OCT4A基因对K562细胞生物学活性的影响

目的:探讨OCT4A基因体外对K562细胞生物学行为的影响及与凋亡相关的分子机制。方法:克隆人OCT4A基因,构建靶向上调及下调OCT4A基因与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的重组慢病毒表达载体p LVX-OCT4A-Zs Green1、PLB-OCT4A sh RNA,三质粒包装系统包装病毒,并测定滴度。实验分为空白对照、p LVX空质粒、p LVX-OCT4A-Zs Green1、PLB-OCT4A sh RNA和非特异sh RNA共5组。Western-blot检测各组OCT4A蛋白表达。CCK-8法绘制各组细胞增殖曲线。采用Annexin V/7-AAD标记流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞分化抗原CD11b和CD15表达;实时定量PCR检测caspase3、BIM、BCL-x L和BAX m RNA表达变化。结果:成功克隆人OCT4A基因,并成功构建重组慢病毒载体p LVX-OCT4A-Zs Green1和PLB-OCT4A sh RNA。Western blot证实2种病毒感染后可分别有效上调及下调OCT4A蛋白的表达。CCK-8法检测显示,p LVX-OCT4A-Zs Green1组K562细胞体外增殖活性明显升高,而p LVX-OCT4A sh RNA组K562细胞增殖活性显著降低(P0.05)。感染后p LVX-OCT4A-Zs Green1和PLB-OCT4A sh RNA 2组K562细胞凋亡率分别为(3.48±0.52)%和(7.25±0.57)%(P0.05),而OCT4A过表达及抑制后细胞表面分化抗原CD15、CD11b的表达无明显变化。OCT4A上调后Caspase-3、BIM、BAX较对照组均下调,但差异无统计学意义(P0.05),而BCL-x L基因表达则明显升高(P0.01)。结论:成功构建重组慢病毒载体p LVX-OCT4A-Zs Green1及PLB-OCT4A sh RNA,它们可分别有效地上调及下调OCT4A蛋白表达。OCT4A基因可促进K562细胞的增殖、抑制凋亡,其抑制凋亡机制可能与BCL-x L基因上调有关。     

纤维支气管镜治疗支气管结核合并肺不张疗效观察

支气管结核（EBTB）临床上并不少见，在活动性肺结核中约10％～40％伴有EBTB。单纯用抗结核药物化疗效果欠佳，尤其是对溃疡坏死型和肉芽增殖型支气管结核引起的肺不张。笔者在化疗的基础上应用纤支镜局部治疗，取得了很好的疗效，报告如下。     

携带人OCT4A基因的慢病毒载体的构建及其稳定转染K562白血病细胞株的建立

本研究旨在构建共表达人OCT4A与绿色荧光蛋白（GFP）慢病毒载体pLVX-OCT4A-ZsGreen1,并通过感染获得稳定表达重组质粒的白血病K562细胞系,观察OCT4A在其中的表达。根据Gen Bank数据库提供的OCT4A mRNA序列,合成编码mRNA基因的特异性引物序列,通过RT-PCR技术扩增出OCT4A全长片段,克隆至pCR-Blunt载体。将OCT4A DNA片段酶切回收后克隆至经EcoR1酶切线性化的慢病毒载体pLVX-IRES-ZsGreen1,构建pLVX-OCT4A-ZsGreen1慢病毒重组质粒,利用测序鉴定所构建的重组载体是否正确。经三质粒包装系统包装后获得高滴度慢病毒颗粒并感染人白血病细胞系K562,通过流式细胞仪分选获得稳定表达的白血病细胞系,应用Real-time PCR和Western blot方法分别检测稳定转染细胞系的OCT4A mRNA和OCT4A蛋白表达。应用CCK-8法和平板细胞克隆形成试验测定OCT4A对K562细胞增殖能力的影响。结果表明,经限制性内切酶检测及基因测序证实成功构建了携带OCT4A基因的重组慢病毒;包装病毒颗粒超速离心后病毒滴度达（1.43±0.25）×10^8U/ml;病毒感染K562细胞后经流式细胞仪分选获得GFP＋细胞,实时定量PCR及Western blot证实病毒感染后OCT4A基因及蛋白的表达可有效上调;CCK-8法及平板集落形成试验显示病毒感染的K562细胞体外增殖活性明显升高,与对照组相比均有统计学差异（P〈0.05）。结论：成功构建了表达OCT4A基因的慢病毒载体,并且获得可稳定上调OCT4A表达的K562细胞株。     

分布式异构数字资源整合概述

 

对分布式异构数字资源的整合检索模式、整合协议、资源连接方式、编码等几个方面

进行了概括介绍。

     

肺结核感染患者治疗前后血清TNF-α与IgE水平的临床观察

目的测定肺结核感染患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与免疫球蛋白E(IgE)的水平,分析其与病情间关系,探讨与预后的相关性,为临床诊治提供依据。方法采用酶联免疫方法测定42例肺结核感染患者治疗前后TNF-α以及用放射免疫方法测治疗前后血清总IgE水平,同时以41例健康体检者作为正常对照。结果在治疗前肺结核感染组血清TNF-α和血清总IgE水平较正常对照组明显升高(P<0.01)。经3个月治疗后肺结核感染组血清TNF-α和血清总IgE水平较治疗前明显降低(P<0.01),但与对照组比较两者仍明显较高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论 TNF-α可能参与了肺结核感染的发病过程,其与IgE水平的变化与患者病情和预后的关系密切,提示测定TNF-α与IgE水平对肺结核患者的诊断与预后具有一定的临床意义,可据此判断其感染程度,指导临床诊断和治疗。     

巴林特小组在改善肿瘤科护士职业倦怠感和工作-家庭冲突中的应用

目的:探讨巴林特小组在肿瘤科护士职业倦怠感和工作-家庭冲突中的应用。方法:将纳入本研究的护理人员分为对照组和试验组各23人,对照组实施常规心理干预,试验组在此基础上实施巴林特小组模式,应用职业倦怠感表和工作-家庭冲突表评价干预前后的效果。结果:干预后试验组职业倦怠感得分为(154.42±9.61)分,低于对照组的(160.43±9.73)分(P<0.05)。干预后试验组工作-家庭冲突得分为(24.47±2.98)分,低于对照组的(26.56±2.96)分,试验组家庭-工作冲突得分为(20.69±1.76)分,低于对照组的(22.78±2.02)分(P<0.05)。结论:巴林特小组能够有效改善肿瘤科护士职业倦怠感和工作-家庭冲突。     

基于放射治疗流程的二维码健康宣教单的设计和应用

目的探讨基于放射治疗流程的二维码电子宣教单在放疗患者健康教育中的应用效果。方法选取2017年5月—10月在肿瘤放疗科住院接受放疗的100例恶性肿瘤患者为研究对象,采用自行设计的基于放射治疗流程的二维码电子宣教单进行健康教育干预,并调查健康宣教育效果和患者对护理工作的满意度得分。结果 100例患者均按照治疗计划完成放疗,完成率为100%;健康教育知识得分为(91.53±4.95)分,对护理工作的满意度得分为(95.83±2.84)分。结论采用基于放射治疗流程的二维码电子宣教单进行健康宣教,有助于首次接受放疗的患者掌握健康宣教内容;护理工作得到患者认可。     

泊马度胺联合环磷酰胺、地塞米松治疗复发难治多发性骨髓瘤的效果及安全性

目的探讨泊马度胺联合环磷酰胺、地塞米松(PCD)方案治疗复发难治多发性骨髓瘤(MM)的效果及安全性。方法回顾性分析2021年3月至2022年6月蚌埠医学院附属连云港市第二人民医院采用PCD方案治疗的20例复发难治MM患者临床资料, 并选取同期29例采用其他方案(包括DECP方案13例、VCD方案16例)治疗的复发难治MM患者作为对照组。比较两组治疗4个周期的疗效及不良反应。结果治疗4个周期后, 20例PCD组患者的总缓解率(ORR)和临床获益率(CBR)分别为70.0%(14/20)和85.0%(17/20), 其中完全缓解(CR)5例, 非常好的部分缓解(VGPR)4例, 部分缓解(PR)5例, 微小缓解(MR)3例, 疾病稳定(SD)2例, 疾病进展(PD)1例;29例对照组患者的ORR和CBR分别为41.4%(12/29)和65.5%(19/29), 其中CR 2例, VGPR 3例, PR 7例, MR 7例, SD 5例, PD 5例;两组ORR比较差异有统计学意义(χ2=3.89, P=0.048), CBR比较差异无统计学意义(χ2=2.30, P=0.129)。两组肾功...     

职业接触木尘致过敏性哮喘13例临床分析

13例木尘过敏患者均表现为喘憋、呼吸困难,伴胸闷,听诊闻哮鸣音。经平喘,抗过敏等治疗,全部治愈。