兔膝关节软骨单位微管吸吮黏弹性力学分析

目的 探讨体外急性消化软骨单位的生物力学特性.方法 成年8月龄新西兰白兔8只,随机分为两组,各4只.无菌条件下剖取双膝关节全层软骨,一组采用常规质量浓度0.4%的pronase酶和质量浓度0.025%的Ⅱ型胶原酶依次消化为软骨细胞;另一组采用质量浓度0.3%的dispase酶和质量浓度0.2%的Ⅱ型胶原酶联合搅拌消化3 h为软骨单位.利用微管吸吮结合半无限体细胞力学模型定量分析急性消化软骨细胞及软骨单位黏弹性力学特性,包括平衡模量(E∞)、瞬间模量(E0)和表观黏性(μ)等黏弹性参数.结果 成年软骨细胞在0.2-0.4 kPa恒定微管负压下,表现为典型黏弹性固体特征,即在微管中产生瞬间微小变形,随后发生形率单调减小的蠕变过程,其到达平衡状态时间为(110±18)s.成年软骨单位在微管吸吮负压提高到1.0～1.2 kPa时,与软骨细胞发生同样的黏弹性蠕变行为,但其瞬间吸入微管内的长度明显减少,且到达平衡状态的时间缩短为(36.5±4.5)s.同时,软骨单位黏弹性参数平衡模量(E∞)、瞬间模量(E0)和表观黏性(μ)均明显高于软骨细胞.结论 与软骨细胞相比,成年软骨单位同样表现为黏弹性固体特征,但其黏弹性力学特性明显提高.

Abstract：

Objective To characterize the biomechanical behavior and properties of the chondrons enzymatically isolated from rabbit knee articular cartilage in virto. Methods Eight months old New Zealand white rabbits were randomly divided into chondroctye and chondron groups (4 rabbits in each group). In chondrocyte groups, the full articular cartilages from both knees were enzymatically isolated to chondrocytes by 0.4% pronase and 0.025% collagenase type-Ⅱ in turn. In chondron groups, chondrons were obtained from articular cartilage using the mixture of 0.3% dispase (a neutral protease) and 0.2% collagenase type-Ⅱin at 37C for 3 h. The micropipette aspiration was used to quantify changes in biomechanical properties of chondrons and chondrocytes and the viscoelastic parameters, including K1, K2, E∞ (equilibrium modulus), E0(instantaneous modulus), and μ (apparent viscosity), were calculated coupled with standard linear half-space viscoelastic solid model. Results In response to a constant negative pressure of 0.2-0.4 kPa, the chondrocytes exhibited standard linear viscoelastic solid properties. Namely, the cells showed an initial elastic response followed by a viscoelastic creep response. then cells continued to enter into the micropipette with a monotonically decreasing rate of deformation, until reaching equilibrium within about (110±18) s. Comparing with chondrocytes, the chondrons exhibited significant viscoelasticity under a greater negative pressure of 1.0-1.2 kPa. But the instantaneous length deformed into the micropipette significantly reduced, and the equilibrium time reduced to (36.5±4.5) s. The equilibrium modulus (E∞), the instantaneous modulus (E0) and the apparent viscosity (μ) of chondrons were significantly higher than the those of chondrocytes. Conclusion Comparing with chondrocytes, the chondrons exhibited significant viscoelastic properties, and viscoelastic properties of chondrons have increased in vitro.     

溴结构域蛋白4与口腔鳞癌HN4细胞系增殖与迁移能力的关系

目的 研究溴结构域蛋白4(BRD4)与口腔鳞癌细胞增殖与迁移能力的关系。方法 回顾性选取2019年3月至2020年8月锦州医科大学附属第二医院收治的4例口腔鳞状细胞癌患者,收集患者的口腔颌面部肿瘤组织样本。培养口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞和人口腔黏膜正常上皮细胞株HOK细胞,采用蛋白质印迹法检测BRD4蛋白在OSCC组织、邻近的非肿瘤组织中、正常上皮细胞株及OSCC细胞株中的表达水平。采用免疫荧光法检测BRD4在正常上皮细胞株及OSCC细胞株中的表达水平。采用免疫荧光法检测BRD4在HN4细胞中的表达水平。BRD4 siRNA转染HN4细胞干扰BRD4表达,然后Ki67和CCK-8实验检测HN4细胞增殖活力;采用Transwell实验和划痕实验检测BRD4 siRNA处理后的HN4细胞的迁移能力。采用蛋白质印迹法测定上皮间充质转化(EMT)标志蛋白的表达水平。实验中根据研究内容设置对照组和实验组。结果 蛋白质印迹法检测结果显示,BRD4在OSCC组织中的相对表达水平为1.330±0.453,远高于其在邻近的非肿瘤组织中的相对表达水平(0.732±0.242),差异有统计学意义(P&l...     

经后路减压内固定治疗胸腰椎骨折伴脊髓损伤的效果探讨

目的：探讨经后路减压内固定治疗胸腰椎骨折伴脊髓损伤的临床效果。方法采用经后路减压内固定对患者进行治疗后,以 Frankel 脊髓损伤分级评价标准为依据,比较患者术前、术后的脊髓损伤变化情况。结果本组60例患者行后路减压融合内固定术后,损伤椎体前缘高度平均恢复至（12.8±1.2）mm,椎体后缘高度平均恢复至（3.2±0.6）mm,脊柱后凸角度平均恢复至（14.18±0.51）°;所有患者伤口均于2周内愈合,未发生压疮、感染等并发症;术后6个月～1年的随访结果显示所有患者植骨融合愈合均十分顺利。结论后路减压融合内固定术治疗胸腰椎骨折伴脊髓损伤具有较好的临床效果,能够有效减少手术时间与术中出血量,降低损伤程度,具有较高的临床推广价值。     

颈部淋巴结肿大的临床病理分析

淋巴结是接受抗原刺激产生免疫应答的场所，具有过滤，增殖，免疫作用。作者对颈部淋巴结肿大患者的病理检查结果结合临床进行分析，报道如下。     

急性消化成年兔膝关节软骨单位与软骨细胞基因表达分析

目的探讨急性消化成年兔膝关节软骨单位和软骨细胞基因表达的差异。方法 8月龄新西兰兔5只, 无菌条件剖取双膝关节股骨髁全层软骨组织, 左侧膝关节软骨组织采用0.4%Pronase酶和0.025%Ⅱ型胶原酶依次酶解消化获取软骨细胞, 右侧膝关节软骨组织采用0.3%dispase酶和0.2%Ⅱ型胶原酶联合搅拌酶解消化3 h获取兔膝关节骨单位。通过实时定量PCR对急性消化软骨细胞和软骨单位基因表达进行分析, 包括基质蛋白[聚集蛋白聚糖(Agg)、胶原蛋白(Col)-2、Col-6A6、Col-10、Col-11]、MMPs及MMPs抑制因子(TIMPs)(MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13、TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3)、性别决定区Y-框蛋白9(Sox)-9及细胞骨架蛋白(黏着斑蛋白、微管蛋白、肌动蛋白)、炎症因子(IL-1β、TNF-α)。采用SPSS 16.0统计软件进行分析, 采用t检验, 以P<0.05表示差异具有统计学意义。结果与软骨细胞相比, 软骨单位中Agg[(5.78±0.90)与(1.89±0.27), t=9.26, P<0.001]、...     

关节软骨中最基本的解剖功能结构：软骨单位

背景：关节软骨单位作为近年来才逐渐被重视的关节软骨功能结构,大量研究证实其在关节软骨代谢、力学传导及退变过程中发挥着重要作用,其明确的功能及作用机制问题尚需进一步深入研究。 目的：对关节软骨基本解剖功能结构—软骨单位的组织形态、功能、体外消化分离及退变的相关研究进行综述。 方法：计算机检索PubMed数据库2009-07前的相关研究论文进行综述,其中包括本实验室一些软骨细胞及软骨单位的相关前期研究数据和图片资料。 结果与结论：与周围基质相比,细胞周基质的特异性成分为Ⅵ型胶原,新生期该成分广泛存在于细胞外基质中,随着年龄增长,Ⅵ型胶原等成分逐渐浓缩于细胞周围狭窄区域。近期,有学者利用激光共聚焦显微镜对软骨细胞及软骨单位的体内原位形态学进行定量检测,利用微管吸吮和原子力显微镜等最新技术对软骨细胞及细胞周基质的生物力学特性进行检测。更多研究发现,细胞周基质的存在明显改变了软骨细胞相关基因表达。同时,在骨关节炎软骨退变时,软骨单位及细胞周基质同样发生了相应的退行性改变。目前,尽管细胞周基质的具体功能不是很明确,但越来越多的体内外研究证实,细胞周基质的存在调整了软骨细胞的代谢及力学微环境,软骨单位为关节软骨中最基本的解剖功能结构。     

铁法矿区职工代谢性疾病现状分析

目的:了解铁法矿区职工代谢性疾病的现状及分布特点,综合防治多重心血管病危险因素.方法:对所有井下职工及部分地面职工进行健康体检,在进行体格检查和问卷调查同时,检测血糖、血脂.结果:高血压患病率15.84%,糖尿病7.99%,空腹血糖调节受损10.46%,混合性高脂血症59.48%、体重指数增加42.26%,吸烟42.56%,饮酒57.97%.结论:铁法矿区职工代谢性疾病发病率高,综合防治多重心血管病危险因素、预防和控制这些疾病成为医务工作者的重点.     

农村卫生室用药现状调查及监管对策

农村医疗用药的管理、使用、监督一直是药事管理的薄弱环节,农村地区药品的质量也是群众反映的热点问题之一[1].我局与闵行区卫生局于2002年3～5月,就闵行区农村医疗机构用妹药现状和农村卫生机构在镇村实施一体化管理后,如何监管问题进行了联合调查和探讨,现将结果报告如下.     

局部晚期非小细胞肺癌自适应放化疗后PD-1抑制剂巩固治疗的征招挑战

摘 要：［目的］ 评估不可切除的Ⅲ期非小细胞肺癌患者在自适应放化疗后接受免疫巩固治疗的征招情况。［方法］ 2018年11月到2019年12月不可切除Ⅲ期非小细胞肺癌行标准含铂同步放化疗,肿瘤靶区放疗处方剂量为64~66 Gy,计划靶区放疗处方剂量为54 Gy/30 f,同步推量,在放疗20次后给予离线自适应重新定位CT和重新计划,并在放疗后根据入组标准确认符合性。同意入组并符合条件在放疗完成后45 d内给予信迪利单抗（Sintilimab）,200 mg q3w,维持1年。主要终点是同步放化疗后≥2级的毒性反应。［结果］ 107例潜在符合条件的患者接受了自适应同步放化疗。在放化疗前拒绝接受信迪利单抗巩固治疗88例,19例患者同意接受信迪利单抗巩固治疗。不同意入组患者中,有16例(18.2%)放疗结束后不符合纳入标准,主要不符合条件包括7例未解决的2级及以上放射性肺炎,5例未解决的2级及以上放射性食管炎,2例两者都有,2例未解决的3级白细胞减少。同意入组患者中,4例(21.1%)不符合条件,包括2例未解决的2级放射性肺炎,1例未解决的3级放射性食管炎,1例未解决的3级白细胞减少。［结论］ 在20次离线自适应放化疗后,约有20%患者在同步放化疗结束后不符合免疫巩固治疗入组标准。不符合入组的主要原因是急性放化疗毒性,特别是放射性肺炎和放射性食管炎。     

不同年龄兔膝关节软骨单位和软骨细胞生物力学特性分析

研究背景：软骨细胞作为关节软骨组织的唯一细胞成分,其力学环境的变化直接影响关节软骨正常的生理功能。其中,细胞周基质（PCM）、细胞膜及细胞骨架等在维持软骨细胞力学特性的过程中具有重要作用。本实验与软骨细胞比较,利用微管吸吮技术定量分析体外酶解消化兔膝关节软骨单位（chondron）的黏弹性力学特点。同时,通过分析软骨细胞和软骨单位随年龄增长力学特性的变化,探讨软骨单位在关节软骨发育成熟及退变力学机制中的作用。 方法：新西兰白兔按年龄分为三组：幼年组（2月龄）、中年组（8月龄）及老年组（31月龄）,各组10只。无菌条件下剖取双膝关节全层软骨,其中右膝关节软骨组织采用常规0.4% Pronase酶和0.025% II型胶原酶依次消化为软骨细胞;右膝关节软骨采用0.3% dispase酶和0.2% II型胶原酶联合搅拌消化3h为软骨单位。利用微管吸吮结合半无限体细胞力学模型定量分析急性消化不同年龄软骨细胞及软骨单位黏弹性力学特点,包括平衡模量E∞、瞬间模量E0和表观黏性μ等黏弹性参数。 同时,将不同年龄软骨单位进行体外贴壁单层培养过夜,采用倒置显微镜、HE染色以及Ⅵ型胶原免疫荧光显微镜观察等方法分析不同年龄软骨单位体外组织形态学特点。 结果：在0.3～0.4 kPa恒定微管负压状态下,不同年龄软骨细胞均表现为典型的黏弹性固体特性。定量分析表明,老年组软骨细胞黏弹性力学较幼年组和中年组比较明显降低(P<0.001),但幼年和中年组之间无明显差异(P>0.05)。与软骨细胞比较,体外消化软骨单位细胞周基质成分完整,并且较好地保留了不同年龄软骨单位原位的组织形态学特点。与软骨细胞比较,将微管负压提高到1.0～1.1 kPa,幼年组和中年组软骨单位同样表现为黏弹性蠕变行为。但软骨单位蠕变幅度和时间明显降低,且中年组和幼年组软骨单位黏弹性力学参数（E∞, E0 和μ）较同年龄软骨细胞明显提高(P<0.001)。同时,随年龄增长,软骨单位体外黏弹力学特性逐渐增高。其中,中年组软骨单位较幼年组比较力学特性明显提高(P< 0.001),老年组软骨单位在同样的负压状态下,未发生任何的蠕变变形行为。 结论：本实验建立了一种将体外软骨单位作为整体结构进行定量微观吸吮力学分析的实验方法。同时,研究结果进一步提示软骨单位及细胞周基质在关节软骨发育成熟及退变机制中的力学作用。