因均有检出;aac（6′）-Ib-cr基因阳性株对环丙沙星耐药率明显高于阴性株,肺炎克雷伯菌中aac（6′）-Ib-cr基因阳性株对阿米卡星的耐药率明显高于阴性株,具有统计学意义。aac（6′）-Ib-cr基因阳性株和阴性株对常用头孢菌素类的耐药率和多重耐药率均较高,无统计学意义。     

检验医师规范化培训的问题分析与解决对策

目的 总结陆军军医大学第二附属医院检验住院医师规范化培训(简称“住培”)经验,为持续改进规范化培训工作奠定基础,为培养高素质检验医师团队提供参考。方法 结合科室住培教学开展情况,从课程体系设置及考核评估方面分析培训内容,总结教学经验,探讨存在的问题和可行的解决方案。结果 科学合理安排轮转顺序可保证同质均衡水平的培训效果;多维度精细化的教学模式能充分调动住培医师学习的积极性,丰富知识储备,建立临床及科研思维;将住培大纲学习内容科学合理的分散在实体运行岗各阶段,使住培医师更容易掌握操作技能;严格的考核评估制度是保证教学质量的关键环节,同时需注重保障教师教学能力,提高教学质量。提出结合实际制订培养计划、问题导向式教学及个性化分层培养方案的建议。结论 我国检验专业住培尚无统一的培训及考核标准,培养体系多注重过程考核,忽视了成果评价。各基地应结合自身实际制订培养计划,完善培养体系,各住培基地可采取优势互补,相互合作的培养方式。     

CRP和SF检测在急性胰腺炎临床分型及严重程度评估中的意义

目的研究C反应蛋白(CRP)、铁蛋白(SF)的表达水平在急性胰腺炎(AP)临床分型及严重程度评估中的意义。方法收集该院2014年2月至2015年10月收治的AP患者120例,进行回顾性分析,其中重症急性胰腺炎(SAP)32例,轻型急性胰腺炎(MAP)88例,另选取30例健康体检者作为健康对照组。测定健康对照组和AP患者入院初的血清SF、CRP、淀粉酶(AMY)及脂肪酶(LPS)水平。结果与健康对照组比较,早期SAP组、MAP组的SF、CRP、AMY、LPS水平均明显升高(P0.05);SAP组的SF、CRP水平均高于MAP组(P0.05),而AMY、LPS水平与MAP组比较差异无统计学意义(P0.05);SAP组SF阳性率水平明显高于MAP组(P0.05);早期AP患者血清SF和CRP呈正相关(r=0.227,P=0.013)。结论 SF和CRP均能够作为急性胰腺炎患者分型的重要标志物,SF在判断患者严重程度上优于CRP,具有重要的临床应用价值。