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1.
以地高辛甙元随机引物法标记HBV-DNA探针,以此探针检测慢性乙型肝炎患者的血清、肝组织,同时以ELISA法检测血清HBeAg、HBcAb。结果:血清NBeAg阳性率27%(10/37),血清HBV-DNA检出率57.1%(20/35),两者有显著性差异。血清HBcAb阳性率78.4%(29/37),肝组织HBV-DNA检出率83.8%(31/37),两者无显著性差异。血清与肝组织HBV-DNA检出率有显著性差异。提示:血清HBV-DNA检测是较HBeAg更为准确客观反映血液带毒状况的指标。而准确反映肝脏带毒状况的指标是肝组织HBV-DNA检测。当HBeAg阴转,血清HBV-DNA阴性而肝组织HBV-DNA阳性时,需注意肝硬化及肝癌的发生。 相似文献
2.
HBV DNA及HBxDNA亚片段在肝癌细胞内的整合及作用 总被引:13,自引:0,他引:13
为探讨HBVDNA及其亚基因片段HBxDN在肝细胞肝癌(HCC)中整合特点用机制,制备了地高辛标记的3.2kbHBVDNA全基因及0.59kbHBVDNA/BamHI,BglⅡBHxDNA亚基因探针。点杂交、原位杂交及Southern杂交检测HBVDNA的存在情况,筛选HBVDNA纯整合标本,以HBxDNA探针检测HBxDNA在HCC染色体的整合。结果显示HBVDNA在肝细胞内以核型为主(70%) 相似文献
3.
目的用分子克隆技术构建肝癌组织特异性N-rascDNA正义与反义表达载体.方法用BamHI酶切携带目的基因的质粒pZIP-NeoSV(X)1,获得1.06kbN-rascDNA;同时以BamHI将载体pEBAF线性化,并行去磷酸化修饰,用T4DNA连接酶将两者连接,转化感受态细菌DH5α.先以酶切和随机引物法标记的N-rascDNA探针进行菌落原位杂交筛选阳性重组克隆,再以PvuⅡ酶切鉴定插入方向,同时进行DNA测序和同源性分析.结果成功构建肝癌组织特异性正义与反义表达载体pEBAF/s-N-ras和pEBAF/as-N-ras.结论成功构建的N-rascDNA正/反义表达载体,为原发性肝癌的发生机理和基因治疗研究奠定良好的基础. 相似文献
4.
应用分子杂交及免疫组化方法检测56例HCC组织内的抑癌基因p16。结果显示,HCC标本中p16蛋白在癌细胞内表达的阳性率为375%(21/56),而p16DNA斑点杂交的阳性率为5536%(31/56)。Southern转膜杂交证实,125%(7/56)HCC标本存在p16的甲基化变异,4464%(25/56)p16基因缺失。提示HCC发生、发展过程中存在p16基因的缺失和甲基化变异 相似文献
5.
基因工程学是一门新兴的前沿科学,已成为二十一世纪生命科学中一门重要的学科,基因工程技术已渗透到医学、工业、农业等多种生命科学领域。现已利用基因工程的技术对二十多种疾病,七百多个病人进行基因治疗;已使许多疾病的发病机理得以阐明,使临床上不少疾病的诊断和治疗有了长足的进步,基因工程药物的生产和临床应用,不仅推动了医学的发展,而且带动了医药工业的腾飞;转基因植物的成功大大提高了农作物的产量并使我们的世界更加灿烂;克隆羊的出现震惊了全世界。二十一世纪,基因工程将发挥更大的作用。 相似文献
6.
IL-10对大鼠佐剂性关节炎的治疗及免疫机理探讨 总被引:2,自引:0,他引:2
形成佐剂性关节炎(AA)的动物模型,研究IL-10的抗炎作用及其机理。结果表明,经腹腔注射IL-10后能改善AA大鼠病情,用IL-10治疗取得显效后,AA大鼠血清及关节液内炎症细胞因子IL-1,6,8,TNF水平均明显下降,腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞分泌细胞因子的能力均受到抑制。表明IL-10是通过抑制炎症细胞因子的产生而发挥治疗作用的。此项研究为用IL-10治疗人风湿性关节炎(RA)等难治性炎症性疾病提供了理论和实验依据 相似文献
7.
目的:研究HBV感染对树突状细胞功能的影响,探讨慢性乙型肝炎患者免疫耐受发生的机制。方法:利用脂质体转染的方法,以携载HBV全基因的真核表达载体pcDNA3-HBV及对照空载体pcDNA3质粒DNA分别转染小鼠骨髓细胞,以细胞因子GM-CSF、IL-4及TNF-α诱导培养树突状细胞,RT-PCR检测转染后HBV PreS1 mRNA的表达。流式细胞术检测转染前后树突状细胞表面分子CD80的表达,3HTdR掺入法观察其刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,流式细胞术进一步检测NF-κB RelA蛋白的表达。结果:pcDNA3-HBV瞬时转染后树突状细胞CD80表达降低,其刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力下降,NF-κB RelA蛋白表达显著减少。结论: HBV可抑制树突状细胞的分化成熟,降低其刺激T淋巴细胞增殖的功能,这可能是慢性乙型肝炎患者免疫耐受的机制之一。 相似文献
8.
采用BCG及福氏完全佐剂激活豚鼠、小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)后,进行Mφ—胸腺细胞自身花环试验,实验组的成花百分率及成花能力均高于对照组;吞噬和杀菌功能试验,实验组的吞噬百分率、吞噬指数及杀菌率均高于对照组;用相差显微镜观察激活后Mφ形态学的变化,表明Mφ体积增大,多呈多角形或梭形,未激活的Mφ很少有形态变化。 相似文献
9.
miR-122表达载体的构建及其对HepG2.2.15细胞增殖的抑制作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建miR-122表达载体并检测其表达对HepG2.2.15细胞恶性表型的逆转作用。方法以HepG2.2.15细胞基因组DNA为模板,PCR扩增miR-122前体cDNA序列,以质粒pSilencer3.1-H1 neo为母本,构建miR-122表达载体将其转染HepG2.2.15细胞。表达后,利用ELISA检测HepG2.2.15细胞HBV复制和表达的变化,利用CCK8检测细胞增殖的变化。结果构建的miR-122表达载体可在HepG2.2.15细胞中表达。转染后HepG2.2.15细胞中HBV复制、表达以及细胞增殖均被抑制。结论 miR-122表达载体可在HepG2.2.15细胞中有效表达,其表达可抑制HBV复制、表达以及细胞增殖。 相似文献
10.
目的 :检测人CD137L在肿瘤细胞的表达及其功能。方法 :采用RT PCR、FACS方法检测人CD137L在肿瘤细胞的表达 ,用ELISA方法检测CD137L对肿瘤细胞分泌IL 8的影响。结果 :9种不同来源的人肿瘤细胞系均不同程度表达CD137L ,其中 ,BEL 74 0 2、HL 6 0、A2细胞系呈高水平表达 ;HepG2 .2 .15、L 78、HT 2 9细胞系中度表达 ;U937、H6、HLE细胞系低表达。胚胎细胞系ECV 30 4中度表达 ,而新分离的正常外周血单个核细胞不表达。CD137L的表达水平与肿瘤细胞系的来源无关 ,同一组织来源的细胞系 ,有的高表达 ,有的低表达。肿瘤细胞上的CD137L对肿瘤细胞本身IL 8的分泌可产生不同的影响 :可使HepG2 .2 .15分泌IL 8的水平增加 ,但对HLE、A2 ,只能微弱地增强肿瘤细胞释放IL 8。结论 :CD137L在肿瘤细胞上的表达是普遍现象 ,其表达可能与细胞的快速生长有关 ;肿瘤细胞的CD137L可增强某些细胞系分泌IL 8。 相似文献