新生儿重症监护室5例早产儿肠球菌感染的鉴定及同源性分析

目的对北京协和医院新生儿重症监护室(neonatal intensive care units,NICU)早产儿定植和感染部位、环境及益生菌中分离出的肠球菌进行菌种鉴定及同源性分析。方法收集2017年6月1—10日NICU及益生菌制剂中分离出的肠球菌共11株,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行菌种鉴定,采用微量肉汤稀释法测定临床常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),用多位点序列分型(MLST)及脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行菌株同源性分析。结果 11株菌均为粪肠球菌,对氨苄西林、万古霉素、替考拉宁、呋喃妥因、氯霉素、左氧氟沙星、利奈唑胺等抗菌药物均表现为敏感,仅1株菌对四环素和红霉素耐药。11株粪肠球菌经PFGE分为a-d 4个克隆群,MLST分型分别为ST624、ST25、ST40及ST16,PFGE与MLST分型结果一致。结论此次NICU早产儿粪肠球菌定植或感染可能与益生菌制剂的使用及物表定植的粪肠球菌相关。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中质粒介导的喹喏酮类耐药研究

目的:研究国内11家医院分离大肠埃希菌(ECO)和肺炎克雷伯菌(KPN)中质粒介导的喹喏酮类耐药。方法:收集北京大学第三医院无重复临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBL s)的ECO和KPN共84株,另10家医院相应菌株共155株,北京协和医院对头孢西丁不敏感的ECO和KPN共25株。采用琼脂稀释法测定抗生素最低抑菌浓度M IC;接合实验判断该基因位置和移动性;聚和酶链反应(PCR)及其产物测序确定基因型。结果:北医三院84株菌中1株KPN(编号24)阳性,ECO的发生率是0;余10家医院155株产ESBL s菌株中没有阳性结果;协和医院25个临床株中3株KPN(编号P 3、P 6、P 10)阳性。这4株菌只有P 6接合试验阳性,相应接合子qnr-PCR阳性。环丙沙星C IP对该菌的M IC是0.5μg/m l,对该接合子的M IC是1μg/m l,而对受体菌EC 600的M IC是0.125μg/m l。对24号标本和P 6标本及其接合子进行测序证实:二者的qnr↑序列和AY 878718(qnrA)100%同源,并且qnr基因的上游都有ORF 513存在。结论:北医三院和北京协和医院分类株中存在质粒介导的喹喏酮类耐药基因qnr,其他医院分离株本次研究中未发现该基因。     

世界卫生组织关注的临床重要细菌耐药变迁:北京协和医院10年数据分析

  目的   了解世界卫生组织关注的临床重要细菌在北京协和医院的耐药变迁趋势。   方法   采用WHONET 5.6软件进行数据分析。   结果   46 168株非重复细菌中, 铜绿假单胞菌6679株, 鲍曼不动杆菌6422株, 肠杆菌科细菌24 001株(其中大肠埃希菌11 046株、肺炎克雷伯菌6034株), 屎肠球菌2358株, 金黄色葡萄球菌6056株, 肺炎链球菌652株。10年来, 北京协和医院碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌的检出率从38.3%(2007年)下降至22.4%(2016年); 碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的检出率从52.8%(2007年)上升至71.9%(2016年); 碳青霉烯类耐药肠杆菌科的检出率从1.9%(2007年)上升至5.3%(2016年), 其中肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药率从1.3%(2007年)上升至14.4%(2016年); 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)的检出率从56.5%(2007年)下降至27.0%(2016年); 屎肠球菌对万古霉素的耐药率近5年为3.3%~5.8%;肺炎链球菌对青霉素不敏感株的检出率近2年为0.9%~6.4%。   结论   肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药率仍呈上升趋势, 给临床的抗感染治疗带来了极大挑战。     

2005年我国五家教学医院革兰阳性球菌耐药监测研究

目的调查2005年我国革兰阳性球菌的耐药现状与监测方法收集2005年8月至12月五家教学医院连续分离的非重复的460株革兰阳性球菌。采用琼脂稀释法测定药物的最低抑菌浓度（MICs）。结果80株肺炎链球菌中，青霉素中介（PISP）和青霉素耐药（PRSP）株的发生率分别为25．0％、21．2％。PRSP和PISP的发生率最高的是杭州（分别为55．6％、11．1％），其次是上海（16．7％、27．8％），再次为北京（5．6％、27．8％）、武汉（5％、20％）。替考拉宁和万古霉素对这80株菌的活性最高（100％敏感），其次是莫西沙星（96．2％）、左氧氟沙星（91．2％）和阿莫西彬克拉维酸（85％），红霉素、克林霉素、四环素、甲氧苄啶／磺胺甲嚼唑敏感性低于26．2％。苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）和苯唑西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCoN）的发生率分别为51．3％和77．4％。MRSA的发生率最高的是上海（78．4％）、杭州（60．0％），其次为沈阳（45．9％）、北京（40．0％）和武汉（33．3％）。对于MRSA，活性较高的药物为氯霉素（69．4％）、利福平（68．4％）和甲氧苄碇／磺胺甲嚼唑（63．3％）。粪肠球菌对青霉素、氨苄西林的敏感性（85％以上）高于屎肠球菌（20％）；53％的粪肠球菌和25．5％的屎肠球菌对庆大霉素高水平耐药。所有金葡菌、CoNS、肠球菌属对万古霉素、替考拉宁敏感。结论不同地区革兰阳性球菌的耐药性有所差异。替考拉宁和万古霉素对革兰阳性球菌的活性非常高。     

北京协和医院1990—2009年住院患者尿道感染常见病原菌及其耐药性

  目的  了解住院患者尿道细菌感染常见病原菌及其对抗菌药物的耐药性。  方法  用纸片扩散法对1990-2009年北京协和医院住院患者尿道感染分离的4565株病原菌进行抗菌药物耐药监测。  结果  20年来北京协和医院住院患者尿道感染以大肠埃希菌检出率最高(33%), 其次为粪肠球菌(12%)、屎肠球菌(8%)、凝固酶阴性葡萄球菌(7%)、铜绿假单胞菌(6%)和肺炎克雷伯菌(6%)。2006-2009年产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lac-tamases, ESBLs)的大肠埃希菌检出率为60%;大肠埃希菌对亚胺培南、美罗培南和厄他培南均100%敏感, 对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率为77.7%和76.4%。粪肠球菌对呋喃妥因和磷霉素的耐药率均低于10%。  结论  住院患者尿道感染最常见的病原菌是大肠埃希菌, 且细菌耐药性呈增长趋势, 临床上应加强细菌耐药监测。     

北京协和医院外科住院患者细菌耐药性监测

  目的  了解北京协和医院外科住院患者临床分离细菌分布及对抗菌药物的耐药性。  方法  收集2012年1月1日至2013年12月31日北京协和医院外科住院患者临床分离的3084株非重复细菌, 采用纸片扩散法或自动化仪器法进行药敏试验, 按美国临床实验室标准化协会2013年版标准判读药敏结果, 采用WHONET 5.6软件进行数据分析。  结果  3084株非重复细菌中, 10种最常见的细菌依次为鲍曼不动杆菌(14.1%)、大肠埃希菌(12.4%)、铜绿假单胞菌(12.4%)、肺炎克雷伯菌(11.8%)、金黄色葡萄球菌(8.9%)、粪肠球菌(5.4%)、凝固酶阴性葡萄球菌(5.3%)、阴沟肠杆菌(3.7%)、嗜麦芽窄食单胞菌(3.6%)和屎肠球菌(3.2%), 其中革兰阴性菌占71.6%(2208株), 革兰阳性菌占28.4%(876株)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-resistant coagulase-negative Staphylococcus, MRCNS)的检出率分别为42.7%(117/274)和77.3%(119/154)。MRSA和MRCNS对β-内酰胺类和其他抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-susceptible Staphylococcus aureus, MSSA)和甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-susceptible coagulase-negative Staphylococcus, MSCNS)。MRSA中80.3%菌株对磺胺甲噁唑-甲氧苄啶敏感, MRCNS中95.0%菌株对利福平敏感。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。粪肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率明显低于屎肠球菌, 但后者对氯霉素的耐药率较低, 仅为4.3%。分别发现1株和5株万古霉素耐药的粪肠球菌和屎肠球菌。未发现对利奈唑胺耐药的肠球菌。产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases, ESBLs)的大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌的检出率分别为56.7%(217/383)、23.8%(97/408)和22.8%(13/57)。产ESBLs菌株的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物仍高度敏感, 总耐药率1.6%~3.3%。泛耐药肺炎克雷伯菌的检出率为0.8%(3/363)。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为19.5%和15.0%, 对阿米卡星的耐药率最低(8.6%); 鲍曼不动杆菌对上述两种抗菌药物的耐药率分别为74.1%和74.0%, 对米诺环素和头孢哌酮-舒巴坦的耐药率最低(28.9%和51.5%)。泛耐药鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的检出率分别为44.3%(193/436)和0.8%(3/381)。  结论  定期进行耐药性监测有助于了解细菌耐药性变迁, 为临床经验用药提供依据。     

2005—2010年北京协和医院细菌耐药性监测

目的了解北京协和医院2005—2010年临床分离细菌对抗菌药物的耐药性。方法共收集2005—2010年临床分离的26 459株非重复的细菌,采用纸片扩散法进行药敏试验,按CLSI 2010年版标准判读药敏试验结果,采用WHONET 5.4软件进行数据分析。结果 26 459株非重复株中最常见的菌种分别为:大肠埃希菌(17.7%)、铜绿假单胞菌(10.5%)、金葡菌(10.3%)、鲍曼不动杆菌(9.9%)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS,9.4%)、肺炎克雷伯菌(8%)、粪肠球菌(5%)、屎肠球菌(4.5%)、嗜麦芽窄食单胞菌(3%)和阴沟肠杆菌(2.8%)。其中革兰阴性菌占64.9%,革兰阳性菌占35.1%。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林CNS(MRCNS)的检出率分别为52.8%和59.2%。MRS对β内酰胺类和其他抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感葡萄球菌(MSS)。仍有76.4%和87.6%的MRSA对甲氧苄啶磺胺甲噁唑和磷霉素敏感。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。粪肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率明显低于屎肠球菌。发现少数耐万古霉素和替考拉宁的粪肠球菌和屎肠球菌,根据表型推测多数对万古霉素耐药的肠球菌可能为VanA型,未发现对利奈唑胺耐药的肠球菌属细菌。β溶血链球菌对青霉素的敏感率为94.6%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌中ESBLs的检出率分别为47.0%、27.2%、23.6%和5.4%。产ESBLs菌株对测试药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。2010年发现少数泛耐药肺炎克雷伯菌(2.6%,13/497)和大肠埃希菌(0.2%,2/993)。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为27.1%和20.9%,对阿米卡星的耐药率最低(13.2%)。鲍曼不动杆菌对上述2种碳青霉烯类抗生素的耐药率分别为49.0%和66.6%,对头孢哌酮-舒巴坦和米诺环素的耐药率最低,分别为36.0%和14.2%。2010年泛耐药鲍曼不动杆菌的检出率(51.5%)明显高于2009年(42.2%)。结论细菌对抗菌药物的耐药性呈增长趋势,特别对MRSA、耐万古霉素肠球菌(VRE)、多重耐药和泛耐药的肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌,已成为临床治疗面临的挑战。     

腹腔感染细菌流行病学调查

目的监测2006年10月至2007年10月我国不同地区14家教学医院分离的腹腔感染病原菌的菌种分布及其体外药物敏感性。方法按设计方案收集来自腹腔感染的病原菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定10类共29种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）,数据输入WHONET5．4软件进行耐药性分析。结果此次监测收集的腹腔感染病例数为742例,分离出的病原菌为743株,其中革兰阴性菌占76．7％（570／743）,革兰阳性菌占23．3％（173／743）。病原菌中分离率位于前5位的分别为大肠埃希菌（38．8％）、肺炎克雷伯菌（10．2％）、铜绿假单胞菌（9．2％）、屎肠球菌（8-2％）和金黄色葡萄球菌（4．4％）。对于所有肠杆菌科菌,敏感率高于90％的抗菌药物包括美罗培南、亚胺培南、替加环素、阿米卡星和他唑西林-三唑巴坦。对产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的大肠埃希菌和克雷伯菌,敏感性大于90％的药物包括亚胺培南（100％）、美罗培南（100％）、替加环素（100％）和他唑西林-三唑巴坦（91．5％～91．7％）。铜绿假单胞菌中多重耐药菌株的检出率为14．7％,鲍曼不动杆菌为61．3％。金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林（MRSA）的发生率为69．7％,所有菌株对替加环素、万古霉素和替考拉宁均敏感。替加环素对所有粪肠球菌和屎肠球菌均保持了100％的敏感率。粪肠球菌中敏感性较高的抗菌药物还有万古霉素（100％）、替考拉宁（100％）和氨苄西林（81．5％）。屎肠球菌中敏感性较高的抗菌药物还有万古霉素和替考拉宁（96．7％）。结论引起腹腔感染的病原菌以革兰阴性菌特别是肠杆菌科菌为主。替加环素、碳青酶烯类、他唑西林-三唑巴坦和阿米卡星对腹腔感染肠杆菌科菌保持了较高的抗菌活性,非发酵的革兰阴性杆菌的耐药性令人担忧。替加环素、万